摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 酵母 | 第13页 |
1.2 减数分裂 | 第13-17页 |
1.2.1 减数分裂过程 | 第13-15页 |
1.2.2 酵母细胞减数分裂I前期各阶段特征 | 第15页 |
1.2.3 减数分裂重组 | 第15-16页 |
1.2.4 Crossover | 第16-17页 |
1.3 R-loop | 第17-21页 |
1.3.1 R-loop的结构和功能 | 第17-18页 |
1.3.2 R-loop的形成因素 | 第18页 |
1.3.3 R-loop的调控 | 第18-20页 |
1.3.4 R-loop相关疾病的研究 | 第20页 |
1.3.5 R-loop对重组和基因组不稳定性的影响 | 第20页 |
1.3.6 R-loop对有丝分裂的影响 | 第20-21页 |
1.3.7 R-loop对减数分裂的影响 | 第21页 |
1.4 本文研究目的及内容 | 第21-23页 |
1.4.1 研究目的及意义 | 第21-22页 |
1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
第二章 R-loop突变菌株的构建 | 第23-29页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 菌株 | 第23页 |
2.1.2 质粒 | 第23-24页 |
2.1.3 引物 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-26页 |
2.2.1 PCR扩增抗性片段 | 第25页 |
2.2.2 PCR扩增片段的纯化回收 | 第25-26页 |
2.2.3 酵母高效转化 | 第26页 |
2.2.4 双突变体的构建 | 第26页 |
2.3 实验结果 | 第26-28页 |
2.3.1 单突变体的构建结果 | 第26-27页 |
2.3.2 rnh1△rnh201△及rnh1△rnh201△hpr1△突变菌株的验证 | 第27-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
第三章 R-loop突变菌株减数分裂进程的研究 | 第29-37页 |
3.1 引言 | 第29页 |
3.2 实验材料 | 第29页 |
3.3 实验方法 | 第29-30页 |
3.3.1 酵母菌株的同步化培养 | 第29页 |
3.3.2 同步化培养的效果 | 第29页 |
3.3.3 流式细胞术 | 第29-30页 |
3.3.4 孢子产孢率和存活率的统计分析 | 第30页 |
3.4 实验结果 | 第30-34页 |
3.4.1 多突变菌株孢子存活率明显降低 | 第30-32页 |
3.4.2 三突变菌株减数分裂延迟 | 第32-34页 |
3.4.3 rnh1△rnh201△hpr1△菌株的DNA复制产生延迟 | 第34页 |
3.5 本章小结 | 第34-37页 |
第四章 突变体R-loop的累积及其对DSB修复的影响 | 第37-43页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 实验材料 | 第37页 |
4.3 实验方法 | 第37-38页 |
4.3.1 酵母的染色体铺片 | 第37-38页 |
4.3.2 免疫荧光染色 | 第38页 |
4.3.3 荧光染色结果的观察 | 第38页 |
4.4 实验结果 | 第38-41页 |
4.4.1 R-loop的含量测定 | 第38-39页 |
4.4.2 Rad51免疫荧光染色 | 第39-41页 |
4.5 本章小结 | 第41-43页 |
第五章 总结与展望 | 第43-45页 |
本文取得的阶段性成果 | 第43-44页 |
本文的不足及研究展望 | 第44-45页 |
附录 | 第45-49页 |
附录1 实验室所用主要仪器设备 | 第45页 |
附录2 所用主要试剂 | 第45-48页 |
附录3 主要的培养基及试剂配方 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第57页 |