| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第10-26页 |
| 1.1 猪瘟的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 猪瘟概况 | 第10页 |
| 1.1.2 猪瘟的病原学 | 第10-11页 |
| 1.1.3 猪瘟的临床症状 | 第11页 |
| 1.1.4 猪瘟的流行和分布 | 第11页 |
| 1.1.5 猪瘟的诊断 | 第11-12页 |
| 1.2 CSFV的繁殖过程及致病机理 | 第12-16页 |
| 1.2.1 病毒粒子结构、形态及理化特性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 CSFV的侵入及其在宿主体内的分布 | 第13-14页 |
| 1.2.3 CSFV在宿主细胞中的繁殖过程 | 第14-15页 |
| 1.2.4 CSFV对宿主细胞的致病机理 | 第15-16页 |
| 1.3 CSFV的基因组结构 | 第16-20页 |
| 1.3.1 CSFV基因组结构蛋白 | 第17-20页 |
| 1.3.2 CSFV基因组非结构蛋白 | 第20页 |
| 1.4 猪瘟病毒的分子流行病学 | 第20-21页 |
| 1.5 猪瘟的防制策略与防制新技术的研究.11 1.5.1猪瘟的防制策略 | 第21-26页 |
| 1.5.1 猪瘟的防制策略 | 第21-22页 |
| 1.5.2 基于重组病毒技术的猪瘟新型疫苗 | 第22-26页 |
| 第二章 昆虫杆状病毒表达载体的研究及应用 | 第26-41页 |
| 2.1 杆状病毒的分子生物学 | 第26-35页 |
| 2.1.1 杆状病毒的分类 | 第26页 |
| 2.1.2 杆状病毒的复制 | 第26-27页 |
| 2.1.3 杆状病毒的基因组 | 第27-28页 |
| 2.1.4 重组杆状病毒的构建 | 第28-32页 |
| 2.1.5 新型杆状病毒表达系统 | 第32-35页 |
| 2.2 昆虫杆状病毒表达载体表达外源基因研究进展及其应用前景 | 第35-41页 |
| 2.2.1 昆虫杆状病毒表达载体的优越性 | 第35-36页 |
| 2.2.2 影响外源基因表达水平的因素 | 第36-37页 |
| 2.2.3 昆虫杆状病毒表达载体系统表达外源基因研究进展 | 第37-38页 |
| 2.2.4 昆虫杆状病毒表达载体系统应用展望 | 第38-41页 |
| 第三章 猪瘟流行野毒株E2基因序列分析 | 第41-59页 |
| 3.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 毒株 | 第41-42页 |
| 3.1.2 引物的设计与合成 | 第42页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 RNA提取 | 第42-43页 |
| 3.2.2 RT-PCR和nPCR | 第43页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| 3.2.4 纯化回收DNA片段 | 第44页 |
| 3.2.5 纯化产物与PMD18-T Vector连接 | 第44页 |
| 3.2.6 新鲜感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第44-45页 |
| 3.2.7 连接产物的转化 | 第45页 |
| 3.2.8 重组质粒的提取 | 第45-46页 |
| 3.2.9 重组质粒的鉴定 | 第46页 |
| 3.2.10 计算机分析 | 第46页 |
| 3.3 结果 | 第46-55页 |
| 3.3.1 PCR扩增结果 | 第46-47页 |
| 3.3.2 质粒PCR及酶切鉴定结果 | 第47页 |
| 3.3.3 基因的核苷酸和相应的氨基酸序列 | 第47-54页 |
| 3.3.4 核苷酸和氨基酸序列同源性比较 | 第54-55页 |
| 3.3.5 9株国内流行毒的系统关系分析 | 第55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-58页 |
| 3.4.1 CSFV E2基因的获得 | 第55-56页 |
| 3.4.2 CSFV E2基因核苷酸序列及氨基酸序列的同源性 | 第56页 |
| 3.4.3 对9株CSFV E2糖蛋白抗原区氨基酸的分析 | 第56-57页 |
| 3.4.4 对9株CSFV E2糖蛋白的信号肽序列和TMR序列的分析 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 猪瘟病毒E2基因在昆虫细胞中的表达 | 第59-74页 |
| 4.1 材料 | 第59-61页 |
| 4.1.1 毒株 | 第59页 |
| 4.1.2 菌株、质粒和细胞 | 第59-60页 |
| 4.1.3 引物设计与合成 | 第60页 |
| 4.1.4 工具酶及试剂 | 第60页 |
| 4.1.5 培养基 | 第60-61页 |
| 4.1.6 仪器与设备 | 第61页 |
| 4.2 方法 | 第61-67页 |
| 4.2.1 猪瘟病毒陕西周至株E2基因的获取及其纯化 | 第61页 |
| 4.2.2 重组转座质粒的构建与鉴定 | 第61页 |
| 4.2.3 重组杆状病毒穿梭载体的获得及其鉴定 | 第61-62页 |
| 4.2.4 穿梭质粒转染sf9细胞和重组杆状病毒的获得 | 第62页 |
| 4.2.5 重组杆状病毒滴度的测定 | 第62-63页 |
| 4.2.6 昆虫细胞表达产物检测 | 第63-67页 |
| 4.3 结果 | 第67-71页 |
| 4.3.1 E2基因表达片段的获得 | 第67页 |
| 4.3.2 重组转座质粒的构建与鉴定 | 第67页 |
| 4.3.3 重组杆状病毒穿梭载体的鉴定 | 第67-69页 |
| 4.3.4 重组杆状病毒的获得 | 第69页 |
| 4.3.5 重组杆状病毒滴度的测定 | 第69页 |
| 4.3.6 SDS-PAGE和Western blot检测结果 | 第69-70页 |
| 4.3.7 表达产物的ELASA 检测 | 第70-71页 |
| 4.4 讨 论 | 第71-73页 |
| 4.4.1 杆状病毒载体表达系 | 第71-72页 |
| 4.4.2 关于E2基因表达片段的讨论 | 第72页 |
| 4.4.3 有关表达产物 | 第72-73页 |
| 4.5 小结 | 第73-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
