| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 GAPDH蛋白研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 GAPDH蛋白简介 | 第11页 |
| 1.1.2 GAPDH的类型 | 第11-12页 |
| 1.1.3 GAPDH蛋白功能 | 第12-14页 |
| 1.2 GAPDH蛋白活性位点研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 活性位点磷酸化修饰 | 第14页 |
| 1.2.2 活性位点氧化还原修饰 | 第14-16页 |
| 1.3 GAPDH蛋白分离纯化方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 粗分离 | 第16-17页 |
| 1.3.2 纯化 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题研究内容路线、目的和意义 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.4.2 研究路线 | 第18-19页 |
| 1.4.3 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 TaGAPC基因及其突变体TaCys154S/TaCys158S原核表达载体的构建 | 第20-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 pET-28a(+)-TaGAPC原核表达载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.2 pGEMT-easy-TaCys154S/TaCys158S克隆载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.3 pET-28a(+)-TaCys154S/TaCys158S原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 定点突变体基因TaCys154S/TaCys158S全长片段的克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.2 pGEMT-easy-TaCys154S/TaCys158S克隆载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.3 pET-28a(+)-TaGAPC/TaCys154S/TaCys158S原核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 原核表达条件优化、蛋白纯化及其活性测定 | 第32-42页 |
| 3.1 试验材料、试剂及设备 | 第32-34页 |
| 3.1.1 材料与实际 | 第32页 |
| 3.1.2 配制所需试剂 | 第32-34页 |
| 3.1.3 设备 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 融合蛋白的诱导表达条件优化 | 第34-35页 |
| 3.2.2 目的融合蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 原核表达蛋白浓度及活性测定 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 3.3.1 诱导温度的确定 | 第37页 |
| 3.3.2 蛋白表达诱导时间的确定 | 第37-38页 |
| 3.3.3 IPTG诱导浓度的确定 | 第38页 |
| 3.3.4 融合蛋白的可溶性分析 | 第38-39页 |
| 3.3.5 融合蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 3.3.6 NADH标准曲线 | 第40页 |
| 3.3.7 蛋白活性测定 | 第40-41页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 逆境胁迫下小麦叶片GAPDH活性测定 | 第42-47页 |
| 4.1 材料、试剂与设备 | 第42-43页 |
| 4.2 试验方法 | 第43-44页 |
| 4.2.1 材料处理 | 第43-44页 |
| 4.2.2 GAPDH活性测定原理 | 第44页 |
| 4.2.3 小麦叶片GAPDH活性测定 | 第44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-46页 |
| 4.3.1 外源H_2O_2对小麦叶片总GAPDH活性的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.2 外源H_2O_2对干旱胁迫下小麦叶片总GAPDH活性的影响 | 第45-46页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 结论与创新 | 第47-48页 |
| 5.1 结论 | 第47页 |
| 5.2 创新点 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
