| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语/符号说明 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 研究现状、成果 | 第15-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 一、携带白蛋白启动子小鼠SCP_2基因表达载体的构建 | 第17-42页 |
| 1.1 对象与方法 | 第17-33页 |
| 1.1.1 试剂 | 第17页 |
| 1.1.2 细胞培养和冻存 | 第17-18页 |
| 1.1.3 小鼠SCP_2基因的克隆 | 第18-21页 |
| 1.1.4 将白蛋白启动子区接入小鼠SCP_2基因上游 | 第21-23页 |
| 1.1.5 质粒PDC312-IRES2-EGFP的构建 | 第23-25页 |
| 1.1.6 质粒PDC312-ALB-SCP_2-IRES2-EGFP的构建 | 第25页 |
| 1.1.7 腺病毒包装、纯化及滴度测定 | 第25-29页 |
| 1.1.8 检测腺病毒在Hepa1-6细胞内mRNA的表达 | 第29-30页 |
| 1.1.9 检测腺病毒在Hepa1-6细胞内SCP_2蛋白 | 第30-33页 |
| 1.1.10 统计学处理 | 第33页 |
| 1.2 结果 | 第33-38页 |
| 1.2.1 RNA完整性检测 | 第33-34页 |
| 1.2.2 穿梭质粒构建流程 | 第34-35页 |
| 1.2.3 质粒克隆结果鉴定 | 第35-36页 |
| 1.2.4 重组腺病毒的制备 | 第36-37页 |
| 1.2.5 实时定量PCR检测基因的mRNA表达情况 | 第37-38页 |
| 1.2.6 SCP_2蛋白的表达 | 第38页 |
| 1.3 讨论 | 第38-41页 |
| 1.4 小结 | 第41-42页 |
| 二、小鼠SCP_2基因shRNA重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第42-51页 |
| 2.1 对象和方法 | 第42-45页 |
| 2.1.1 材料 | 第42页 |
| 2.1.2 两步PCR法合成小鼠SCP_2基因特异性shRNA靶序列 | 第42-43页 |
| 2.1.3 穿梭载体的构建 | 第43页 |
| 2.1.4 腺病毒基因组质粒的提取 | 第43-44页 |
| 2.1.5 重组腺病毒的构建 | 第44页 |
| 2.1.6 重组腺病毒的鉴定 | 第44页 |
| 2.1.7 统计学分析 | 第44-45页 |
| 2.2 结果 | 第45-48页 |
| 2.2.1 克隆质粒的鉴定 | 第45页 |
| 2.2.2 病毒包装293细胞形态的改变及病毒滴度测定 | 第45-46页 |
| 2.2.3 腺病毒的验证 | 第46-48页 |
| 2.3 讨论 | 第48-50页 |
| 2.4 小结 | 第50-51页 |
| 三、SCP_2影响胆固醇和胆汁酸代谢参与结石的形成 | 第51-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.1.1 材料 | 第51页 |
| 3.1.2 动物模型制作 | 第51-52页 |
| 3.1.3 胆汁流率测定 | 第52页 |
| 3.1.4 高效液相色谱(HPLC)检测胆汁成分 | 第52-53页 |
| 3.1.5 计算胆汁成石指数 | 第53页 |
| 3.1.6 RT-PCR检测肝组织mRNA的表达量 | 第53-54页 |
| 3.1.7 统计学处理 | 第54页 |
| 3.2 结果 | 第54-60页 |
| 3.2.1 各实验组胆汁流率的比较 | 第54-55页 |
| 3.2.2 胆汁成分及成石指数 | 第55-58页 |
| 3.2.3 肝组织mRNA的表达量 | 第58-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-65页 |
| 3.3.1 胆汁成分及其关系 | 第60-62页 |
| 3.3.2 SCP_2与胆汁成石性的关系 | 第62-63页 |
| 3.3.3 结石相关基因的变化 | 第63-65页 |
| 3.4 小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第75-76页 |
| 综述 | 第76-88页 |
| 胆固醇结石形成的研究与进展 | 第76-83页 |
| 综述参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
