| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略语 | 第8-11页 |
| 第一部分 文献综述 肿瘤血管形成研究进展 | 第11-34页 |
| 1 肿瘤血管形成机制 | 第11-12页 |
| 1.1 肿瘤血管形成的基本过程 | 第11-12页 |
| 1.2 肿瘤微血管形态和生物学特性 | 第12页 |
| 2. 肿瘤血管形成的调控机制 | 第12-18页 |
| 2.1 分子机制 | 第12-15页 |
| 2.2 细胞机制 | 第15-16页 |
| 2.3 信号通路 | 第16-18页 |
| 3 抗血管形成治疗在癌症治疗中的应用 | 第18-22页 |
| 3.1 VEGF抑制剂 | 第19-20页 |
| 3.2 基因治疗 | 第20-21页 |
| 3.3 其它治疗靶点 | 第21-22页 |
| 4 展望 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-34页 |
| 第二部分 实验研究 | 第34-76页 |
| 第一章 FSHR在肿瘤血管形成中的作用初探 | 第34-51页 |
| 1 材料和方法 | 第35-40页 |
| 1.1 细胞培养与试剂 | 第35-36页 |
| 1.2 引物 | 第36页 |
| 1.3 RT-PCR检测细胞中FSHR的表达 | 第36-37页 |
| 1.4 Western-Blotting检测细胞中FSHR的表达 | 第37-38页 |
| 1.5 细胞免疫化学检测细胞中FSHR的表达 | 第38-39页 |
| 1.6 HUVEC细胞成管实验 | 第39页 |
| 1.7 细胞迁移实验 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-47页 |
| 2.1 卵巢癌细胞及HUVEC细胞的培养 | 第40-41页 |
| 2.2 RT-PCR检测细胞中FSHR的表达 | 第41-42页 |
| 2.3 Western-Blotting检测细胞中FSHR的表达 | 第42-43页 |
| 2.4 细胞免疫化学实验检测细胞中FSHR的表达 | 第43页 |
| 2.5 细胞成管实验检测HUVEC中FSHR的表达 | 第43-44页 |
| 2.6 苏拉明对FSH刺激的细胞迁移的影响 | 第44-45页 |
| 2.7 苏拉明对FSH刺激的细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
| 2.8 苏拉明对FSH刺激的HUVEC细胞成管的影响 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 第二章 抗FSHR纳米抗体VHH-06 亲和力成熟 | 第51-75页 |
| 1 实验材料 | 第53-56页 |
| 1.1 菌种及质粒 | 第53页 |
| 1.2 酶、主要试剂 | 第53页 |
| 1.3 培养基及溶液配制 | 第53-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-64页 |
| 2.1 pET22b-vhh06-comp48序列设计及合成 | 第56页 |
| 2.2 pET22b-vhh06-comp48、pET30a-fshr234、pET30a-vhh06质粒转化BL21感受态细胞及转化后结果鉴定 | 第56-57页 |
| 2.3 His-VHH_(FSHR)-06-COMP48、His-FSHR234、His-VHH_(FSHR)-06 蛋白表达及纯化 | 第57-58页 |
| 2.4 Western Blot检测His-VHH_(FSHR)-06-COMP48及His-VHH_(FSHR)-06 重组蛋白与抗原的结合 | 第58-59页 |
| 2.5 ELISA检测His-VHH_(FSHR)-06-COMP48、His-VHH_(FSHR)-06 与抗原的结合能力 | 第59页 |
| 2.6 VHH_(FSHR)06 -CDR3区随机突变文库的构建 | 第59-62页 |
| 2.7 VHH_(FSHR)06 -CDR3突变库的亲和淘选 | 第62-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-71页 |
| 3.1 pET22b-vhh06-comp48、pET30a-fshr234、pET30a-vhh06质粒转化后转化子的鉴定 | 第64页 |
| 3.2 His-VHH_(FSHR)-06-COMP48蛋白的诱导表达及纯化 | 第64-66页 |
| 3.3 His-FSHR234、His-VHH_(FSHR)-06 蛋白的诱导表达及纯化 | 第66页 |
| 3.4 VHH_(FSHR)-06-COMP48、VHH_(FSHR)-06 与抗原的结合活性检测 | 第66-68页 |
| 3.5 VHH_(FSHR)-06 -CDR3随机突变文库的构建及鉴定 | 第68-70页 |
| 3.6 VHH_(FSHR)-06 -CDR3突变库的亲和淘选 | 第70-71页 |
| 3.7 多克隆Phage ELISA | 第71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 第三章 结论与展望 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
| 参与课题及发表文章 | 第77-78页 |
| 参与课题 | 第77页 |
| 发表文章 | 第77-78页 |
