| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 蛋白质相互作用网络的概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 蛋白质相互作用网络的意义 | 第10页 |
| 1.1.2 蛋白质相互作用研究方法 | 第10-11页 |
| 1.1.3 蛋白质相互作用网络的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.4 蛋白质互作的评估 | 第12页 |
| 1.2 微生物蛋白质相互作用网络的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 生物信息学概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 微生物蛋白质相互作用网络的构建 | 第14-16页 |
| 1.2.3 病原微生物研究存在的问题 | 第16-17页 |
| 1.3 研究蛋白与蛋白互作的实验方法-细菌双杂交 | 第17-19页 |
| 1.3.1 细菌双杂交技术原理 | 第17-18页 |
| 1.3.2 细菌双杂交技术在蛋白相互作用中的应用 | 第18页 |
| 1.3.3 细菌双杂交的缺点 | 第18-19页 |
| 1.4 猪胸膜肺炎放线杆菌概述 | 第19-21页 |
| 1.4.1 猪传染性胸膜肺炎的危害及病原学 | 第19-20页 |
| 1.4.2 猪胸膜肺炎放线杆菌蛋白互作组研究的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料方法 | 第21-34页 |
| 2.1 材料 | 第21-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 质粒构建培养基、抗生素配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 细菌双杂交筛选所需培养基、缓冲液配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 pull down所需缓冲液配制 | 第24-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 诱饵质粒HNS-pBT及靶蛋白质粒的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.2 诱饵蛋白质粒与靶蛋白质粒的共转化及选择性培养 | 第29-30页 |
| 2.2.3 PCR初步鉴定共转结果 | 第30页 |
| 2.2.4 GST-pull down | 第30-33页 |
| 2.2.5 APP的蛋白互作网络构建 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-57页 |
| 3.1 APP的蛋白互作网络 | 第34-47页 |
| 3.1.1 胸膜肺炎放线杆菌蛋白互作网络的中互作度前30位蛋白 | 第35-36页 |
| 3.1.2 蛋白质互作网络COG类别分析 | 第36-37页 |
| 3.1.3 假设蛋白统计 | 第37-40页 |
| 3.1.4 信号转导 | 第40-42页 |
| 3.1.5 转录 | 第42-44页 |
| 3.1.6 DNA复制重组修复 | 第44-47页 |
| 3.2 细菌双杂交筛选蛋白互作结果分析 | 第47-49页 |
| 3.2.1 HNS基因的扩增及诱饵蛋白片段的扩增 | 第47页 |
| 3.2.2 13个基因PCR扩增及及重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.3 HNS蛋白与靶蛋白的互作结果 | 第48-49页 |
| 3.3 pull down实验结果分析 | 第49-57页 |
| 3.3.1 HNS片段及其他靶蛋白片段的扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.2 GST-pull down实验中重组质粒的构建 | 第50-51页 |
| 3.3.3 GST-pull down验证蛋白互作 | 第51-53页 |
| 3.3.4 HNS蛋白子网络分析 | 第53-57页 |
| 4 讨论与结论 | 第57-60页 |
| 4.1 讨论 | 第57-58页 |
| 4.2 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
