摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1. 前言 | 第12-35页 |
1.1 植物寄生线虫的危害及防治 | 第12-14页 |
1.1.1 植物寄生线虫的危害 | 第12-13页 |
1.1.2 植物寄生线虫的防治 | 第13-14页 |
1.2 苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫 | 第14-18页 |
1.2.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第14-16页 |
1.2.2 苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫 | 第16-18页 |
1.3 苏云金芽胞杆菌杀昆虫机制 | 第18-24页 |
1.3.1 昆虫肠道细胞的Cry蛋白受体 | 第18-19页 |
1.3.2 Cry蛋白作用昆虫模式 | 第19-21页 |
1.3.3 苏云金芽胞杆菌分泌致病因子参与毒杀昆虫 | 第21-24页 |
1.4 苏云金芽胞杆菌杀线虫机制 | 第24-28页 |
1.4.1 Cry蛋白毒杀秀丽隐杆线虫 | 第24-27页 |
1.4.2 Bt分泌的其他致病因子参与杀虫过程 | 第27-28页 |
1.5 秀丽隐杆线虫抵御病原菌侵染方式 | 第28-33页 |
1.5.1 秀丽隐杆线虫可以感知并逃避病原菌 | 第28-29页 |
1.5.2 秀丽隐杆线虫抵御病原菌的物理屏障 | 第29-31页 |
1.5.3 秀丽隐杆线虫抵御病原菌侵染的天然免疫 | 第31-33页 |
1.6 目的和意义 | 第33-35页 |
2. 材料与方法 | 第35-54页 |
2.1 材料 | 第35-44页 |
2.1.1 菌株、质粒、引物、线虫 | 第35-41页 |
2.1.2 培养基,用途与培养条件 | 第41页 |
2.1.3 试剂 | 第41-43页 |
2.1.4 仪器 | 第43-44页 |
2.2 实验方法 | 第44-54页 |
2.2.1 DNA常规操作 | 第44-46页 |
2.2.2 蛋白质相关操作 | 第46-48页 |
2.2.3 秀丽隐杆线虫的准备 | 第48页 |
2.2.4 Cry蛋白对秀丽隐杆线虫的致死率测定 | 第48-49页 |
2.2.5 秀丽隐杆线虫RNA的抽提 | 第49-50页 |
2.2.6 秀丽隐杆线虫RNA的消化及反转录 | 第50-51页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR) | 第51-52页 |
2.2.8 C.elegans细菌袋形成测定 | 第52页 |
2.2.9 C.elegans体内Bt定殖情况测定 | 第52页 |
2.2.10 C.elegans咽部取食Bt频率测定 | 第52页 |
2.2.11 苏云金芽胞杆菌对秀丽隐杆线虫的致病性测定 | 第52-53页 |
2.2.12 GFP标记线虫的荧光显微镜观察 | 第53页 |
2.2.13 罗丹明标记实验 | 第53页 |
2.2.14 生长曲线的测定 | 第53页 |
2.2.15 数据分析及作图 | 第53-54页 |
3. 结果与分析 | 第54-86页 |
3.1 第一章:Bt新型致病因子ColB的发掘与功能研究 | 第54-65页 |
3.1.1 芽胞在Bt侵染C.elegans过程中起着重要作用 | 第54-56页 |
3.1.2 ColB的生物信息学发掘 | 第56-57页 |
3.1.3 ColB在Bt中的表达情况 | 第57-60页 |
3.1.4 ColB的表达受PlcR调控 | 第60-61页 |
3.1.5 ColB在C.elegans体内大量诱导表达 | 第61-63页 |
3.1.6 ColB在Bt杀虫过程中发挥重要作用 | 第63-65页 |
3.2 第二章:致病因子破坏线虫肠道细胞上皮连接 | 第65-86页 |
3.2.1 野生高毒力Bt毒杀线虫普遍存在细菌袋现象 | 第65-69页 |
3.2.2 细菌袋的形成与上皮连接的破坏有关 | 第69-74页 |
3.2.3 Bt通过作用线虫肠道细胞上皮连接加速侵染过程 | 第74-77页 |
3.2.4 转录调控因子PlcR参与Bt破坏线虫肠道细胞上皮连接 | 第77-81页 |
3.2.5 PlcR调控的致病因子ColB和BmpI参与破坏上皮连接 | 第81-83页 |
3.2.6 PlcR调控的致病因子ColB和Bmp1能够破坏线虫肠道 | 第83-86页 |
4. 结论与讨论 | 第86-90页 |
4.1 致病因子帮助Bt在线虫宿主中完成生活史 | 第86-87页 |
4.2 致病因子破坏线虫肠道细胞上皮连接加速Bt的入侵 | 第87-88页 |
4.3 宿主肠道细胞上皮连接可能作为物理屏障抵御病原物质的入侵 | 第88页 |
4.4 Bt可能通过抑制C.elegans天然免疫通路来逃逸宿主防御 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-96页 |
附录 | 第96-99页 |
已发表和待发表学术论文 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |