| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 转录因子的研究概况 | 第13-15页 |
| 1.1.1 转录因子的结构与功能区 | 第13-14页 |
| 1.1.1.1 转录因子的DNA结合区 | 第13页 |
| 1.1.1.2 转录因子的转录调控区 | 第13-14页 |
| 1.1.1.3 转录因子的核定位信号 | 第14页 |
| 1.1.1.4 转录因子的寡聚化位点 | 第14页 |
| 1.1.2 转录因子的活性 | 第14-15页 |
| 1.1.3 转录因子的分类 | 第15页 |
| 1.2 高等植物转录因子家族 | 第15-19页 |
| 1.2.1 bZIP类转录因子家族 | 第15页 |
| 1.2.2 WD40类转录因子家族 | 第15-16页 |
| 1.2.3 MYB类转录因子家族 | 第16页 |
| 1.2.4 bHLH类转录因子家族 | 第16-18页 |
| 1.2.4.1 bHLH转录因子的结构域 | 第16-17页 |
| 1.2.4.2 bHLH转录因子家族分类 | 第17页 |
| 1.2.4.3 bHLH转录因子的功能 | 第17-18页 |
| 1.2.5 高等植物中调节类黄酮生物合成的转录因子 | 第18-19页 |
| 1.3 瞬时表达 | 第19-20页 |
| 1.3.1 农杆菌介导法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 植物瞬时表达系统的应用 | 第20页 |
| 1.4 荧光素酶(Luciferase) | 第20-23页 |
| 1.4.1 双荧光素酶报告基因 | 第21页 |
| 1.4.2 双荧光素酶报告基因检测系统 | 第21-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-27页 |
| 2.1 立题依据与研究目的 | 第23-25页 |
| 2.2 技术路线 | 第25-27页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第27-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第27页 |
| 3.1.2.1 菌株 | 第27页 |
| 3.1.2.2 载体 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第28页 |
| 3.1.5 主要溶液配方 | 第28页 |
| 3.1.6 常用培养基剂配方(1000mL) | 第28-29页 |
| 3.1.7 PCR引物 | 第29-30页 |
| 3.2 方法 | 第30-35页 |
| 3.2.1 瞬时表达载体构建 | 第30-31页 |
| 3.2.2 PCR扩增 | 第31-32页 |
| 3.2.3 热击法转化大肠杆菌 | 第32页 |
| 3.2.4 大肠杆菌(农杆菌)质粒的提取 | 第32-33页 |
| 3.2.5 胶回收步骤 | 第33页 |
| 3.2.6 根癌农杆菌菌株GV3101感受态的制备 | 第33页 |
| 3.2.7 电击法将重组质粒导入根癌农杆菌 | 第33-34页 |
| 3.2.8 植物各组织RNA快速提取的方法 | 第34页 |
| 3.2.9 cDNA的合成 | 第34-35页 |
| 3.2.10 基因的RT-PCR分析 | 第35页 |
| 3.3 生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 3.3.1 bHLH蛋白家族的生物信息学分析 | 第35-37页 |
| 3.3.1.1 序列来源 | 第35-36页 |
| 3.3.1.2 棉花bHLH蛋白的确定 | 第36页 |
| 3.3.1.3 棉花bHLH蛋白的进化分析和分类 | 第36-37页 |
| 3.3.2 GhbHLH106和GhbHLH119的生物信息学分析 | 第37页 |
| 3.4 农杆菌注射渗透法转化烟草 | 第37页 |
| 3.5 双荧光定量检测 | 第37-39页 |
| 第四章 结果与分析 | 第39-53页 |
| 4.1 棉花bHLH蛋白家族基因的生物信息学分析 | 第39-43页 |
| 4.1.1 棉花bHLH蛋白基因的鉴定 | 第39-41页 |
| 4.1.2 棉花bHLH蛋白家族的进化分类 | 第41-43页 |
| 4.2 陆地棉中第5组bHLH蛋白编码基因的保守性和表达分析 | 第43-49页 |
| 4.2.1 第5组bHLH蛋白编码基因的保守性分析 | 第43-45页 |
| 4.2.2 第5组bHLH蛋白编码基因的表达分析 | 第45-46页 |
| 4.2.3 GobHLH106与GobHLH119的克隆及生物信息学分析 | 第46-49页 |
| 4.2.3.1 GobHLH106与GobHLH119的克隆 | 第46页 |
| 4.2.3.2 GobHLH106与GobHLH119基因结构的分析 | 第46-47页 |
| 4.2.3.3 GhbHLH106和GhbHLH119的进化分析 | 第47-48页 |
| 4.2.3.4 GhbHLH106和GhbHLH119的表达特性分析 | 第48-49页 |
| 4.3 GhbHLH106和GhbHLH119的cDNA的克隆 | 第49-50页 |
| 4.4 棉花GhbHLH106-A和GhbHLH119-D与花色素合成的关系 | 第50-53页 |
| 4.4.1 瞬时表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 4.4.2 转录因子的活性分析 | 第51-53页 |
| 第五章 讨论 | 第53-55页 |
| 5.1 棉花bHLH蛋白参与调控花色素和原花色素的合成 | 第53-54页 |
| 5.2 棉花bHLH蛋白家族的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| 第六章 结论 | 第55-57页 |
| 6.1 主要结论 | 第55页 |
| 6.2 创新点 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-74页 |
| 附录Ⅰ 中英文缩略表 | 第63页 |
| 附录Ⅱ 棉花bHLH编码基因 | 第63-68页 |
| 附录Ⅲ 棉花bHLH编码基因的分布情况 | 第68-69页 |
| 附录Ⅳ 拟南芥和棉花bHLH蛋白的进化分类 | 第69-74页 |
| 附录Ⅴ 攻读硕士学位期间发表论文及摘要情况 | 第74页 |
