| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 中英文缩写对照 | 第9-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-21页 |
| 1.1 USP11蛋白的概述 | 第14-17页 |
| 1.1.1 USP11在细胞内的分子功能 | 第14-16页 |
| 1.1.2 USP11与疾病 | 第16-17页 |
| 1.2 细胞周期与肿瘤 | 第17-19页 |
| 1.2.1 p21蛋白的概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 p21在细胞内的分子功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3 p21转录及蛋白水平的调控 | 第19页 |
| 1.3 本课题的研究目的、内容和意义 | 第19-21页 |
| 第2章 USP11和p21蛋白之间的相互作用 | 第21-39页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料与实验仪器 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.3.1 试剂配制 | 第23-25页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第25页 |
| 2.3.3 蛋白胶内酶解 | 第25-27页 |
| 2.3.4 过表达实验 | 第27-30页 |
| 2.3.5 蛋白质的检测 | 第30-31页 |
| 2.3.6 免疫共沉淀 | 第31-32页 |
| 2.3.7 蛋白纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.8 免疫荧光 | 第33页 |
| 2.4 实验结果 | 第33-37页 |
| 2.4.1 去泛素化酶USP11下游底物蛋白质的检测 | 第33-34页 |
| 2.4.2 去泛素化酶USP11和p21蛋白存在潜在的相互作用 | 第34-35页 |
| 2.4.3 USP11和p21蛋白在细胞内共定位 | 第35-36页 |
| 2.4.4 过表达USP11与内源性p21的相互作用 | 第36页 |
| 2.4.5 内源性p21与内源性USP11蛋白的相互作用 | 第36-37页 |
| 2.4.6 USP11和p21存在直接的相互作用 | 第37页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第3章 USP11通过p53非依赖方式影响p21蛋白的稳定性 | 第39-48页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-44页 |
| 3.3.1 siRNA转染 | 第40页 |
| 3.3.2 特异性USP11-shRNA慢病毒制备 | 第40-42页 |
| 3.3.3 过表达实验 | 第42页 |
| 3.3.4 荧光定量PCR | 第42-44页 |
| 3.4 实验结果 | 第44-47页 |
| 3.4.1 干扰USP11表达下调p21蛋白 | 第44-45页 |
| 3.4.2 USP11在蛋白水平上调控p21 | 第45-46页 |
| 3.4.3 过表达USP11促进p21蛋白的上调 | 第46-47页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第47-48页 |
| 第4章 USP11稳定p21蛋白 | 第48-55页 |
| 4.1 前言 | 第48-49页 |
| 4.2 实验材料与实验仪器 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 蛋白酶体抑制试验 | 第49-50页 |
| 4.3.2 蛋白的半衰期检测 | 第50-51页 |
| 4.4 实验结果 | 第51-54页 |
| 4.4.1 USP11通过蛋白酶体途径调控p21蛋白水平 | 第51-52页 |
| 4.4.2 干扰USP11缩短p21蛋白半衰期 | 第52-53页 |
| 4.4.3 过表达USP11延长p21蛋白的半衰期 | 第53-54页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第5章 USP11通过p21蛋白影响细胞周期G1/S期进程 | 第55-62页 |
| 5.1 前言 | 第55-56页 |
| 5.2 实验材料与实验仪器 | 第56页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第56页 |
| 5.2.2 试剂配制 | 第56页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第56页 |
| 5.3 实验方法 | 第56-58页 |
| 5.3.1 细胞周期实验 | 第56-57页 |
| 5.3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第57-58页 |
| 5.3.3 克隆形成实验 | 第58页 |
| 5.4 实验结果 | 第58-61页 |
| 5.4.1 USP11通过p21蛋白介导细胞周期进程 | 第58-59页 |
| 5.4.2 USP11影响细胞的增殖 | 第59-61页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第61-62页 |
| 结论与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
