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苏云金芽胞杆菌作用秀丽隐杆线虫肠道细胞上皮连接的研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语表第11-12页
1. 前言第12-35页
    1.1 植物寄生线虫的危害及防治第12-14页
        1.1.1 植物寄生线虫的危害第12-13页
        1.1.2 植物寄生线虫的防治第13-14页
    1.2 苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫第14-18页
        1.2.1 苏云金芽胞杆菌简介第14-16页
        1.2.2 苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫第16-18页
    1.3 苏云金芽胞杆菌杀昆虫机制第18-24页
        1.3.1 昆虫肠道细胞的Cry蛋白受体第18-19页
        1.3.2 Cry蛋白作用昆虫模式第19-21页
        1.3.3 苏云金芽胞杆菌分泌致病因子参与毒杀昆虫第21-24页
    1.4 苏云金芽胞杆菌杀线虫机制第24-28页
        1.4.1 Cry蛋白毒杀秀丽隐杆线虫第24-27页
        1.4.2 Bt分泌的其他致病因子参与杀虫过程第27-28页
    1.5 秀丽隐杆线虫抵御病原菌侵染方式第28-33页
        1.5.1 秀丽隐杆线虫可以感知并逃避病原菌第28-29页
        1.5.2 秀丽隐杆线虫抵御病原菌的物理屏障第29-31页
        1.5.3 秀丽隐杆线虫抵御病原菌侵染的天然免疫第31-33页
    1.6 目的和意义第33-35页
2. 材料与方法第35-54页
    2.1 材料第35-44页
        2.1.1 菌株、质粒、引物、线虫第35-41页
        2.1.2 培养基,用途与培养条件第41页
        2.1.3 试剂第41-43页
        2.1.4 仪器第43-44页
    2.2 实验方法第44-54页
        2.2.1 DNA常规操作第44-46页
        2.2.2 蛋白质相关操作第46-48页
        2.2.3 秀丽隐杆线虫的准备第48页
        2.2.4 Cry蛋白对秀丽隐杆线虫的致死率测定第48-49页
        2.2.5 秀丽隐杆线虫RNA的抽提第49-50页
        2.2.6 秀丽隐杆线虫RNA的消化及反转录第50-51页
        2.2.7 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)第51-52页
        2.2.8 C.elegans细菌袋形成测定第52页
        2.2.9 C.elegans体内Bt定殖情况测定第52页
        2.2.10 C.elegans咽部取食Bt频率测定第52页
        2.2.11 苏云金芽胞杆菌对秀丽隐杆线虫的致病性测定第52-53页
        2.2.12 GFP标记线虫的荧光显微镜观察第53页
        2.2.13 罗丹明标记实验第53页
        2.2.14 生长曲线的测定第53页
        2.2.15 数据分析及作图第53-54页
3. 结果与分析第54-86页
    3.1 第一章:Bt新型致病因子ColB的发掘与功能研究第54-65页
        3.1.1 芽胞在Bt侵染C.elegans过程中起着重要作用第54-56页
        3.1.2 ColB的生物信息学发掘第56-57页
        3.1.3 ColB在Bt中的表达情况第57-60页
        3.1.4 ColB的表达受PlcR调控第60-61页
        3.1.5 ColB在C.elegans体内大量诱导表达第61-63页
        3.1.6 ColB在Bt杀虫过程中发挥重要作用第63-65页
    3.2 第二章:致病因子破坏线虫肠道细胞上皮连接第65-86页
        3.2.1 野生高毒力Bt毒杀线虫普遍存在细菌袋现象第65-69页
        3.2.2 细菌袋的形成与上皮连接的破坏有关第69-74页
        3.2.3 Bt通过作用线虫肠道细胞上皮连接加速侵染过程第74-77页
        3.2.4 转录调控因子PlcR参与Bt破坏线虫肠道细胞上皮连接第77-81页
        3.2.5 PlcR调控的致病因子ColB和BmpI参与破坏上皮连接第81-83页
        3.2.6 PlcR调控的致病因子ColB和Bmp1能够破坏线虫肠道第83-86页
4. 结论与讨论第86-90页
    4.1 致病因子帮助Bt在线虫宿主中完成生活史第86-87页
    4.2 致病因子破坏线虫肠道细胞上皮连接加速Bt的入侵第87-88页
    4.3 宿主肠道细胞上皮连接可能作为物理屏障抵御病原物质的入侵第88页
    4.4 Bt可能通过抑制C.elegans天然免疫通路来逃逸宿主防御第88-90页
参考文献第90-96页
附录第96-99页
已发表和待发表学术论文第99-100页
致谢第100-101页

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