| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要英文缩略词中英文注释表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-22页 |
| 1.1 肿瘤微环境 | 第16页 |
| 1.2 间充质干细胞 | 第16-18页 |
| 1.2.1 MSCs与肿瘤 | 第17页 |
| 1.2.2 MSCs与免疫调节 | 第17-18页 |
| 1.3 PD-1/PD-L1与肿瘤免疫 | 第18-19页 |
| 1.3.1 PD-1/PD-L1的简介 | 第18页 |
| 1.3.2 PD-1/PD-L1与肿瘤 | 第18页 |
| 1.3.3 PD-1/PD-L1与免疫抑制 | 第18-19页 |
| 1.4 c-Myc与肿瘤 | 第19-21页 |
| 1.4.1 c-Myc基因的简介 | 第19页 |
| 1.4.2 c-Myc与肿瘤 | 第19-20页 |
| 1.4.3 c-Myc与PD-L1 | 第20页 |
| 1.4.4 c-Myc与JQ1 | 第20-21页 |
| 1.5 小结 | 第21-22页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第22-26页 |
| 2.1 研究目的 | 第22页 |
| 2.2 研究方法 | 第22-23页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第23-25页 |
| 2.4 研究意义 | 第25-26页 |
| 第三章 PD-1、PD-L1在胃癌微环境及胃癌细胞株中的表达 | 第26-37页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第26-30页 |
| 3.1.1 标本采集 | 第26-27页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.4 主要仪器及相关耗材 | 第28-29页 |
| 3.1.5 溶液的配置 | 第29-30页 |
| 3.2 方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第30页 |
| 3.2.2 健康人外周血单个核细胞的分离 | 第30页 |
| 3.2.3 免疫组织化学染色 | 第30-31页 |
| 3.2.4 流式细胞术 | 第31页 |
| 3.2.5 胃癌细胞株及胃癌组织中蛋白的提取 | 第31-32页 |
| 3.2.6 蛋白免疫印迹 | 第32页 |
| 3.3 结果 | 第32-35页 |
| 3.3.1 胃癌细胞株中PD-1、PD-L1的表达情况 | 第32-34页 |
| 3.3.2 胃癌组织及相应癌旁组织中PD-1、PD-L1的表达情况 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 GC-MSCs对肿瘤细胞PD-L1的调控及在免疫逃逸中的作用 | 第37-52页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第37-38页 |
| 4.1.1 标本采集 | 第37页 |
| 4.1.2 细胞株 | 第37页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 4.1.4 主要器材 | 第38页 |
| 4.1.5 相关试剂的配置 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38-45页 |
| 4.2.1 GC-MSCs的分离与培养 | 第38-39页 |
| 4.2.2 BM-MSCs的分离与培养 | 第39页 |
| 4.2.3 GC-MSCs及BM-MSCs条件培养基的配制 | 第39-40页 |
| 4.2.4 Western blot检测肿瘤细胞经GCMSC-CM处理不同时间后PD-L1的表达情况 | 第40页 |
| 4.2.5 免疫荧光法验证SGC-7901、MGC-803 细胞经GCMSC-CM处理 24h后PD-L1的表达 | 第40-41页 |
| 4.2.6 流式细胞术检测经间充质干细胞上清刺激后胃癌细胞株PD-1、PD-L1的表达情况 | 第41页 |
| 4.2.7 定量PCR检测GCMSC-CM刺激后肿瘤细胞中PD-L1 mRNA水平的表达情况 | 第41-43页 |
| 4.2.8 LDH法检测活化的PBMC对GCMSC-CM处理后的肿瘤细胞MGC-803 细胞的杀伤作用 | 第43-44页 |
| 4.2.9 结晶紫染色计数经活化PBMC杀伤后SGC-7901、MGC-803 细胞存活情况 | 第44-45页 |
| 4.2.10 统计分析 | 第45页 |
| 4.3 结果 | 第45-50页 |
| 4.3.1 GC-MSC诱导肿瘤细胞PD-L1表达及时间依赖性 | 第45-46页 |
| 4.3.2 GC-MSCs与BM-MSCs对肿瘤细胞PD-L1诱导作用的比较 | 第46-48页 |
| 4.3.3 GC-MSCs对肿瘤细胞PD-1 表达的影响 | 第48页 |
| 4.3.4 GC-MSCs诱导肿瘤细胞发生免疫逃逸 | 第48-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 GC-MSCs调控胃癌细胞PD-L1表达机制 | 第52-60页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第52页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第52页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 5.1.3 主要器材 | 第52页 |
| 5.2 方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 JQ1药物终浓度的配制 | 第52-53页 |
| 5.2.2 JQ1与GCMSC-CM混合培养基的配制 | 第53页 |
| 5.2.3 Western blot检测肿瘤细胞经JQ1和/或GCMSC-CM作用后c-Myc、PD-L1的表达情况 | 第53页 |
| 5.2.4 流式细胞术检测经JQ1作用后胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡情况 | 第53-54页 |
| 5.2.5 LDH法检测活化的PBMC对JQ1处理后的SGC-7901 细胞杀伤作用 | 第54页 |
| 5.2.6 结晶紫染色计数经活化PBMC杀伤后SGC-7901/MGC-803 细胞存活情况 | 第54页 |
| 5.2.7 统计分析 | 第54页 |
| 5.3 结果 | 第54-58页 |
| 5.3.1 GCMSC-CM诱导肿瘤细胞c-Myc的表达 | 第54-55页 |
| 5.3.2 c-Myc抑制剂JQ1处理肿瘤细胞后肿瘤细胞PD-L1、c-Myc的表达情况 | 第55-56页 |
| 5.3.3 肿瘤细胞PD-L1表达降低后逆转GC-MSCs诱导的免疫逃逸 | 第56-58页 |
| 5.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 一、结论 | 第60页 |
| 二、展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的的学术论文及参加的会议 | 第73页 |
| 一．发表的论文 | 第73页 |
| 二、会议发表论文 | 第73页 |
| 三、参加会议 | 第73页 |
