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R-looP在酿酒酵母减数分裂中的功能研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表第11-13页
第一章 绪论第13-23页
    1.1 酵母第13页
    1.2 减数分裂第13-17页
        1.2.1 减数分裂过程第13-15页
        1.2.2 酵母细胞减数分裂I前期各阶段特征第15页
        1.2.3 减数分裂重组第15-16页
        1.2.4 Crossover第16-17页
    1.3 R-loop第17-21页
        1.3.1 R-loop的结构和功能第17-18页
        1.3.2 R-loop的形成因素第18页
        1.3.3 R-loop的调控第18-20页
        1.3.4 R-loop相关疾病的研究第20页
        1.3.5 R-loop对重组和基因组不稳定性的影响第20页
        1.3.6 R-loop对有丝分裂的影响第20-21页
        1.3.7 R-loop对减数分裂的影响第21页
    1.4 本文研究目的及内容第21-23页
        1.4.1 研究目的及意义第21-22页
        1.4.2 研究内容第22-23页
第二章 R-loop突变菌株的构建第23-29页
    2.1 实验材料第23-25页
        2.1.1 菌株第23页
        2.1.2 质粒第23-24页
        2.1.3 引物第24-25页
    2.2 实验方法第25-26页
        2.2.1 PCR扩增抗性片段第25页
        2.2.2 PCR扩增片段的纯化回收第25-26页
        2.2.3 酵母高效转化第26页
        2.2.4 双突变体的构建第26页
    2.3 实验结果第26-28页
        2.3.1 单突变体的构建结果第26-27页
        2.3.2 rnh1△rnh201△及rnh1△rnh201△hpr1△突变菌株的验证第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
第三章 R-loop突变菌株减数分裂进程的研究第29-37页
    3.1 引言第29页
    3.2 实验材料第29页
    3.3 实验方法第29-30页
        3.3.1 酵母菌株的同步化培养第29页
        3.3.2 同步化培养的效果第29页
        3.3.3 流式细胞术第29-30页
        3.3.4 孢子产孢率和存活率的统计分析第30页
    3.4 实验结果第30-34页
        3.4.1 多突变菌株孢子存活率明显降低第30-32页
        3.4.2 三突变菌株减数分裂延迟第32-34页
        3.4.3 rnh1△rnh201△hpr1△菌株的DNA复制产生延迟第34页
    3.5 本章小结第34-37页
第四章 突变体R-loop的累积及其对DSB修复的影响第37-43页
    4.1 引言第37页
    4.2 实验材料第37页
    4.3 实验方法第37-38页
        4.3.1 酵母的染色体铺片第37-38页
        4.3.2 免疫荧光染色第38页
        4.3.3 荧光染色结果的观察第38页
    4.4 实验结果第38-41页
        4.4.1 R-loop的含量测定第38-39页
        4.4.2 Rad51免疫荧光染色第39-41页
    4.5 本章小结第41-43页
第五章 总结与展望第43-45页
    本文取得的阶段性成果第43-44页
    本文的不足及研究展望第44-45页
附录第45-49页
    附录1 实验室所用主要仪器设备第45页
    附录2 所用主要试剂第45-48页
    附录3 主要的培养基及试剂配方第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-57页
学位论文评阅及答辩情况表第57页

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