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IQGAP1-N-WASP信号通路在肺炎衣原体感染促进血管内皮细胞迁移及血管新生中的调控作用

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语第15-17页
前言第17-24页
    研究现状、成果第17-23页
    研究目的、方法第23-24页
一、C.pneumoniae感染对IQGAP1活性的影响第24-53页
    实验一 C.pneumoniae感染对IQGAP1活性的影响第24-46页
        1.1 实验材料第24-34页
            1.1.1 细胞第24页
            1.1.2 菌株第24页
            1.1.3 主要试剂第24-26页
            1.1.4 主要仪器第26-27页
            1.1.5 主要试剂的配制第27-34页
        1.2 实验方法第34-42页
            1.2.1 VEC的培养、复苏、传代与冻存第34页
            1.2.2 C.pneumoniae的增殖培养第34-35页
            1.2.3 C.pneumoniae感染VEC第35-36页
            1.2.4 Western blot分析C.pneumoniae感染后VEC IQGAP1内表达水平第36-40页
            1.2.5 免疫共沉淀分析C.pneumoniae感染后VEC IQGAP1的磷酸化水平第40-42页
            1.2.6. 统计学处理第42页
        1.3 结果第42-46页
            1.3.1. C.pneumoniae感染对VEC IQGAP1蛋白表达水平的影响第42-43页
            1.3.2. C.pneumoniae感染可诱导VEC IQGAP1酪氨酸磷酸化第43-44页
            1.3.3. C.pneumoniae感染促进VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化第44-46页
    实验二 Src、PKC在C.pneumoniae感染激活IQGAP1中的作用第46-53页
        2.1 实验材料第46-47页
            2.1.1. 细胞第46页
            2.1.2 菌株第46页
            2.1.3 主要试剂第46页
            2.1.4 主要仪器第46页
            2.1.5 主要试剂的配制第46-47页
        2.2 实验方法第47-49页
            2.2.1. C.pneumoniae感染VEC第47页
            2.2.2. CCK-8检测PP2、GF 109203X和chelerythrine对VEC活力的影响第47-48页
            2.2.3. 免疫共沉淀法检测PP2对C.pneumoniae感染诱导的VEC IQGAP1酪氨酸磷酸化的影响第48-49页
            2.2.4. 免疫共沉淀法检测GF 109203X和chelerythrine对C.pneumoniae感染诱导VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化的影响第49页
            2.2.5. 统计学处理第49页
        2.3 结果第49-53页
            2.3.1. PP2、GF 109203X和chelerythrine对VEC活力的影响第49-50页
            2.3.2. PP2可抑制C.pneumoniae感染诱导的IQGAP1酪氨酸磷酸化第50-51页
            2.3.3. GF 109203X和chelerythrine均可抑制C.pneumoniae感染诱导的VEC IQGAP1丝氨酸磷酸化第51-53页
二、IQGAP1在C.pneunioniae感染诱导的VEC迁移和血管新生中的作用第53-71页
    1. 实验材料第53-54页
        1.1. 细胞第53页
        1 2. 菌株第53页
        1.3. 主要试剂第53-54页
        1.4. 主要仪器第54页
        1.5. 主要试剂的配制第54页
    2. 实验方法第54-61页
        2.1. C.pneumoniae感染VEC第54页
        2.2. RNA干扰第54-55页
        2.3 免疫荧光法观察PP2、GF 109203X以及chelerythrine对C.pneumoniae感染率的影响第55-56页
        2.4. 实验分组第56页
        2.5. Wound healing实验第56-57页
        2.6. Transwell实验第57-58页
        2.7. 微管腔形成实验第58-59页
        2.8. 肌动蛋白聚合实验第59-60页
        2.9. 免疫荧光双标染色第60页
        2.10. 统计学处理第60-61页
    3. 结果第61-71页
        3.1. RNA干扰效能达到实验标准第61页
        3.2. 免疫荧光法确定PP2、GF 109203X以及chelerythrine对C.pneumoniae感染率的影响第61-63页
        3.3. Wound healing实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移中的作用第63-65页
        3.4. Transwell实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移中的作用第65-67页
        3.5. 微管腔形成实验观察IQGAP1在C.pneumoniae感染诱导的VEC血管新生中的作用第67-69页
        3.6. 激光扫描共聚焦显微镜观察C.pneumoniae感染对VEC肌动蛋白聚合的影响第69-70页
        3.7. 免疫荧光双标染色法观察C.pneumoniae感染VEC后IQGAP1和肌丝的共定位第70-71页
三、IQGAP1通过N-WASP调控C.pneumoniae感染诱导的VEC迁移和血管新生第71-76页
    1. 实验材料第71-72页
        1.1. 细胞第71页
        1.2. 菌株第71页
        1.3. 主要试剂第71页
        1.4. 主要仪器第71页
        1.5. 主要试剂的配制第71-72页
    2. 实验方法第72-73页
        2.1. C.pneumoniae感染VEC第72页
        2.2. 实验分组第72页
        2.3. 免疫共沉淀观察IQGAP1与N-WASP之间的相互作用第72页
        2.4. 共聚焦显微镜观察IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导VEC肌动蛋白和N-WASP共定位的影响第72页
        2.5. Western blot检测IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导的N-WASP磷酸化水平的影响第72-73页
        2.6. 统计学处理第73页
    3. 结果第73-76页
        3.1. IQGAP1与N-WASP之间的相互作用第73页
        3.2. IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导VEC肌丝和N-WASP共定位的影响第73-74页
        3.3. IQGAP1对C.pneumoniae感染诱导的VEC N-WASP磷酸化的影响第74-76页
讨论第76-86页
小结第86-87页
结论第87-88页
论文创新点第88-89页
参考文献第89-100页
发表论文和参加科研情况说明第100-102页
附录第102-104页
综述 IQGAP1在动脉粥样硬化发生发展中的作用研究进展第104-124页
    综述参考文献第114-124页
致谢第124页

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