| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 材料和方法 | 第21-33页 |
| 1. 实验材料 | 第21-23页 |
| 1.1 细胞株及质粒 | 第21页 |
| 1.2 细胞培养及冻存试剂 | 第21页 |
| 1.3 质粒构建及提取试剂 | 第21页 |
| 1.4 RNA提取及qRT-PCR试剂 | 第21-22页 |
| 1.5 蛋白质提取试剂 | 第22页 |
| 1.6 细胞转染试剂 | 第22页 |
| 1.7 抗体 | 第22页 |
| 1.8 Western blot实验试剂 | 第22页 |
| 1.9 免疫荧光和免疫组化实验试剂 | 第22-23页 |
| 1.10 其他试剂 | 第23页 |
| 2. 主要实验仪器 | 第23-24页 |
| 3. 实验方法 | 第24-33页 |
| 3.1 主要溶液和试剂的配制 | 第24-26页 |
| 3.2 细胞转染 | 第26页 |
| 3.3 细胞RNA提取 | 第26-27页 |
| 3.4 逆转录和实时定量PCR (qRT-PCR) | 第27页 |
| 3.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 3.6 免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
| 3.7 总蛋白提取 | 第28页 |
| 3.8 BCA法测试蛋白浓度 | 第28页 |
| 3.9 Western blot | 第28-29页 |
| 3.10 逆转录病毒制备和感染 | 第29页 |
| 3.11 慢病毒制备和感染 | 第29页 |
| 3.12 注意事项 | 第29-30页 |
| 3.13 质粒构建及纯化 | 第30-31页 |
| 3.14 细胞迁移实验 | 第31页 |
| 3.15 细胞划痕实验 | 第31页 |
| 3.16 细胞侵袭实验 | 第31页 |
| 3.17 MTT实验 | 第31-32页 |
| 3.18 免疫荧光实验 | 第32页 |
| 3.19 统计学分析 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-37页 |
| 1. FAM83D在NSCLC细胞和组织中表达明显升高 | 第33页 |
| 1.1 FAM83D在NSCLC细胞中高表达 | 第33页 |
| 1.2 FAM83D在NSCLC组织中高表达 | 第33页 |
| 2. FAM83D促进NSCLC细胞的肿瘤特性 | 第33-35页 |
| 2.1 构建稳定沉默和过表达FAM83D细胞系 | 第33-34页 |
| 2.2 FAM83D促进NSCLC细胞增殖 | 第34页 |
| 2.3 FAM83D促进NSCLC细胞EMT的发生 | 第34-35页 |
| 2.4 FAM83D促进NSCLC细胞侵袭和迁移的作用 | 第35页 |
| 3. FAM83D调控AKT/mTOR信号通路促进NSCLC转移 | 第35-37页 |
| 3.1 FAM83D激活AKT/mTOR信号通路 | 第35-36页 |
| 3.2 FAM83D通过调控AKT/mTOR通路促进NSCLC细胞EMT及侵袭迁移 | 第36-37页 |
| 讨论 | 第37-40页 |
| 展望 | 第40-42页 |
| 附图 | 第42-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第54-55页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第55页 |
