前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
英文缩略词表 | 第20-22页 |
绪论 | 第22-38页 |
一、红系细胞生成及其调节 | 第22-27页 |
1. 胚胎造血过程中红系细胞的生成 | 第22-23页 |
2. 成年造血过程中红细胞谱系的建立 | 第23-25页 |
3. 红细胞的发育成熟 | 第25-27页 |
二、调控红系细胞生成的 DNA 甲基化机制 | 第27-29页 |
三、体外诱导红系细胞生成的实验研究 | 第29-38页 |
1. HSC 向红系细胞的定向分化 | 第30页 |
2. 多潜能干细胞向红系细胞的定向分化 | 第30-33页 |
3. 通过转导关键转录因子将其他细胞类型转分化为红细胞 | 第33-36页 |
4. 毛囊间充质干细胞在体外造血研究中的应用 | 第36-38页 |
第一章 hESCs 向红细胞分化中 DNA 甲基化谱与基因表达谱的负相关分析 | 第38-64页 |
1.1 实验材料 | 第38-39页 |
1.1.1 细胞样本 | 第38页 |
1.1.2 主要仪器 | 第38-39页 |
1.1.3 主要试剂 | 第39页 |
1.2 实验方法 | 第39-44页 |
1.2.1 hESCs 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析 | 第39-41页 |
1.2.2 hESCs 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析 | 第41-43页 |
1.2.3 hESCs 向红细胞分化过程中负相关基因的分析 | 第43-44页 |
1.2.4 统计学方法 | 第44页 |
1.3 实验结果 | 第44-59页 |
1.3.1 hESC 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析 | 第44-48页 |
1.3.2 hESC 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析 | 第48-51页 |
1.3.3 DNA 甲基化与mRNA 表达水平呈负相关基因的筛选及分析 | 第51-59页 |
1.4 讨论 | 第59-63页 |
1.5 小结 | 第63-64页 |
第二章 hiPSC 向红细胞分化中 DNA 甲基化谱与基因表达谱的负相关分析 | 第64-86页 |
2.1 实验材料 | 第64-65页 |
2.1.1 细胞样本 | 第64页 |
2.1.2 主要仪器和试剂 | 第64-65页 |
2.2 实验方法 | 第65-66页 |
2.2.1 hiPSC 向红系细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的改变 | 第65页 |
2.2.2 hiPSC 向红系细胞分化过程中基因表达谱的改变 | 第65-66页 |
2.2.3 筛选并分析基因表达与 DNA 甲基化负相关的基因 | 第66页 |
2.2.4 筛选并分析 OCT4 靶基因的表达情况 | 第66页 |
2.2.5 统计学分析方法 | 第66页 |
2.3 实验结果 | 第66-79页 |
2.3.1 hiPSC 向红细胞分化过程中 DNA 甲基化谱的分析 | 第66-70页 |
2.3.2 hiPSC 向红细胞分化过程中基因表达谱的分析 | 第70-73页 |
2.3.3 DNA 甲基化与 mRNA 表达水平呈负相关基因的筛选及分析 | 第73-77页 |
2.3.4 OCT4 在 hiPSC 向红细胞分化中的作用 | 第77-79页 |
2.4 讨论 | 第79-84页 |
2.5 小结 | 第84-86页 |
第三章 OCT4 诱导人毛囊间充质干细胞向红细胞分化 | 第86-116页 |
3.1 实验材料 | 第86-91页 |
3.1.1 细胞及质粒 | 第86页 |
3.1.2 主要仪器 | 第86-87页 |
3.1.3 主要试剂 | 第87-89页 |
3.1.4 主要培养基及试剂的配制 | 第89-90页 |
3.1.5 抗体及稀释倍数 | 第90页 |
3.1.6 RT-PCR 引物 | 第90-91页 |
3.2 实验方法 | 第91-99页 |
3.2.1 携带 OCT4 慢病毒的生产 | 第91-92页 |
3.2.2 携带 OCT4 慢病毒转导 hHFMSC 及鉴定 | 第92-95页 |
3.2.3 OCT4 转导后的 hHFMSC 形态改变及造血标志物的表达 | 第95-96页 |
3.2.4 造血相关细胞因子诱导 hHFMSCOCT4向红细胞分化 | 第96-98页 |
3.2.5 OCT4 在 hHFMSC 向红细胞分化过程中的作用机制 | 第98-99页 |
3.3 实验结果 | 第99-111页 |
3.3.1 携带 OCT4 的慢病毒载体转导 hHFMSC | 第99-102页 |
3.3.2 OCT4 转导后 hHFMSC 的细胞形态改变和造血标志物的表达 | 第102-104页 |
3.3.3 hHFMSCOCT4向红细胞分化 | 第104-106页 |
3.3.4 红细胞脱核及成熟 | 第106-108页 |
3.3.5 hHFMSC 向红细胞分化未经历 HSC 阶段 | 第108-110页 |
3.3.6 OCT4 在 hHFMSC 向红细胞分化中的作用机制 | 第110-111页 |
3.4 讨论 | 第111-115页 |
3.5 小结 | 第115-116页 |
课题创新性总结 | 第116-118页 |
参考文献 | 第118-136页 |
附表 | 第136-152页 |
作者简介及在学期间所取代的科研成果 | 第152-154页 |
致谢 | 第154页 |