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人参皂苷Re对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

前言第12-14页
第一章 综述第14-49页
    综述一 心肌缺血再灌注损伤的研究现状第14-27页
        一. 心肌再灌注损伤的影响因素第15页
        二. 心肌缺血再灌注损伤的表现第15-19页
            1 再灌注性心律失常第15-16页
            2 再灌注性心肌顿抑第16-18页
            3 再灌注性心肌损伤第18-19页
        三. 心肌缺血再灌注损伤机制第19-27页
            1 钙超载与心肌缺血再灌注损伤第20-21页
            2 氧自由基与心肌缺血再灌注损伤第21-24页
            3 白细胞粘聚与心肌缺血再灌注损伤第24-25页
            4 内皮细胞自稳态调控失衡与心肌缺血再灌注损伤第25-26页
            5 细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤第26页
            6 结语第26-27页
    综述二 细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤第27-49页
        一. 概述第28-29页
        二. 细胞凋亡的信号转导通路第29-34页
        三. 细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的作用第34-36页
        四. 缺血再灌注损伤引发心肌细胞凋亡的基因调控第36-41页
        五. 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶(Caspases)与细胞凋亡第41-43页
        六. 核转录因子NF-κB与心肌缺血再灌注损伤第43-49页
第二章 人参皂苷Re对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究第49-112页
    实验一 人参皂苷Re对体外培养心肌细胞缺氧-再给氧损伤的保护作用及其机制研究第49-64页
        1 实验材料第49-51页
            1.1 实验动物第49页
            1.2 主要试剂及来源第49-50页
            1.3 实验试剂配制第50-51页
            1.4 主要仪器第51页
        2 实验方法第51-54页
            2.1 体外培养心肌细胞缺氧-再给氧损伤模型制备第51-52页
            2.2 实验分组第52页
            2.3 观察指标第52-54页
                2.3.1 形态学观察第52页
                2.3.2 心肌细胞活力的测定第52-53页
                2.3.3 测定心肌细胞培养液中LDH含量第53页
                2.3.4 体外培养心肌细胞Na~+-K~+-ATP酶、Ca_(2+)-ATP酶的测定第53页
                2.3.5 流式细胞术检测心肌细胞周期第53-54页
                2.3.6 心肌细胞的吖啶橙染色第54页
            2.4 统计方法第54页
        3 结果第54-59页
            3.1 形态学观察第54-55页
            3.2 人参皂苷Re对体外培养心肌细胞活力的影响第55-56页
            3.3 Re对缺氧-再给氧损伤心肌细胞培养液中LDH含量的影响第56-57页
            3.4 人参皂苷Re对心肌细胞Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶的影响第57页
            3.5 心肌细胞周期的测定第57-58页
            3.6 心肌细胞吖啶橙染色结果第58-59页
        4 讨论第59-64页
    实验二 人参皂苷Re对在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用第64-77页
        1 实验材料第64页
            1.1 实验动物第64页
            1.2 主要试剂第64页
            1.3 主要仪器第64页
        2 实验方法第64-67页
            2.1 大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型制备第64-65页
            2.2 实验动物分组第65页
            2.3 观察指标第65-67页
                2.3.1 血流动力学的检测第65页
                2.3.2 血液流变学的检测第65-66页
                2.3.3 心肌标志酶的测定第66页
                2.3.4 心肌形态学观察第66页
                2.3.5 心肌缺血范围第66-67页
            2.4 统计方法第67页
        3 结果第67-72页
            3.1 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤大鼠血流动力学的影响第67-68页
            3.2 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤大鼠血液流变学的影响第68页
            3.3 人参皂苷Re对大鼠缺血再灌注损伤心肌标志酶的影响第68-69页
            3.4 心肌组织病理学观察第69-70页
            3.5 心肌组织超微结构的观察第70-71页
            3.6 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌缺血范围的影响第71-72页
        4 讨论第72-77页
    实验三 人参皂苷Re对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用的细胞分子机制研究第77-112页
        1 实验材料第77-81页
            1.1 实验动物第77页
            1.2 主要试剂第77-78页
            1.3 实验试剂配制第78-81页
            1.4 主要仪器第81页
        2 实验方法第81-95页
            2.1 大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型制备第81页
            2.2 实验动物分组第81页
            2.3 观察指标第81-95页
                2.3.1 氧化应激指标的检测第81-82页
                2.3.2 心肌细胞内游离钙的测定第82-84页
                2.3.3 白细胞粘聚与心肌缺血再灌注损伤第84页
                    (1) IL-8的测定第84页
                    (2) 中性粒细胞髓过氧化物酶的测定第84页
                2.3.4 再灌注损伤心肌中细胞凋亡通路相关蛋白的表达第84-89页
                    (1) 免疫组化方法检测心肌NFκB-P65蛋白表达第84-85页
                    (2) Western Blot方法半定量检测Caspases3蛋白表达第85-89页
                2.3.5 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的基因调控分析第89-92页
                    (1) 原位杂交检测心肌组织NFκB-P65 mRNA表达第89-90页
                    (2) RT-PCR检测心肌组织Caspase3 mRNA的表达第90-92页
                2.3.6 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的DNA检测第92-95页
                    (1) DNA琼脂糖凝胶电泳第92-93页
                    (2) 流式细胞术检测细胞凋亡第93-94页
                    (3) TUNEL染色检测心肌细胞凋亡第94-95页
            2.4 统计方法第95页
        3 结果第95-104页
            3.1 人参皂苷Re对心肌再灌注损伤中氧化应激的影响第95-96页
            3.2 心肌细胞内游离钙的测定第96-97页
            3.3 人参皂苷Re对心肌组织IL-8含量的影响第97页
            3.4 人参皂苷Re对心肌组织MPO活性的影响第97-98页
            3.5 细胞凋亡通路的相关蛋白表达第98-99页
                (1) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌组织NFκB-P65蛋白表达的影响第98-99页
                (2) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌组织Caspase3蛋白表达的影响第99页
            3.6 细胞凋亡的基因调控分析第99-101页
                (1) 人参皂苷Re对再灌注损伤心肌NFκB-P65 mRNA表达的影响第99-100页
                (2) Re对再灌注损伤心肌Caspase3 mRNA表达影响的半定量分析第100-101页
            3.7 再灌注损伤心肌中细胞凋亡的DNA检测第101-104页
                (1) DNA琼脂糖凝胶电泳第101-102页
                (2) 流式细胞术检测细胞凋亡第102-103页
                (3) TUNEL染色检测心肌细胞凋亡第103-104页
        4 讨论第104-112页
结论第112-114页
参考文献第114-127页
攻博期间发表的文章第127-128页
致谢第128-129页
论文摘要(中文)第129-133页
论文摘要(英文)第133页

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