| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 石油污染 | 第11-16页 |
| 1.1.1 石油污染的危害 | 第11-15页 |
| 1.1.2 大连新港石油泄漏污染的影响 | 第15-16页 |
| 1.2 底泥污染评价方法 | 第16-22页 |
| 1.2.1 化学物质含量分析 | 第16-17页 |
| 1.2.2 微生物群落多样性 | 第17-21页 |
| 1.2.3 物种多样性的评价 | 第21-22页 |
| 1.3 T-RFLP技术 | 第22-24页 |
| 1.3.1 T-RFLP技术原理 | 第22页 |
| 1.3.2 T-RFLP分析技术的优点和缺点 | 第22-23页 |
| 1.3.3 T-RFLP技术在底泥及土壤样品微生物群落研究中的应用 | 第23-24页 |
| 1.4 双荧光T-RFLP技术 | 第24页 |
| 1.5 本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 底泥样品 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂材料 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 常用试剂及配制方法 | 第27页 |
| 2.2.2 提取底泥样品的宏基因组 | 第27-28页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳及核酸浓度测定 | 第28-30页 |
| 2.2.4 非荧光引物PCR | 第30-31页 |
| 2.2.5 荧光引物PCR | 第31页 |
| 2.2.6 限制性内切酶进行酶切反应 | 第31页 |
| 2.2.7 酶切产物的脱盐处理 | 第31页 |
| 2.2.8 毛细管电泳检测 | 第31-32页 |
| 2.3 数据分析 | 第32-35页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第35-53页 |
| 3.1 底泥样品的采集 | 第35-36页 |
| 3.2 双荧光标记T-RFLP分析前处理 | 第36-38页 |
| 3.2.1 底泥样品宏基因组DNA的提取及浓度测定 | 第36-37页 |
| 3.2.2 非荧光引物PCR结果 | 第37-38页 |
| 3.3 双荧光标记T-RFLP图谱分析 | 第38-42页 |
| 3.4 T-RFs的数目统计及分析 | 第42-46页 |
| 3.5 基于RDP数据库的细菌群落分析 | 第46-53页 |
| 3.5.1 RDP数据库比对及数据处理 | 第46页 |
| 3.5.2 样品间相似度分析 | 第46-47页 |
| 3.5.3 细菌群落多样性分析 | 第47-49页 |
| 3.5.4 溢油前后优势菌种差异分析 | 第49-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 1 结论 | 第53页 |
| 2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 群落结构分析表及优势菌种名称表 | 第58-78页 |
| 致谢 | 第78页 |