| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 第1章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 无融合生殖甜菜M14单体附加系品系 | 第7-8页 |
| 1.2 tf75-1f基因与植物的抗虫研究 | 第8-10页 |
| 1.3 taa2-1f基因与植物的抗病毒研究 | 第10-11页 |
| 1.4 植物转基因技术的研究 | 第11-12页 |
| 1.5 植物表达载体PBI121 | 第12-14页 |
| 1.6 转基因中的农杆菌介导转化原理 | 第14-15页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.2 引物的设计及合成 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验所需常用溶液、试剂及培养基的配制 | 第17页 |
| 2.2 质粒载体的构建 | 第17-27页 |
| 2.2.1 质粒载体的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.2 酶切反应 | 第19-20页 |
| 2.2.3 目的片段的回收及纯化 | 第20-21页 |
| 2.2.4 质粒构建中DNA接头片段及酶切位点的处理 | 第21-24页 |
| 2.2.5 连接反应 | 第24页 |
| 2.2.6 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.7 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第25-26页 |
| 2.2.8 连接产物的筛选及鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3 烟草无菌苗的培养 | 第27-28页 |
| 2.4 根癌农杆菌EHA105感受态的制备 | 第28-29页 |
| 2.5 根癌农杆菌介导CDNA转化烟草 | 第29-32页 |
| 2.5.1 电击法转化农杆菌 | 第29页 |
| 2.5.2 重组质粒在农杆菌中阳性克隆的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| 2.5.3 烟草的遗传转化 | 第30页 |
| 2.5.4 转基因烟草的基因组DNA的提取 | 第30-32页 |
| 2.6 甜菜M14花器官cDNA在烟草中的表达 | 第32-36页 |
| 2.6.1 转基因烟草的PCR检测 | 第32页 |
| 2.6.2 转基因烟草的芽再生培养 | 第32页 |
| 2.6.3 转基因烟草对蚜虫的抑制 | 第32-34页 |
| 2.6.4 转基因烟草对病毒的抗性 | 第34-35页 |
| 2.6.5 统计方法 | 第35-36页 |
| 第3章 结果与分析 | 第36-54页 |
| 3.1 质粒构建中酶切反应结果 | 第36-37页 |
| 3.2 tf75-1f基因与taa2-1f基因cDNA粘性末端的处理 | 第37-38页 |
| 3.3 目的片段连接转化与重组质粒的筛选结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1 重组质粒的筛选 | 第38-39页 |
| 3.3.2 质粒构建的测序结果 | 第39-40页 |
| 3.4 电击转化将植物表达载体转化到根癌农杆菌中的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 3.5 根癌农杆菌EHA105介导烟草的遗传转化 | 第41-43页 |
| 3.5.1 烟草无菌苗的培养 | 第41-42页 |
| 3.5.2 根癌农杆菌EHA105介导烟草的遗传转化 | 第42-43页 |
| 3.6 表达载体在转基因烟草中的检测 | 第43-47页 |
| 3.7 转基因烟草的tf75-1f抗虫性能的分析 | 第47-51页 |
| 3.8 转基因烟草的taa2-1f对病毒的抗性分析 | 第51-54页 |
| 第4章 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 表达载体中质粒载体的构建 | 第54页 |
| 4.2 农杆菌介导法对烟草的遗传转化 | 第54-55页 |
| 4.3 转基因烟草对蚜虫和病毒的抵制作用 | 第55-57页 |
| 第5章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录1 | 第65-71页 |
| 附录2 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
