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hESCs和hiPSCs向红细胞分化的DNA甲基化谱分析及OCT4诱导hHFMSCs向红细胞分化

前言第4-5页
中文摘要第5-10页
Abstract第10-15页
英文缩略词表第20-22页
绪论第22-38页
    一、红系细胞生成及其调节第22-27页
        1. 胚胎造血过程中红系细胞的生成第22-23页
        2. 成年造血过程中红细胞谱系的建立第23-25页
        3. 红细胞的发育成熟第25-27页
    二、调控红系细胞生成的 DNA 甲基化机制第27-29页
    三、体外诱导红系细胞生成的实验研究第29-38页
        1. HSC 向红系细胞的定向分化第30页
        2. 多潜能干细胞向红系细胞的定向分化第30-33页
        3. 通过转导关键转录因子将其他细胞类型转分化为红细胞第33-36页
        4. 毛囊间充质干细胞在体外造血研究中的应用第36-38页
第一章 hESCs 向红细胞分化中 DNA 甲基化谱与基因表达谱的负相关分析第38-64页
    1.1 实验材料第38-39页
        1.1.1 细胞样本第38页
        1.1.2 主要仪器第38-39页
        1.1.3 主要试剂第39页
    1.2 实验方法第39-44页
        1.2.1 hESCs 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析第39-41页
        1.2.2 hESCs 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析第41-43页
        1.2.3 hESCs 向红细胞分化过程中负相关基因的分析第43-44页
        1.2.4 统计学方法第44页
    1.3 实验结果第44-59页
        1.3.1 hESC 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析第44-48页
        1.3.2 hESC 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析第48-51页
        1.3.3 DNA 甲基化与mRNA 表达水平呈负相关基因的筛选及分析第51-59页
    1.4 讨论第59-63页
    1.5 小结第63-64页
第二章 hiPSC 向红细胞分化中 DNA 甲基化谱与基因表达谱的负相关分析第64-86页
    2.1 实验材料第64-65页
        2.1.1 细胞样本第64页
        2.1.2 主要仪器和试剂第64-65页
    2.2 实验方法第65-66页
        2.2.1 hiPSC 向红系细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的改变第65页
        2.2.2 hiPSC 向红系细胞分化过程中基因表达谱的改变第65-66页
        2.2.3 筛选并分析基因表达与 DNA 甲基化负相关的基因第66页
        2.2.4 筛选并分析 OCT4 靶基因的表达情况第66页
        2.2.5 统计学分析方法第66页
    2.3 实验结果第66-79页
        2.3.1 hiPSC 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析第66-70页
        2.3.2 hiPSC 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析第70-73页
        2.3.3 DNA 甲基化与 mRNA 表达水平呈负相关基因的筛选及分析第73-77页
        2.3.4 OCT4 在 hiPSC 向红细胞分化中的作用第77-79页
    2.4 讨论第79-84页
    2.5 小结第84-86页
第三章 OCT4 诱导人毛囊间充质干细胞向红细胞分化第86-116页
    3.1 实验材料第86-91页
        3.1.1 细胞及质粒第86页
        3.1.2 主要仪器第86-87页
        3.1.3 主要试剂第87-89页
        3.1.4 主要培养基及试剂的配制第89-90页
        3.1.5 抗体及稀释倍数第90页
        3.1.6 RT-PCR 引物第90-91页
    3.2 实验方法第91-99页
        3.2.1 携带 OCT4 慢病毒的生产第91-92页
        3.2.2 携带 OCT4 慢病毒转导 hHFMSC 及鉴定第92-95页
        3.2.3 OCT4 转导后的 hHFMSC 形态改变及造血标志物的表达第95-96页
        3.2.4 造血相关细胞因子诱导 hHFMSCOCT4向红细胞分化第96-98页
        3.2.5 OCT4 在 hHFMSC 向红细胞分化过程中的作用机制第98-99页
    3.3 实验结果第99-111页
        3.3.1 携带 OCT4 的慢病毒载体转导 hHFMSC第99-102页
        3.3.2 OCT4 转导后 hHFMSC 的细胞形态改变和造血标志物的表达第102-104页
        3.3.3 hHFMSCOCT4向红细胞分化第104-106页
        3.3.4 红细胞脱核及成熟第106-108页
        3.3.5 hHFMSC 向红细胞分化未经历 HSC 阶段第108-110页
        3.3.6 OCT4 在 hHFMSC 向红细胞分化中的作用机制第110-111页
    3.4 讨论第111-115页
    3.5 小结第115-116页
课题创新性总结第116-118页
参考文献第118-136页
附表第136-152页
作者简介及在学期间所取代的科研成果第152-154页
致谢第154页

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