摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 轮虫综述 | 第11-18页 |
1.1.1 轮虫的进化分类 | 第11页 |
1.1.2 轮虫生活史及生殖类型 | 第11-13页 |
1.1.3 轮虫形态学特征,卵及个体类型 | 第13-17页 |
1.1.4 轮虫的食性及培养 | 第17-18页 |
1.2 褶皱臂尾轮虫概述 | 第18-19页 |
1.3 轮虫基因克隆研究进展 | 第19页 |
1.4 转基因技术综述 | 第19-21页 |
1.4.1 转基因研究简介 | 第19-20页 |
1.4.2 无脊椎动物的转基因研究进展 | 第20页 |
1.4.3 脊椎动物鱼类的转基因现状 | 第20-21页 |
1.5 转基因动物生物反应器综述 | 第21-23页 |
1.5.1 动物生物反应器研究进展 | 第21-22页 |
1.5.2 轮虫作为新型的动物反应器 | 第22-23页 |
1.6 技术路线及研究意义 | 第23-25页 |
1.6.1 技术路线 | 第23-24页 |
1.6.2 研究意义 | 第24-25页 |
第二章 褶皱臂尾轮虫β-actin基因克隆与表达分析 | 第25-49页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 实验材料 | 第25-28页 |
2.2.1 实验动物及取材 | 第25-26页 |
2.2.2 实验试剂及配方 | 第26-27页 |
2.2.3 实验引物 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-36页 |
2.3.1 轮虫及小球藻的室内培养 | 第28-29页 |
2.3.2 样本收集及预处理 | 第29-30页 |
2.3.3 轮虫总RNA的制备 | 第30-31页 |
2.3.4 轮虫RNA的提纯及模板制备 | 第31-33页 |
2.3.5 简并PCR扩增β-actin核心序列 | 第33-35页 |
2.3.6 RACE-PCR扩增获得β-actin基因的cDNA全长序列 | 第35-36页 |
2.3.7 β-actin基因cDNA编码区无内含子的验证 | 第36页 |
2.4 β-actin基因序列及蛋白分析 | 第36-37页 |
2.4.1 褶皱臂尾轮虫β-actin基因序列分析 | 第36-37页 |
2.4.2 褶皱臂尾轮虫β-ACTIN蛋白分析 | 第37页 |
2.5 褶皱臂尾轮虫β-ACTIN蛋白系统进化分析 | 第37页 |
2.6 实验结果 | 第37-48页 |
2.6.1 轮虫总RNA的提取 | 第37-38页 |
2.6.2 轮虫β-actin核心及RACE扩增结果 | 第38-39页 |
2.6.3 内含子的验证分析 | 第39-40页 |
2.6.4 轮虫β-actin基因序列分析 | 第40-43页 |
2.6.5 β-ACTIN蛋白分析 | 第43-47页 |
2.6.6 轮虫β-ACTIN蛋白进化分析 | 第47-48页 |
2.7 讨论 | 第48-49页 |
第三章 褶皱臂尾轮虫β-actin启动子的克隆与分析 | 第49-58页 |
3.1 实验材料与方法 | 第49-53页 |
3.1.1 实验动物 | 第49页 |
3.1.2 实验试剂及配方 | 第49页 |
3.1.3 实验引物 | 第49页 |
3.1.4 样本的收集及预处理 | 第49-50页 |
3.1.5 轮虫基因组DNA的提取 | 第50-51页 |
3.1.6 染色体步移获取β-actin启动子序列 | 第51-53页 |
3.2 结果 | 第53-54页 |
3.2.1 轮虫DNA提取结果 | 第53页 |
3.2.2 基因组步移结果 | 第53-54页 |
3.3 褶皱臂尾轮虫β-actin启动子分析 | 第54-56页 |
3.4 讨论 | 第56-58页 |
第四章 展望与讨论 | 第58-63页 |
4.1 实验进展 | 第58-59页 |
4.1.1 构建载体 | 第58-59页 |
4.1.2 转基因途径摸索 | 第59页 |
4.2 讨论 | 第59-63页 |
4.2.1 转基因轮虫的可行性及安全性 | 第59-61页 |
4.2.2 新型生物反应器——轮虫 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简历 | 第70页 |