| 摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 缩略词表 | 第18-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-38页 |
| 1 葡萄糖6磷酸脱氢酶的研究进展 | 第19-27页 |
| 1.1 戊糖磷酸途径 | 第19-20页 |
| 1.2 G6PD的生物功能 | 第20-21页 |
| 1.3 G6PD的酶学特性 | 第21-25页 |
| 1.3.1 G6PD的分离纯化 | 第21-22页 |
| 1.3.2 G6PD分子量和亚基 | 第22-23页 |
| 1.3.3 温度对G6PD的影响 | 第23页 |
| 1.3.4 pH对G6PD的影响 | 第23-24页 |
| 1.3.5 金属对G6PD的影响 | 第24-25页 |
| 1.4 G6PD的调节机制 | 第25-27页 |
| 2 CPT I的研究进展 | 第27-30页 |
| 2.1 CPT I的表达特征 | 第27-28页 |
| 2.2 CPT I的酶学特征 | 第28-29页 |
| 2.3 CPT I的调节机制 | 第29-30页 |
| 3 水体铜、锌暴露对鱼类脂代谢的影响 | 第30-36页 |
| 3.1 鱼类脂代谢 | 第30-33页 |
| 3.1.1 脂肪的合成 | 第30-31页 |
| 3.1.2 脂肪的分解 | 第31-33页 |
| 3.1.3 脂肪的转运 | 第33页 |
| 3.2 水体铜、锌暴露对鱼类脂代谢的影响 | 第33-36页 |
| 3.2.1 水体铜暴露对鱼类脂代谢的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.2 水体锌暴露对鱼类脂代谢的影响 | 第35-36页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第36-38页 |
| 第二章 草鱼葡萄糖 6-磷酸脱氢酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第38-51页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第39页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 2.1.3 实验仪器和设备 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 粗酶液的制备 | 第40页 |
| 2.2.2 2’, 5’-ADP-琼脂糖 4B亲和层析 | 第40页 |
| 2.2.3 DEAE-琼脂糖柱层析 | 第40页 |
| 2.2.4 G6PD分子量的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.5 G6PD活性和蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
| 2.2.6 反应条件对G6PD活性的影响 | 第42页 |
| 2.2.7 G6PD催化反应的催化机理及动力学参数 | 第42页 |
| 2.2.8 金属离子对G6PD催化活力影响 | 第42-43页 |
| 2.2.9 金属离子对G6PD抑制类型 | 第43页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第43页 |
| 3 实验结果与分析 | 第43-48页 |
| 3.1 G6PD的分离纯化 | 第43页 |
| 3.2 G6PD的最适温度 | 第43-44页 |
| 3.3 G6PD的最适pH和碱性稳定性 | 第44-45页 |
| 3.4 G6PD催化反应的催化机理及动力学参数 | 第45-46页 |
| 3.5 金属离子对G6PD催化活力影响及抑制类型 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 草鱼CPT I基因cDNA的分子克隆及组织表达 | 第51-69页 |
| 1 前言 | 第51-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第52页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第52页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第52-53页 |
| 2.2 实验方法 | 第53-57页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第53页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第53页 |
| 2.2.3 CPT I cDNA核心片段克隆 | 第53-55页 |
| 2.2.4 CPT I全长cDNA的克隆 | 第55-56页 |
| 2.2.5 全长cDNA的获得及序列分析 | 第56-57页 |
| 2.2.6 组织表达 | 第57页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-65页 |
| 3.1 草鱼CPT I基因cDNA序列和结构 | 第58-60页 |
| 3.2 CPT I的进化分析 | 第60页 |
| 3.3 CPT I的组织表达 | 第60-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| 第四章 草鱼不同组织CPT I动力学研究 | 第69-80页 |
| 1 前言 | 第69-70页 |
| 2 材料与方法 | 第70-73页 |
| 2.1 实验材料 | 第70-71页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第70页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第70-71页 |
| 2.2 实验方法 | 第71-73页 |
| 2.2.1 线粒体的分离和完整性检测及脂肪测定 | 第71页 |
| 2.2.2 CoASH的标准曲线的制作 | 第71页 |
| 2.2.3 CPT I活性和蛋白浓度的测定 | 第71-72页 |
| 2.2.4 反应条件对CPT I酶活性的影响 | 第72页 |
| 2.2.5 CPT I催化反应的动力学参数 | 第72-73页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第73页 |
| 3 实验结果与分析 | 第73-76页 |
| 3.1 CPT I最适温度和pH | 第73页 |
| 3.2 CPT I的最适蛋白浓度和孵育时间 | 第73-74页 |
| 3.3 CPT I动力学参数 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-80页 |
| 第五章 草鱼不同发育期CPT I酶学性质研究和肉碱组成 | 第80-90页 |
| 1 前言 | 第80-81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-83页 |
| 2.1 实验材料 | 第81页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第81页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第81页 |
| 2.2 实验方法 | 第81-82页 |
| 2.2.1 取样 | 第81页 |
| 2.2.2 线粒体的分离及其完整性检测 | 第81页 |
| 2.2.3 CPT I活性的测定 | 第81-82页 |
| 2.2.4 CPT I催化反应的动力学参数 | 第82页 |
| 2.2.5 组织肉碱水平的测定 | 第82页 |
| 2.3 数据分析 | 第82-83页 |
| 3 实验结果与分析 | 第83-88页 |
| 3.1 组织肉碱浓度测定 | 第83页 |
| 3.2 CPT I的酶活力 | 第83页 |
| 3.3 CPT I酶动力学参数 | 第83-84页 |
| 3.4 相关性分析 | 第84-88页 |
| 4 讨论 | 第88-90页 |
| 第六章 水体铜暴露对草鱼肝胰脏和肌肉脂代谢影响 | 第90-103页 |
| 1 前言 | 第90-91页 |
| 2 材料与方法 | 第91-95页 |
| 2.1 实验材料 | 第91页 |
| 2.2 实验设计 | 第91页 |
| 2.3 取样 | 第91-92页 |
| 2.4 脂肪和铜含量的测定 | 第92页 |
| 2.5 组织酶液的制备及酶活的测定 | 第92-93页 |
| 2.5.1 酶液的制备 | 第92页 |
| 2.5.2 酶活的测定 | 第92-93页 |
| 2.6 相关基因m RNA的表达水平 | 第93-95页 |
| 2.7 数据统计分析 | 第95页 |
| 3 结果与分析 | 第95-101页 |
| 3.1 水体铜对生长、脂肪含量和铜积累的影响 | 第95页 |
| 3.2 水体铜对肝胰脏中脂代谢相关酶活性及其表达的影响 | 第95-96页 |
| 3.3 水体铜对肌肉中脂代谢相关酶活性及其表达的影响 | 第96页 |
| 3.4 相关性分析 | 第96-101页 |
| 4 讨论 | 第101-103页 |
| 第七章 水体锌暴露对草鱼肝胰脏和肌肉脂代谢影响 | 第103-115页 |
| 1 前言 | 第103-104页 |
| 2 材料与方法 | 第104-105页 |
| 2.1 实验材料 | 第104页 |
| 2.2 实验设计 | 第104页 |
| 2.3 取样 | 第104-105页 |
| 2.4 脂肪和锌含量的测定 | 第105页 |
| 2.5 组织酶液的制备及酶活的测定 | 第105页 |
| 2.6 相关基因mRNA的表达水平 | 第105页 |
| 2.7 数据统计分析 | 第105页 |
| 3 结果与分析 | 第105-112页 |
| 3.1 水体锌对生长、脂肪含量和锌积累的影响 | 第105-107页 |
| 3.2 水体锌对肝胰脏中脂代谢相关酶活性及其表达的影响 | 第107页 |
| 3.3 水体锌对肌肉中脂代谢相关酶活性及其表达的影响 | 第107页 |
| 3.4 相关性分析 | 第107-112页 |
| 4 讨论 | 第112-115页 |
| 全文总结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-136页 |
| 附录 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-139页 |
