| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 氮的吸收及转运 | 第13-14页 |
| 1.1.1 氮的吸收及转运系统 | 第13-14页 |
| 1.2 氮的再分配 | 第14-15页 |
| 1.3 植物MIRNA加工及功能 | 第15-19页 |
| 1.3.1 植物miRNA的加工 | 第15-16页 |
| 1.3.2 植物内源siRNA的加工 | 第16-17页 |
| 1.3.3 miRNA与靶基因的作用 | 第17页 |
| 1.3.4 植物miRNA的功能 | 第17-19页 |
| 1.4 植物蛋白的泛素化调控 | 第19-20页 |
| 1.5 MIR827与泛素化连接酶NLA | 第20-21页 |
| 1.6 研究内容和方法 | 第21-23页 |
| 1.6.1 拟解决的关键问题 | 第21页 |
| 1.6.2 采用的技术方法和研究路线 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-42页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第23-24页 |
| 2.1.3 酶、试剂盒与生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-42页 |
| 2.2.1 常用试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.2.2 植物培养 | 第26-27页 |
| 2.2.3 植物RNA的提取及反转录 | 第27-28页 |
| 2.2.4 小RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.5 小RNA的分离及杂交 | 第28-29页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR | 第29页 |
| 2.2.7 目的基因的克隆 | 第29-31页 |
| 2.2.8 相关载体构建 | 第31-33页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的转基因 | 第33-34页 |
| 2.2.10 GST-融合蛋白的诱导及纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.11 Western blot检测靶蛋白的表达量 | 第35-36页 |
| 2.2.12 Pull-down实验 | 第36页 |
| 2.2.13 Co-IP (CO-immunoprecipitation)实验 | 第36-37页 |
| 2.2.14 双分子荧光互补实验（BiFC） | 第37页 |
| 2.2.15 Dual系统膜蛋白酵母双杂 | 第37-40页 |
| 2.2.16 亚细胞定位 | 第40页 |
| 2.2.17 体外泛素化 | 第40页 |
| 2.2.18 氮含量测定及15N示踪实验 | 第40-41页 |
| 2.2.19 GUS组织活性实验 | 第41页 |
| 2.2.20 钒钼黄法测定磷含量 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-57页 |
| 3.1 突变株低氮表型 | 第42-45页 |
| 3.1.1 nla突变株对低氮敏感 | 第42-44页 |
| 3.1.2 35::NLA老叶N累积增加 | 第44页 |
| 3.1.3 nla突变株氮转运速率增加 | 第44-45页 |
| 3.2 NLA对NRT1.7 的泛素化调控 | 第45-52页 |
| 3.2.1 NLA和NRT1.7 定位到细胞膜上 | 第45-46页 |
| 3.2.2 酵母和植物体内NLA与NRT1.7 相互作用 | 第46-52页 |
| 3.3 miR827对NLA的翻译抑制 | 第52-57页 |
| 3.3.1 NLA不受低氮诱导 | 第52-53页 |
| 3.3.2 miR827翻译后水平调控NLA | 第53-57页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 附录 | 第71-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
