| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| 1.1 DNA损伤与修复应答 | 第8-12页 |
| 1.1.1 DNA损伤 | 第8页 |
| 1.1.2 DNA损伤修复应答(DDR) | 第8-11页 |
| 1.1.3 DNA双链断裂修复应答 | 第11-12页 |
| 1.1.4 DDR与疾病 | 第12页 |
| 1.2 组蛋白翻译后修饰 | 第12-15页 |
| 1.2.1 组蛋白修饰的结构基础 | 第12-13页 |
| 1.2.2 组蛋白修饰概念 | 第13页 |
| 1.2.3 组蛋白修饰作用 | 第13页 |
| 1.2.4 DDR中的组蛋白翻译后修饰 | 第13-15页 |
| 1.3 糖基化修饰 | 第15-17页 |
| 1.3.1 糖基化修饰概念 | 第15页 |
| 1.3.2 糖基转移酶OGT | 第15-16页 |
| 1.3.3 糖基化修饰作用 | 第16页 |
| 1.3.4 糖基化修饰与肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.4 立项依据与研究内容 | 第17-18页 |
| 1.4.1 立项依据 | 第17页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-24页 |
| 2.1.1 菌株与细胞 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒 | 第18页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验溶液 | 第21-23页 |
| 2.1.6 培养基 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第24-27页 |
| 2.2.2 重组质粒的原核表达纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.2.4 PEI转染 | 第29页 |
| 2.2.5 慢病毒包装与感染 | 第29页 |
| 2.2.6 DNA修复实验 | 第29-30页 |
| 2.2.7 免疫荧光实验(IF) | 第30页 |
| 2.2.8 染色质免疫共沉淀实验(ChIP assay) | 第30-31页 |
| 2.2.9 DNA损伤试剂敏感性实验 | 第31页 |
| 2.2.10 蛋白亲和纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.11 纯化蛋白的质谱分析 | 第32页 |
| 2.2.12 免疫共沉淀和Western Blot | 第32-33页 |
| 2.2.13 数据统计分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-54页 |
| 3.1 OGT直接参与DNA损伤修复应答 | 第34-42页 |
| 3.1.1 OGT影响DNA损伤后细胞的存活 | 第34-37页 |
| 3.1.2 OGT影响DNA损伤后细胞的修复进程 | 第37-38页 |
| 3.1.3 OGT影响同源重组修复和非同源末端连接修复 | 第38-42页 |
| 3.1.4 小结 | 第42页 |
| 3.2 OGT调控的H2B S112GlcNAc参与DNA损伤修复 | 第42-48页 |
| 3.2.1 H2B S112GlcNAc在DNA损伤位点处增加 | 第42-44页 |
| 3.2.2 H2B S112GlcNAc影响DNA损伤后细胞的存活 | 第44-45页 |
| 3.2.3 H2B S112GlcNAc影响DNA损伤修复进程 | 第45-46页 |
| 3.2.4 H2B S112GlcNAc影响同源重组修复和非同源末端连接修复 | 第46-48页 |
| 3.2.5 小结 | 第48页 |
| 3.3 H2B S112GlcNAc与NBS1相互作用并调控NBS1 foci | 第48-54页 |
| 3.3.1 蛋白质谱显示H2B S112GlcNAc与NBS1相互作用 | 第48-50页 |
| 3.3.2 免疫共沉淀(Co-IP)证明H2B S112GlcNAc与NBS1相互作用 | 第50-51页 |
| 3.3.3 H2B S112GlcNAc调控DNA损伤后NBS1 foci | 第51-53页 |
| 3.3.4 小结 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-64页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文 | 第64-65页 |
| 8 致谢 | 第65页 |
