| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写表 | 第7-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-22页 |
| 1.1.1 农杆菌介导禾本科植物的遗传转化 | 第11-16页 |
| 1.1.2 抗百草枯杂草的研究 | 第16-20页 |
| 1.1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第20-22页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 1.3 研究技术路线 | 第23-24页 |
| 第2章 牛筋草遗传转化体系的建立 | 第24-48页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-35页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.2.2 农杆菌菌株及其质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.3 主要试剂及配制 | 第25-27页 |
| 2.2.4 仪器及设备 | 第27页 |
| 2.2.5 培养基及其组成 | 第27-29页 |
| 2.2.6 愈伤组织的诱导 | 第29-30页 |
| 2.2.7 继代培养 | 第30页 |
| 2.2.8 分化培养基的优化 | 第30页 |
| 2.2.9 潮霉素选择压的确定 | 第30页 |
| 2.2.10 农杆菌感受态的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.11 农杆菌的转化及鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.12 羧苄青霉素（Cn）浓度的选择 | 第32页 |
| 2.2.13 受体的准备和农杆菌侵染液的制备 | 第32页 |
| 2.2.14 牛筋草的转化 | 第32页 |
| 2.2.15 转基因丛生芽的生根及炼苗培养 | 第32-33页 |
| 2.2.16 农杆菌介导牛筋草遗传转化的优化 | 第33-34页 |
| 2.2.17 愈伤组织GUS染色 | 第34页 |
| 2.2.18 转基因植株鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.19 移栽成活 | 第35页 |
| 2.2.20 数据统计与分析 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-47页 |
| 2.3.1 种子解除休眠对诱导率的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.2 升汞浓度和消毒时间对种子灭菌效果的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.3 基本培养基的选择 | 第37-38页 |
| 2.3.4 愈伤组织结构的选择 | 第38-39页 |
| 2.3.5 2,4-D浓度对愈伤组织结构的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.6 愈伤组织的分化 | 第40-41页 |
| 2.3.7 潮霉素浓度的选择 | 第41-42页 |
| 2.3.8 农杆菌转化的检测 | 第42-43页 |
| 2.3.9 羧苄青霉素浓度的选择 | 第43页 |
| 2.3.10 单因素法优化遗传转化条件 | 第43-45页 |
| 2.3.11 牛筋草遗传转化过程及鉴定 | 第45-47页 |
| 2.4 小结 | 第47-48页 |
| 第3章 牛筋草抗百草枯的研究 | 第48-63页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-54页 |
| 3.2.1 植物材料及处理 | 第48页 |
| 3.2.2 牛筋草抗百草枯候选基因 | 第48-49页 |
| 3.2.3 主要试剂与设备 | 第49-50页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第50-53页 |
| 3.2.5 HPLC法测定内源多胺 | 第53页 |
| 3.2.6 数据处理 | 第53-54页 |
| 3.3 结果 | 第54-62页 |
| 3.3.1 抗百草枯相关基因的表达分析 | 第54-59页 |
| 3.3.2 百草枯对牛筋草内源多胺的影响 | 第59-62页 |
| 3.4 小结 | 第62-63页 |
| 第4章 讨论与结论 | 第63-71页 |
| 4.1 讨论 | 第63-69页 |
| 4.1.1 牛筋草遗传转化体系的建立 | 第63-66页 |
| 4.1.2 多胺及转运体基因在牛筋草抗百草枯中的作用 | 第66-69页 |
| 4.2 结论 | 第69-71页 |
| 4.2.1 牛筋草遗传转化体系的建立 | 第69页 |
| 4.2.2 牛筋草抗百草枯的研究 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-91页 |
| 附录A qRT-PCR扩增曲线和溶解曲线 | 第91-92页 |
| 附录B 多胺定量标准曲线 | 第92页 |