名词缩写 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-18页 |
1.1 链霉菌表达载体的构建 | 第11-12页 |
1.2 阿霉素 | 第12-15页 |
1.2.1 阿霉素简介 | 第12-14页 |
1.2.2 阿霉素作用机制 | 第14页 |
1.2.3 基因簇 | 第14-15页 |
1.3 蓝白斑筛选 | 第15-18页 |
1.3.1 蓝白斑筛选原理 | 第15-16页 |
1.3.2 蓝白斑筛选应用 | 第16-18页 |
第二章 链霉菌表达载体的构建 | 第18-37页 |
第一节 有组氨酸标签和TEV酶切位点的链霉菌表达载体的构建 | 第18-31页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 菌种与质粒 | 第18-19页 |
2.1.2 引物设计和合成 | 第19页 |
2.1.3 培养基 | 第19-20页 |
2.1.4 主要试剂及溶液 | 第20页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.2.1 PCR扩增目的基因 | 第20-21页 |
2.2.2 DNA片段的回收 | 第21页 |
2.2.3 酶连反应 | 第21页 |
2.2.4 E.coli DH10B感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
2.2.5 DNA转化 | 第22页 |
2.2.6 碱变性法提取质粒 | 第22-23页 |
2.2.7 重组质粒的酶切鉴定 | 第23页 |
2.2.8 有组氨酸标签和TEV酶切位点的链霉菌表达载体的构建流程 | 第23-24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-31页 |
2.3.1 实验结果 | 第24-29页 |
2.3.2 实验讨论 | 第29-31页 |
第二节 无组氨酸标签和TEV酶切位点的链霉菌表达载体的构建 | 第31-37页 |
2.4 实验材料 | 第31-32页 |
2.4.1 质粒表 | 第31页 |
2.4.2 引物设计和合成 | 第31-32页 |
2.5 实验方法 | 第32页 |
2.6 实验结果与讨论 | 第32-37页 |
2.6.1 实验结果 | 第32-35页 |
2.6.2 实验讨论 | 第35-37页 |
第三章 阿霉素生物合成基因簇大片段的克隆 | 第37-53页 |
第一节 29050基因组中阿霉素生物合成基因簇10.0kb的克隆 | 第37-44页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 引物表和质粒表 | 第37-38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第40-44页 |
3.3.1 实验结果 | 第40-43页 |
3.3.2 实验讨论 | 第43-44页 |
第二节 29050基因组中阿霉素生物合成基因簇大片段11.7kb克隆 | 第44-53页 |
3.4 实验材料 | 第44-45页 |
3.4.1 引物表和质粒表 | 第44-45页 |
3.5 实验方法 | 第45-47页 |
3.6 实验结果与讨论 | 第47-53页 |
3.6.1 实验结果 | 第47-52页 |
3.6.2 实验讨论 | 第52-53页 |
小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |