| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 内参基因稳定性研究 | 第12-18页 |
| 1.1 基因表达量测定方法 | 第12-13页 |
| 1.2 qRT-PCR | 第13-16页 |
| 1.3 内参基因 | 第16-17页 |
| 1.4 内参基因稳定性的分析方法 | 第17-18页 |
| 2 植物耐铝毒的相关研究进展 | 第18-21页 |
| 2.1 我国土壤铝毒概况 | 第18-19页 |
| 2.2 铝毒对植物的危害 | 第19-20页 |
| 2.3 植物的耐铝毒、解铝毒机制 | 第20-21页 |
| 3 锌指蛋白的相关进展研究 | 第21-25页 |
| 3.1 锌指蛋白 | 第21-23页 |
| 3.2 C2H2型锌指蛋白 | 第23-24页 |
| 3.3 植物中与耐铝毒相关的C2H2型锌指蛋白的研究进展 | 第24-25页 |
| 4 研究目的与意义 | 第25-28页 |
| 第二章 不同逆境胁迫下内参基因的稳定性研究 | 第28-54页 |
| 1 材料与试剂 | 第28-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第28页 |
| 1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 1.3 基本营养液 | 第28页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.1 候选内参基因的选择与引物设计 | 第29页 |
| 2.2 材料培养与胁迫处理方法 | 第29-31页 |
| 2.3 样品采集 | 第31页 |
| 2.4 植物总RNA提取 | 第31页 |
| 2.5 总RNA质量评估 | 第31-32页 |
| 2.6 cDNA第一条链的合成 | 第32-33页 |
| 2.7 qRT-PCR | 第33-34页 |
| 2.8 基因扩增效率的测定和特异性检测 | 第34页 |
| 2.9 数据分析 | 第34页 |
| 3 实验结果与分析 | 第34-51页 |
| 3.1 大豆总RNA质量鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2 熔解曲线分析 | 第35-36页 |
| 3.3 内参基因与目的基因标准曲线与扩增效率 | 第36-37页 |
| 3.4 内参基因在所有样品中的Cq值分布 | 第37-38页 |
| 3.5 不同胁迫处理条件下内参基因的稳定性差异 | 第38-50页 |
| 3.6 GmALMT1和GmARI1的实例验证 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 大豆C2H2型锌指蛋白基因GmZFP3的克隆与功能分析 | 第54-76页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第54-55页 |
| 1.1 植物材料 | 第54页 |
| 1.2 质粒载体与菌株 | 第54页 |
| 1.3 主要试剂 | 第54页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-64页 |
| 2.1 大豆GmZFP3基因的克隆 | 第55-57页 |
| 2.2 GmZFP3基因的生物信息学分析 | 第57页 |
| 2.3 亚细胞定位 | 第57-60页 |
| 2.4 GmZFP3两个基因在不同胁迫处理下的荧光定量分析 | 第60-61页 |
| 2.5 GmZFP3的基因功能验证 | 第61-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-74页 |
| 3.1 大豆基因GmZFP3的克隆 | 第64-65页 |
| 3.2 GmZFP3的生物信息学分析 | 第65-67页 |
| 3.3 GmZFP3基因过表达载体的构建 | 第67-69页 |
| 3.4 GmZFP3的亚细胞定位 | 第69页 |
| 3.5 GmZFP3在不同胁迫处理下的qRT-PCR分析 | 第69-72页 |
| 3.6 GmZFP3基因功能的研究 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 全文结论 | 第76-78页 |
| 本研究的创新之处 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 附录 | 第90-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
