| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩写词与中英文对照 | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 柑橘衰退病毒的生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.1.1 分类学地位 | 第13页 |
| 1.1.2 株系分化及症状 | 第13页 |
| 1.1.3 寄主范围 | 第13-14页 |
| 1.2 CTV的分子生物学特性 | 第14页 |
| 1.3 主要媒介昆虫及传毒影响因素 | 第14-15页 |
| 1.3.1 主要媒介 | 第14-15页 |
| 1.3.2 影响传毒因素 | 第15页 |
| 1.4 CTV的检测方法 | 第15-16页 |
| 1.4.1 清学检测 | 第15-16页 |
| 1.4.2 实时荧光定量检测 | 第16页 |
| 1.5 半持久方式传播病毒的介体传播机制研究进展 | 第16-21页 |
| 1.5.1 植物介体昆虫及传播方式 | 第16页 |
| 1.5.2 半持久方式传播病毒的特征 | 第16-17页 |
| 1.5.3 半持久方式传播病毒的研究方法 | 第17-19页 |
| 1.5.4 半持久方式传播病毒的传播机制 | 第19-21页 |
| 1.5.5 讨论与展望 | 第21页 |
| 1.6 柑橘蚜虫的防治 | 第21-23页 |
| 1.6.1 植物检疫 | 第22页 |
| 1.6.2 农业防治 | 第22页 |
| 1.6.3 生物防治 | 第22页 |
| 1.6.4 物理防治 | 第22页 |
| 1.6.5 化学防治 | 第22-23页 |
| 第2章 引言 | 第23-25页 |
| 第3章 基因p20和p23的原核表达 | 第25-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 3.1.1 供试毒源 | 第25页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第25页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.5 常用储备液及缓冲液 | 第26-28页 |
| 3.2 试验方法 | 第28-33页 |
| 3.2.1 柑橘叶片总RNA的抽提 | 第28页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第28-29页 |
| 3.2.3 RT-PCR扩增与克隆 | 第29-31页 |
| 3.2.4 原核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.5 蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| 3.2.6 SDS-PAGE | 第32-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-35页 |
| 3.3.1 基因p20和p23的克隆及序列分析 | 第33页 |
| 3.3.2 基因p20和p23原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.3.3 p20和p23在大肠杆菌中的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 第4章 CTV不同蚜虫传毒率分离株p25蛋白及病毒粒子含量 | 第37-45页 |
| 4.1 材料和方法 | 第37-39页 |
| 4.1.1 供试毒源 | 第37页 |
| 4.1.2 抗体 | 第37页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第37页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第37-38页 |
| 4.1.5 常用储备液及缓冲液 | 第38-39页 |
| 4.1.6 引物 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 p25多克隆抗体效价的测定 | 第39页 |
| 4.2.2 ELISA法测定不同毒源p25的含量 | 第39-40页 |
| 4.2.3 柑橘嫩叶核酸提取 | 第40页 |
| 4.2.4 实时荧光定量RT-PCR | 第40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 4.3.1 p25多克隆抗体效价的测定 | 第40-41页 |
| 4.3.2 不同CTV分离株蛋白p25的含量 | 第41-42页 |
| 4.3.3 应用相对定量分析不同CTV分离株病毒粒子的数量 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-44页 |
| 4.5 小结 | 第44-45页 |
| 第5章 重组蛋白对蚜虫获毒量的影响 | 第45-53页 |
| 5.1 材料和方法 | 第45-46页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第45页 |
| 5.1.2 供试毒源 | 第45页 |
| 5.1.3 受体植株 | 第45页 |
| 5.1.4 主要试剂 | 第45页 |
| 5.1.5 主要仪器 | 第45-46页 |
| 5.1.6 常用储备液及缓冲液 | 第46页 |
| 5.2 试验方法 | 第46-48页 |
| 5.2.1 褐色橘蚜的饲喂方法 | 第46-47页 |
| 5.2.2 褐色橘蚜传毒试验 | 第47页 |
| 5.2.3 褐色橘蚜总RNA的提取 | 第47-48页 |
| 5.2.4 褐色橘蚜的绝对定量 | 第48页 |
| 5.2.5 DTBIA检测CTV | 第48页 |
| 5.3 结果与分析 | 第48-50页 |
| 5.3.1 蚜虫取食不同蛋白后获毒量的变化 | 第48-49页 |
| 5.3.2 蚜虫取食不同蛋白后的传毒率 | 第49-50页 |
| 5.4 讨论 | 第50-51页 |
| 5.5 小结 | 第51-53页 |
| 第6章 结论及展望 | 第53-55页 |
| 6.1 结论 | 第53页 |
| 6.2 展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间发表论文及参加科研项目 | 第63页 |