摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
文章中的缩略词 | 第8-11页 |
一、前言 | 第11-19页 |
1.1 细胞凋亡 | 第11-13页 |
1.1.1 细胞凋亡概念的提出 | 第11页 |
1.1.2 细胞凋亡的意义 | 第11-12页 |
1.1.3 凋亡通路的保守性及研究进展 | 第12-13页 |
1.2 IAP | 第13-18页 |
1.2.1 杆状病毒与宿主细胞凋亡 | 第13-14页 |
1.2.2 杆状病毒IAP抗凋亡作用研究进展 | 第14-16页 |
1.2.3 不同生物类群的IAPs | 第16-18页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
二、材料与方法 | 第19-27页 |
2.1 材料 | 第19-23页 |
2.1.1 工具酶,化学试剂和试剂盒 | 第19页 |
2.1.2 实验中常用的储存液 | 第19页 |
2.1.3 实验中常用的缓冲液 | 第19-20页 |
2.1.4 培养基 | 第20页 |
2.1.5 实验仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.6 昆虫细胞系 | 第21页 |
2.1.7 大肠杆菌菌株 | 第21页 |
2.1.8 质粒 | 第21页 |
2.1.9 病毒 | 第21-22页 |
2.1.10 用于iap截短突变的引物(表一) | 第22-23页 |
2.2 方法和步骤 | 第23-27页 |
2.2.1 表达载体的构建 | 第23-24页 |
2.2.2 质粒DNA转染 | 第24-25页 |
2.2.3 AcMNPV~(ΔP35)的空斑测定 | 第25页 |
2.2.4 AcMNPV~(ΔP35)对培养细胞的感染 | 第25-26页 |
2.2.5 细胞DNA的提取与电泳分析 | 第26页 |
2.2.6 PI单染法检测细胞凋亡 | 第26页 |
2.2.7 Trypan blue染色计数死细胞 | 第26-27页 |
三、实验结果与分析 | 第27-43页 |
3.1 PlxyGV IAP与其它杆状病毒IAP序列比对分析 | 第27-28页 |
3.2 PlxyGV IAP在Sf9细胞中的瞬时表达 | 第28-29页 |
3.3 PlxyGV IAP抑制由病毒感染诱导的细胞凋亡 | 第29-30页 |
3.4 PlxyGV iap截短突变体的瞬时表达质粒的构建 | 第30-33页 |
3.5 N-末端截短对IAP抗凋亡功能的影响 | 第33-35页 |
3.6 C-端截短对IAP抗凋亡功能的影响 | 第35-39页 |
3.7 内部截短对IAP抗凋亡功能的影响 | 第39-43页 |
四、讨论 | 第43-49页 |
4.1 根据实验结果推测PlxyGV IAP抑制细胞凋亡的通路 | 第43-44页 |
4.2 PlxyGV IAP蛋白抑制细胞凋亡作用的功能域分析 | 第44-47页 |
4.3 PlxyGV IAP的BIR、RING两个结构域在抑制细胞凋亡作用中的关系 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54页 |