| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-29页 |
| 1.1 肺癌 | 第18-22页 |
| 1.1.1 环境因素对肺癌的影响 | 第18-21页 |
| 1.1.1.1 吸烟和肺癌的关系 | 第18页 |
| 1.1.1.2 二手烟和肺癌的关系 | 第18-19页 |
| 1.1.1.3 室内污染和肺癌的关系 | 第19-20页 |
| 1.1.1.4 户外空气污染和肺癌的关系 | 第20页 |
| 1.1.1.5 饮食和肺癌的关系 | 第20-21页 |
| 1.1.1.6 感染和肺癌的关系 | 第21页 |
| 1.1.2 肺癌的检查方法 | 第21-22页 |
| 1.2 热休克蛋白在发育及应激之间的作用 | 第22-27页 |
| 1.2.1 哺乳动物的热休克因子家族 | 第22-23页 |
| 1.2.2 HSF1与HSF2功能的相互作用 | 第23-25页 |
| 1.2.3 HSF1参与免疫反应 | 第25页 |
| 1.2.4 HSFs是机体发育的调节者 | 第25-27页 |
| 1.2.4.1 HSF1:母系因子 | 第25页 |
| 1.2.4.2 HSF1和HSF4在感觉器中的相互作用 | 第25-26页 |
| 1.2.4.3 HSFs参与大脑发育 | 第26-27页 |
| 1.2.4.4 HSFs参与精子的形成 | 第27页 |
| 1.3 本论文的研究目的、意义和方案 | 第27-29页 |
| 第二章 HSF2和肺癌的关系 | 第29-63页 |
| 2.1 材料和方法 | 第29-44页 |
| 2.1.1 临床样本的收集 | 第29页 |
| 2.1.2 TCGA数据库数据的下载和整理 | 第29-30页 |
| 2.1.3 细胞的培养 | 第30-33页 |
| 2.1.3.1 细胞复苏 | 第31页 |
| 2.1.3.2 细胞传代 | 第31页 |
| 2.1.3.3 细胞冻存 | 第31-32页 |
| 2.1.3.4 细胞收集 | 第32页 |
| 2.1.3.5 支原体检测 | 第32-33页 |
| 2.1.4 细胞实验 | 第33-36页 |
| 2.1.4.1 实验细胞分组 | 第33-34页 |
| 2.1.4.2 质粒转染 | 第34-35页 |
| 2.1.4.3 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测细胞活性 | 第35页 |
| 2.1.4.4 划痕实验 | 第35-36页 |
| 2.1.4.7 transwell实验 | 第36页 |
| 2.1.5 实时荧光定量PCR | 第36-39页 |
| 2.1.5.1 组织RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.1.5.2 RNA逆转录成1st-Strand cDNA | 第37-38页 |
| 2.1.5.3 实时荧光定量PCR( RT-PCR)检测mRNA水平 | 第38-39页 |
| 2.1.6 Western Blot | 第39-44页 |
| 2.1.6.1 蛋白样品的预处理和定量 | 第39-40页 |
| 2.1.6.2 聚丙烯酰胺胶的制备 | 第40-42页 |
| 2.1.6.3 SDS-PAGE | 第42页 |
| 2.1.6.4 转膜 | 第42-43页 |
| 2.1.6.5 封闭和抗体的孵育 | 第43页 |
| 2.1.6.6 显影 | 第43-44页 |
| 2.1.7 数据统计 | 第44页 |
| 2.2 实验仪器 | 第44-45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-59页 |
| 2.3.1 HSF2表达和临床上肺癌的关系 | 第45-52页 |
| 2.3.1.1 临床样本基本信息 | 第45-47页 |
| 2.3.1.2 HSF2表达和临床上患肺癌的关联性分析 | 第47页 |
| 2.3.1.3 HSF2表达和临床上肺癌病理特征的关联性分析 | 第47-49页 |
| 2.3.1.4 TCGA中HSF2表达和肺癌的关联性分析 | 第49-52页 |
| 2.3.2 HSF2表达和肺细胞增值、迁移的关系 | 第52-59页 |
| 2.3.2.1 HSF2表达和肺细胞增值的关系 | 第52-54页 |
| 2.3.2.2 HSF2表达和肺细胞迁移的关系 | 第54-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-63页 |
| 第三章 HSF2促肺癌机制的研究 | 第63-96页 |
| 3.1 材料和方法 | 第63-78页 |
| 3.1.1 细胞的培养 | 第63-66页 |
| 3.1.1.1 细胞复苏 | 第63-64页 |
| 3.1.1.2 细胞传代 | 第64页 |
| 3.1.1.3 细胞冻存 | 第64-65页 |
| 3.1.1.4 细胞收集 | 第65-66页 |
| 3.1.2 Western Blot | 第66-69页 |
| 3.1.2.1 总蛋白提取 | 第66页 |
| 3.1.2.2 蛋白定量 | 第66-67页 |
| 3.1.2.3 聚丙烯酰胺胶的制备 | 第67页 |
| 3.1.2.4 SDS-PAGE | 第67-68页 |
| 3.1.2.5 转膜 | 第68页 |
| 3.1.2.6 封闭和抗体孵育 | 第68-69页 |
| 3.1.2.7 显影 | 第69页 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR | 第69-72页 |
| 3.1.3.1 总RNA的提取 | 第69-70页 |
| 3.1.3.2 RNA逆转录成1st-Strand cDNA | 第70-71页 |
| 3.1.3.3 实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测mRNA水平 | 第71-72页 |
| 3.1.4 DNA甲基化 | 第72-74页 |
| 3.1.4.1 细胞DNA的提取 | 第72-73页 |
| 3.1.4.2 DNA的纯化 | 第73页 |
| 3.1.4.3 DNA的亚硫酸钠处理 | 第73页 |
| 3.1.4.4 MSP-PCR扩增反应 | 第73-74页 |
| 3.1.5 细胞实验 | 第74-78页 |
| 3.1.5.1 实验细胞分组 | 第74-75页 |
| 3.1.5.2 质粒转染 | 第75页 |
| 3.1.5.3 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测细胞活性 | 第75-76页 |
| 3.1.5.4 划痕实验 | 第76页 |
| 3.1.5.5 transwell实验 | 第76-77页 |
| 3.1.5.6 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡 | 第77-78页 |
| 3.1.6 TCGA数据的下载和整理 | 第78页 |
| 3.1.7 数据统计 | 第78页 |
| 3.2 实验仪器 | 第78-79页 |
| 3.3 结果与分析 | 第79-90页 |
| 3.3.1 HSF2促细胞增殖迁移依赖于HSF1的存在 | 第79-81页 |
| 3.3.2 HSF2促细胞增殖迁移依赖于HSPs的表达 | 第81-83页 |
| 3.3.3 HSF2可以维持p-Akt和抑制p-JNK的稳定性 | 第83-86页 |
| 3.3.4 HSF2启动子的甲基化水平 | 第86-90页 |
| 3.4 讨论 | 第90-96页 |
| 第四章 总结与展望 | 第96-100页 |
| 4.1 HSF2和肺癌关系的研究 | 第96-97页 |
| 4.2 HSF2促癌机制的研究 | 第97-98页 |
| 4.3 展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 附录A | 第110-111页 |
| 附录B | 第111-133页 |
