中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-25页 |
1.1 扩展蛋白的发现 | 第14页 |
1.2 扩展蛋白的分类及生理结构 | 第14-17页 |
1.2.1 扩展蛋白的分类 | 第14-15页 |
1.2.2 扩展蛋白的结构 | 第15-17页 |
1.3 扩展蛋白的作用机理 | 第17页 |
1.4 扩展蛋白对植物生长发育的作用 | 第17-20页 |
1.4.1 扩展蛋白与种子萌发 | 第17-18页 |
1.4.2 扩展蛋白与叶片的发育 | 第18页 |
1.4.3 扩展蛋白与茎、节的伸长 | 第18页 |
1.4.4 扩展蛋白与根的生长 | 第18-19页 |
1.4.5 扩展蛋白与花的发育 | 第19页 |
1.4.6 扩展蛋白与果实的成熟 | 第19-20页 |
1.5 扩展蛋白与植物抗逆性 | 第20-22页 |
1.5.1 扩展蛋白与干旱胁迫耐性 | 第20页 |
1.5.2 扩展蛋白与高温胁迫耐性 | 第20-21页 |
1.5.3 扩展蛋白与盐胁迫耐性 | 第21-22页 |
1.5.4 扩展蛋白与生物胁迫耐性 | 第22页 |
1.6 扩展蛋白的基因表达调控 | 第22-23页 |
1.6.1 扩展蛋白的时空特异性表达 | 第22-23页 |
1.6.2 植物激素与扩展蛋白基因的表达 | 第23页 |
1.7 本研究的目的意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-35页 |
2.1 实验材料与处理 | 第25-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 小麦的培养和处理 | 第25页 |
2.1.3 烟草的培养和处理 | 第25页 |
2.1.4 拟南芥的培养和处理 | 第25-26页 |
2.1.5 酶及各种生化试剂 | 第26页 |
2.1.6 引物 | 第26-27页 |
2.2 分子生物学实验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 转基因烟草和突变体拟南芥的鉴定 | 第27-29页 |
2.2.1.1 CTAB法微量法提取基因组DNA | 第27-28页 |
2.2.1.2 转基因烟草和突变体拟南芥的PCR检测 | 第28-29页 |
2.2.2 转基因烟草基因表达水平的检测 | 第29-31页 |
2.2.2.1 利用TRIZOL试剂盒提取RNA | 第29-30页 |
2.2.2.2 反转录cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
2.2.2.3 转基因烟草的荧光定量PCR检测 | 第31页 |
2.3 植物生理实验方法 | 第31-34页 |
2.3.1 烟草种子萌发率的统计 | 第31页 |
2.3.2 叶片叶绿素含量的测定 | 第31页 |
2.3.3 光合参数的测定 | 第31-32页 |
2.3.4 丙二醛(MDA)和相对电导的测定 | 第32页 |
2.3.5 镉离子在根中的动态运输 | 第32页 |
2.3.6 镉离子含量的测定 | 第32页 |
2.3.7 质膜和液泡膜的提取及纯化 | 第32-33页 |
2.3.8 液泡膜和质膜蛋白质含量的测定(Bradford法) | 第33页 |
2.3.9 质膜和液泡膜上ATP酶活性的测定 | 第33页 |
2.3.10 DAB和NBT染色检测活性氧积累 | 第33页 |
2.3.11 过氧化氢含量及超氧阴离子自由基的的测定 | 第33页 |
2.3.12 抗氧化酶活性测定 | 第33页 |
2.3.13 叶片相对含水量及渗透势的测定 | 第33页 |
2.3.14 游离脯氨酸及可溶性糖含量的测定 | 第33-34页 |
2.4 实验数据统计分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-47页 |
3.1 小麦TaEXPA2基因表达对Cd胁迫的响应及转基因烟草鉴定 | 第35-36页 |
3.2 过表达TaEXPA2提高了转基因烟草幼苗对Cd的耐性 | 第36-37页 |
3.3 镉毒害对转基因烟草生长及光合特性的影响 | 第37-38页 |
3.4 镉毒害对WT和转基因烟草的伤害 | 第38-40页 |
3.5 镉毒害对叶片相对含水量(RWC)、渗透势、脯氨酸和可溶性糖含量的影响 | 第40页 |
3.6 转基因烟草幼苗中Cd~(2+)离子流对镉毒害的响应 | 第40-42页 |
3.7 转基因烟草中镉的积累和转运对镉毒害的响应 | 第42-43页 |
3.8 镉毒害下转基因烟草活性氧的积累和抗氧化能力分析 | 第43-44页 |
3.9 过量表达TaEXPA2烟草中胁迫相关基因表达对镉毒害的响应 | 第44-45页 |
3.10 拟南芥同源基因突变体atexpa2对镉毒害的耐性 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
4.1 过表达小麦TaEXPA2基因增强转基因烟草对镉的耐性 | 第47页 |
4.2 镉转运能力提高和调节基因表达可能是转基因植株镉耐性增强的原因之一 | 第47页 |
4.3 抗氧化能力的提高可能是转基因株系镉胁迫耐性增强的另一重要因素 | 第47-48页 |
4.4 提高保水能力有助于提高转基因植株对镉毒害的耐受性 | 第48-49页 |
4.5 拟南芥同源基因AtEXPA2与小麦TaEXPA2具有相似的Cd胁迫耐性功能 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第60页 |