摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语及英文对照 | 第6-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 水稻杂种不育研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 水稻杂种不育概述 | 第11-12页 |
1.1.2 水稻杂种不育的主要原因 | 第12-13页 |
1.1.3 籼粳稻杂种不育F1不育的遗传机理 | 第13-14页 |
1.1.4 籼粳雄性杂种不育Sa座位的研究进展 | 第14-16页 |
1.2 胞间转移的研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 胞间连丝的概述 | 第16-17页 |
1.2.2 胞间连丝的转运机制 | 第17-20页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22-27页 |
2.1.1 供试的水稻材料 | 第22页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.5 主要溶液及试剂配方 | 第24-25页 |
2.1.6 Sounthern杂交试剂及配方 | 第25-26页 |
2.1.7 农杆菌培养基 | 第26页 |
2.1.8 水稻组织培养培养基 | 第26-27页 |
2.1.9 石蜡切片相关试剂 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-38页 |
2.2.1 DNA微量抽提 | 第27页 |
2.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第27-28页 |
2.2.3 cDNA的PCR扩增 | 第28页 |
2.2.4 PCR产物回收纯化 | 第28页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
2.2.6 DNA的连接 | 第28-29页 |
2.2.7 电击转化 | 第29页 |
2.2.8 阳性克隆的鉴定和保存 | 第29页 |
2.2.9 质粒的提取 | 第29-30页 |
2.2.10 植物转化载体的构建 | 第30页 |
2.2.11 重组质粒转化农杆菌及质粒稳定性鉴定 | 第30-31页 |
2.2.12 水稻胚性愈伤组织的诱导 | 第31-32页 |
2.2.13 农杆菌介导的遗传转化 | 第32-33页 |
2.2.14 花粉育性鉴定 | 第33页 |
2.2.15 CTAB法抽提大量提取基因组DNA | 第33-34页 |
2.2.16 Southern杂交 | 第34-35页 |
2.2.17 材料固定石蜡切片 | 第35-36页 |
2.2.18 石蜡切片脱蜡程序 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-52页 |
3.1 本研究的技术路线 | 第38-39页 |
3.2 孢间转移相关遗传载体的构建 | 第39-40页 |
3.3 农杆菌介导的遗传转化 | 第40-41页 |
3.4 转基因植株T0代转基因鉴定 | 第41-42页 |
3.5 转基因植株T0代Southern Blotting分析 | 第42-46页 |
3.6 转基因植株T0代表型鉴定分析 | 第46-48页 |
3.6.1 SaM+-FLAG转基因植株T0代表型鉴定分析 | 第46页 |
3.6.2 SaM+-FLAG/SaF+-HA转基因植株T0代表型鉴定分析 | 第46-47页 |
3.6.3 SaM--FLAG转基因植株T0代表型鉴定分析 | 第47-48页 |
3.7 利用荧光免疫组化观察三个因子的蛋白积累情况 | 第48-52页 |
3.7.1 SaM+-FLAG荧光免疫组化结果分析 | 第48-50页 |
3.7.2 SaM--FLAG荧光免疫组化结果分析 | 第50-52页 |
4 讨论与结论 | 第52-55页 |
4.1 讨论 | 第52-54页 |
4.1.1 Sa基因座两基因/三元件遗传模型 | 第52页 |
4.1.2 Sa基因座胞间转移假说 | 第52-54页 |
4.2 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |