| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 引言 | 第13-17页 |
| 1.1 肾脏发育及其在泌尿系统疾病防治中的地位 | 第13-14页 |
| 1.2 Robo2的分子结构以及Slit2/Robo2信号通路 | 第14-15页 |
| 1.3 Robo2与肾脏发育的关系 | 第15-16页 |
| 1.3.1 Robo2在肾脏的表达 | 第15页 |
| 1.3.2 Robo2对肾脏发育的影响 | 第15-16页 |
| 1.4 本课题的研究内容 | 第16-17页 |
| 第2章 Robo2基因敲除和野生型小鼠胚肾mRNA差异 | 第17-32页 |
| 2.1 实验材料、主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 其他 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 实验动物处理及标本留取 | 第18页 |
| 2.2.2 Robo2基因敲除小鼠的基因型鉴定 | 第18-20页 |
| 2.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第20-21页 |
| 2.2.4 RNA-Seq测序 | 第21-22页 |
| 2.2.5 IPA软件分析Robo2信号网络 | 第22页 |
| 2.2.6 实时定量RT-PCR检测 | 第22-24页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-30页 |
| 2.3.1 RNA-Seq测序结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 IPA数据分析 | 第25-27页 |
| 2.3.3 RT-PCR验证结果 | 第27-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 小鼠肾脏发育过程中与Robo2相互作用的蛋白 | 第32-43页 |
| 3.1 实验材料、主要试剂和仪器设备 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第32页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 3.1.4 其他 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 免疫共沉淀 | 第33-34页 |
| 3.2.2 SDS-PAGE(聚丙烯酰胺)凝胶电泳分离蛋白 | 第34-35页 |
| 3.2.3 银染及脱色 | 第35-36页 |
| 3.2.4 胶内酶解 | 第36-37页 |
| 3.2.5 2D-LC/MS检测 | 第37页 |
| 3.2.6 生物信息学分析 | 第37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 与Robo2相互作用的蛋白质 | 第37-38页 |
| 3.3.2 蛋白质的功能分析 | 第38-41页 |
| 3.3.2.1 String9.05软件分析蛋白质 | 第38-40页 |
| 3.3.2.2 IPA软件分析蛋白质 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 第4章 小鼠胚肾发育过程Robo2与Aldh1a2的相互关系 | 第43-65页 |
| 4.1 实验材料、主要试剂和仪器设备 | 第43-45页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第43页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第43-44页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 4.1.4 其他 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 4.2.1 构建视黄酸过量孕鼠模型 | 第45页 |
| 4.2.2 冰冻组织留取及冰冻切片免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| 4.2.3 石蜡组织留取及石蜡HE染色 | 第46页 |
| 4.2.4 Wtem Blot检测蛋白表达 | 第46-48页 |
| 4.2.5 胚肾体外培养及免疫荧光染色 | 第48页 |
| 4.2.6 统计学处理 | 第48页 |
| 4.3 实验结果 | 第48-61页 |
| 4.3.1 Robo2与Aldh1a2在胚肾的免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 4.3.2 Aldh1a2在小鼠胚肾发育各阶段蛋白表达情况 | 第49-50页 |
| 4.3.3 Aldh1a2在小鼠胚肾发育各阶段免疫荧光染色结果 | 第50-57页 |
| 4.3.4 孕鼠喂食视黄酸后胚肾和输尿管发育异常 | 第57-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-63页 |
| 4.5 小结 | 第63-65页 |
| 第5章 全文总结 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录实验所需主要试剂配制 | 第70-72页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第72-73页 |
| 综述 | 第73-85页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
