前言 | 第12-14页 |
第一章 综述 | 第14-49页 |
综述一 心肌缺血再灌注损伤的研究现状 | 第14-27页 |
一. 心肌再灌注损伤的影响因素 | 第15页 |
二. 心肌缺血再灌注损伤的表现 | 第15-19页 |
1 再灌注性心律失常 | 第15-16页 |
2 再灌注性心肌顿抑 | 第16-18页 |
3 再灌注性心肌损伤 | 第18-19页 |
三. 心肌缺血再灌注损伤机制 | 第19-27页 |
1 钙超载与心肌缺血再灌注损伤 | 第20-21页 |
2 氧自由基与心肌缺血再灌注损伤 | 第21-24页 |
3 白细胞粘聚与心肌缺血再灌注损伤 | 第24-25页 |
4 内皮细胞自稳态调控失衡与心肌缺血再灌注损伤 | 第25-26页 |
5 细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤 | 第26页 |
6 结语 | 第26-27页 |
综述二 细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤 | 第27-49页 |
一. 概述 | 第28-29页 |
二. 细胞凋亡的信号转导通路 | 第29-34页 |
三. 细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的作用 | 第34-36页 |
四. 缺血再灌注损伤引发心肌细胞凋亡的基因调控 | 第36-41页 |
五. 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶(Caspases)与细胞凋亡 | 第41-43页 |
六. 核转录因子NF-κB与心肌缺血再灌注损伤 | 第43-49页 |
第二章 人参皂苷Re对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 | 第49-112页 |
实验一 人参皂苷Re对体外培养心肌细胞缺氧-再给氧损伤的保护作用及其机制研究 | 第49-64页 |
1 实验材料 | 第49-51页 |
1.1 实验动物 | 第49页 |
1.2 主要试剂及来源 | 第49-50页 |
1.3 实验试剂配制 | 第50-51页 |
1.4 主要仪器 | 第51页 |
2 实验方法 | 第51-54页 |
2.1 体外培养心肌细胞缺氧-再给氧损伤模型制备 | 第51-52页 |
2.2 实验分组 | 第52页 |
2.3 观察指标 | 第52-54页 |
2.3.1 形态学观察 | 第52页 |
2.3.2 心肌细胞活力的测定 | 第52-53页 |
2.3.3 测定心肌细胞培养液中LDH含量 | 第53页 |
2.3.4 体外培养心肌细胞Na~+-K~+-ATP酶、Ca_(2+)-ATP酶的测定 | 第53页 |
2.3.5 流式细胞术检测心肌细胞周期 | 第53-54页 |
2.3.6 心肌细胞的吖啶橙染色 | 第54页 |
2.4 统计方法 | 第54页 |
3 结果 | 第54-59页 |
3.1 形态学观察 | 第54-55页 |
3.2 人参皂苷Re对体外培养心肌细胞活力的影响 | 第55-56页 |
3.3 Re对缺氧-再给氧损伤心肌细胞培养液中LDH含量的影响 | 第56-57页 |
3.4 人参皂苷Re对心肌细胞Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶的影响 | 第57页 |
3.5 心肌细胞周期的测定 | 第57-58页 |
3.6 心肌细胞吖啶橙染色结果 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
实验二 人参皂苷Re对在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用 | 第64-77页 |
1 实验材料 | 第64页 |
1.1 实验动物 | 第64页 |
1.2 主要试剂 | 第64页 |
1.3 主要仪器 | 第64页 |
2 实验方法 | 第64-67页 |
2.1 大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型制备 | 第64-65页 |
2.2 实验动物分组 | 第65页 |
2.3 观察指标 | 第65-67页 |
2.3.1 血流动力学的检测 | 第65页 |
2.3.2 血液流变学的检测 | 第65-66页 |
2.3.3 心肌标志酶的测定 | 第66页 |
2.3.4 心肌形态学观察 | 第66页 |
2.3.5 心肌缺血范围 | 第66-67页 |
2.4 统计方法 | 第67页 |
3 结果 | 第67-72页 |
3.1 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤大鼠血流动力学的影响 | 第67-68页 |
3.2 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤大鼠血液流变学的影响 | 第68页 |
3.3 人参皂苷Re对大鼠缺血再灌注损伤心肌标志酶的影响 | 第68-69页 |
3.4 心肌组织病理学观察 | 第69-70页 |
3.5 心肌组织超微结构的观察 | 第70-71页 |
3.6 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌缺血范围的影响 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-77页 |
实验三 人参皂苷Re对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用的细胞分子机制研究 | 第77-112页 |
1 实验材料 | 第77-81页 |
1.1 实验动物 | 第77页 |
1.2 主要试剂 | 第77-78页 |
1.3 实验试剂配制 | 第78-81页 |
1.4 主要仪器 | 第81页 |
2 实验方法 | 第81-95页 |
2.1 大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型制备 | 第81页 |
2.2 实验动物分组 | 第81页 |
2.3 观察指标 | 第81-95页 |
2.3.1 氧化应激指标的检测 | 第81-82页 |
2.3.2 心肌细胞内游离钙的测定 | 第82-84页 |
2.3.3 白细胞粘聚与心肌缺血再灌注损伤 | 第84页 |
(1) IL-8的测定 | 第84页 |
(2) 中性粒细胞髓过氧化物酶的测定 | 第84页 |
2.3.4 再灌注损伤心肌中细胞凋亡通路相关蛋白的表达 | 第84-89页 |
(1) 免疫组化方法检测心肌NFκB-P65蛋白表达 | 第84-85页 |
(2) Western Blot方法半定量检测Caspases3蛋白表达 | 第85-89页 |
2.3.5 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的基因调控分析 | 第89-92页 |
(1) 原位杂交检测心肌组织NFκB-P65 mRNA表达 | 第89-90页 |
(2) RT-PCR检测心肌组织Caspase3 mRNA的表达 | 第90-92页 |
2.3.6 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的DNA检测 | 第92-95页 |
(1) DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第92-93页 |
(2) 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第93-94页 |
(3) TUNEL染色检测心肌细胞凋亡 | 第94-95页 |
2.4 统计方法 | 第95页 |
3 结果 | 第95-104页 |
3.1 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤中氧化应激的影响 | 第95-96页 |
3.2 心肌细胞内游离钙的测定 | 第96-97页 |
3.3 人参皂苷Re对心肌组织IL-8含量的影响 | 第97页 |
3.4 人参皂苷Re对心肌组织MPO活性的影响 | 第97-98页 |
3.5 细胞凋亡通路的相关蛋白表达 | 第98-99页 |
(1) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌组织NFκB-P65蛋白表达的影响 | 第98-99页 |
(2) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌组织Caspase3蛋白表达的影响 | 第99页 |
3.6 细胞凋亡的基因调控分析 | 第99-101页 |
(1) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌NFκB-P65 mRNA表达的影响 | 第99-100页 |
(2) Re对再灌注损伤心肌Caspase3 mRNA表达影响的半定量分析 | 第100-101页 |
3.7 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的DNA检测 | 第101-104页 |
(1) DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第101-102页 |
(2) 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第102-103页 |
(3) TUNEL染色检测心肌细胞凋亡 | 第103-104页 |
4 讨论 | 第104-112页 |
结论 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-127页 |
攻博期间发表的文章 | 第127-128页 |
致谢 | 第128-129页 |
论文摘要(中文) | 第129-133页 |
论文摘要(英文) | 第133页 |