| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 BMSCs的增殖过程及其调控 | 第14-16页 |
| 1.2 BMSCs向脂肪细胞的定向分化过程及其调控 | 第16-19页 |
| 1.3 钙离子通道及胞内Ca~(2+)信号的调控机制 | 第19-21页 |
| 1.4 Ca~(2+)信号对细胞增殖及成脂分化的影响及调控 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.3 试验用品的准备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.1.5 分子生物学试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.1.6 试验动物 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-39页 |
| 2.2.1 猪BMSCs的分离培养及传代 | 第27-28页 |
| 2.2.2 传代细胞的冷冻与复苏 | 第28-29页 |
| 2.2.3 猪BMSCs的成脂诱导过程 | 第29页 |
| 2.2.4 油红O染色 | 第29页 |
| 2.2.5 细胞内甘油三酯含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.6 细胞总蛋白的测定 | 第30页 |
| 2.2.7 细胞上清中葡萄糖含量的测定（葡萄糖氧化酶法） | 第30-31页 |
| 2.2.8 2-NBDG荧光法检测细胞葡萄糖的吸收 | 第31页 |
| 2.2.9 细胞膜与细胞浆的蛋白分离提取 | 第31-32页 |
| 2.2.10 细胞内钙离子浓度的检测 | 第32页 |
| 2.2.11 细胞增殖过程中细胞周期的检测 | 第32-33页 |
| 2.2.12 RNA抽提与荧光定量PCR检测 | 第33-37页 |
| 2.2.13 Western blot检测 | 第37-39页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-57页 |
| 3.1 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs成脂过程中钙离子通道及CaSR基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs增殖的影响及其调控机制 | 第40-45页 |
| 3.2.1 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs增殖和CaSR表达的影响 | 第40页 |
| 3.2.2 阻断电压门控钙通道（VGCC）和CaSR对猪BMSCs增殖的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.3 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs增殖过程中[Ca~(2+)]_i浓度的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.4 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs增殖过程中ERK通路蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.5 阻断ERK通路对猪BMSCs增殖的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs成脂分化的影响及其作用机制 | 第45-57页 |
| 3.3.1 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs分化聚酯的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 阻断VGCC对猪BMSCs [Ca~(2+)]_i浓度和分化聚酯的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 阻断CaSR对猪BMSCs分化聚酯的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.4 螯合[Ca~(2+)]_i对猪BMSCs的[Ca~(2+)]_i浓度和分化聚酯的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.5 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs成脂分化过程中CaMKⅡ信号通路蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.6 阻断CaMKⅡ对猪BMSCs分化聚酯的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.7 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs成脂分化过程中PI3K/Akt信号通路的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.8 阻断PI3K/Akt信号通路对猪BMSCs分化聚酯的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.9 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs成脂过程中葡萄糖吸收及GLUT4转位的影响 | 第54-57页 |
| 4 讨论与结论 | 第57-65页 |
| 4.1 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs增殖的影响及调控机制 | 第57-60页 |
| 4.2 [Ca~(2+)]_o对猪BMSCs脂肪形成的影响及调控机制 | 第60-63页 |
| 4.3 钙信号对细胞葡萄糖吸收的影响及调控机制 | 第63-64页 |
| 4.4 结论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录 | 第71页 |
