| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 尿苷酸的生化性质及用途 | 第13-14页 |
| 1.1.1 核苷酸的分类及应用 | 第13页 |
| 1.1.2 尿苷酸的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.1.3 尿苷酸的应用 | 第14页 |
| 1.2 尿苷酸的生产方法及研究现状 | 第14-16页 |
| 1.2.1 化学合成法 | 第14页 |
| 1.2.2 水解核酸法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 微生物发酵法 | 第15-16页 |
| 1.3 尿苷酸的合成途径和代谢调节 | 第16-18页 |
| 1.3.1 尿苷酸的从头合成途径 | 第16页 |
| 1.3.2 尿苷酸合成的补救途径 | 第16-17页 |
| 1.3.3 尿苷酸的合成调节 | 第17-18页 |
| 1.4 代谢流分析（MFA） | 第18-19页 |
| 1.4.1 代谢流分析概述 | 第18页 |
| 1.4.2 基于“拟稳态”假设的代谢网络计量模型研究理论 | 第18-19页 |
| 1.4.3 代谢流分析的应用 | 第19页 |
| 1.5 研究目的与内容 | 第19-21页 |
| 第2章 酿酒酵母培养基成分及培养条件优化 | 第21-35页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.1 试验仪器 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第21-22页 |
| 2.1.3 菌株 | 第22-23页 |
| 2.1.4 初始培养基 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 比浊法测定酵母浓度 | 第23-24页 |
| 2.2.2 生长曲线的绘制 | 第24页 |
| 2.2.3 单因素优化培养基成分 | 第24页 |
| 2.2.4 响应面优化培养基成分 | 第24-25页 |
| 2.2.5 单因素优化发酵条件 | 第25页 |
| 2.3 试验结果与分析 | 第25-33页 |
| 2.3.1 初始合成培养基中生长曲线的绘制 | 第25页 |
| 2.3.2 单因素优化培养基成分结果 | 第25-28页 |
| 2.3.3 响应面优化培养基成分结果 | 第28-32页 |
| 2.3.4 单因素优化发酵条件结果 | 第32-33页 |
| 2.3.5 最优条件下酿酒酵母生长曲线绘制 | 第33页 |
| 2.4 小结 | 第33-35页 |
| 第3章 酿酒酵母重组菌产尿苷酸的实际与理想代谢流对比 | 第35-50页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.1 试验仪器 | 第35页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第35页 |
| 3.1.3 菌株与培养基 | 第35-36页 |
| 3.2 试验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 分批发酵培养 | 第36页 |
| 3.2.2 发酵液中代谢物测定 | 第36页 |
| 3.2.3 尿苷酸代谢模型构建 | 第36-39页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第39-49页 |
| 3.3.1 代谢物测定谱图及标准曲线 | 第39-42页 |
| 3.3.2 稳定期代谢物测定曲线 | 第42-45页 |
| 3.3.3 UMP生物合成理想代谢流分布 | 第45页 |
| 3.3.4 UMP生物合成实际代谢流分布 | 第45-48页 |
| 3.3.5 UMP生物合成关键节点分析 | 第48-49页 |
| 3.4 结论 | 第49-50页 |
| 第4章 不同溶氧对酿酒酵母产尿苷酸的代谢流分布的影响 | 第50-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第50页 |
| 4.1.1 试验仪器 | 第50页 |
| 4.1.2 试剂与药品 | 第50页 |
| 4.1.3 菌株与培养基 | 第50页 |
| 4.2 试验方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 代谢物的检测 | 第50页 |
| 4.2.2 尿苷酸代谢模型构建 | 第50页 |
| 4.2.3 不同溶氧条件下发酵试验 | 第50-51页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第51-59页 |
| 4.3.1 溶氧曲线的绘制 | 第51页 |
| 4.3.2 不同溶氧条件下代谢物积累/消耗速率比较 | 第51-56页 |
| 4.3.3 不同溶氧对代谢流分布的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.4 关键节点分析 | 第57-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-61页 |
| 第5章 不同葡萄糖浓度对酿酒酵母产尿苷酸的代谢流分布的影响 | 第61-70页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第61页 |
| 5.1.1 试验仪器 | 第61页 |
| 5.1.2 试剂与药品 | 第61页 |
| 5.1.3 菌株与培养基 | 第61页 |
| 5.2 试验方法 | 第61-62页 |
| 5.2.1 代谢物的检测 | 第61页 |
| 5.2.2 尿苷酸代谢模型构建 | 第61页 |
| 5.2.3 不同葡萄糖浓度条件下的发酵实验 | 第61-62页 |
| 5.3 试验结果与分析 | 第62-69页 |
| 5.3.1 生长曲线的绘制 | 第62页 |
| 5.3.2 不同葡萄糖浓度条件下代谢物积累/消耗速率比较 | 第62-67页 |
| 5.3.3 不同葡萄糖浓度对代谢流分布的影响 | 第67-69页 |
| 5.4 小结 | 第69-70页 |
| 第6章 酿酒酵母重组菌产尿苷酸的代谢调控 | 第70-86页 |
| 6.1 材料与仪器 | 第70-72页 |
| 6.1.1 试验仪器 | 第70-71页 |
| 6.1.2 菌株与质粒 | 第71页 |
| 6.1.3 试剂与工具酶 | 第71-72页 |
| 6.1.4 培养基 | 第72页 |
| 6.2 试验方法 | 第72-76页 |
| 6.2.1 甲苯、吐温80及二甲基亚砜优化试验 | 第72页 |
| 6.2.2 碘乙酸、氟化钠调控试验 | 第72页 |
| 6.2.3 6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因zwf1克隆 | 第72-73页 |
| 6.2.4 重组质粒pYES-pgk-zwf1的构建 | 第73-74页 |
| 6.2.5 重组质粒转化大肠杆菌 | 第74页 |
| 6.2.6 重组质粒转化酿酒酵母 | 第74-75页 |
| 6.2.7 G6PDH活性测定 | 第75页 |
| 6.2.8 重组菌pYX212-URA5/YPH499(ΔURA6)-zwf1尿苷酸产量测定 | 第75-76页 |
| 6.3 试验结果与分析 | 第76-84页 |
| 6.3.1 增大细胞膜通透性优化结果分析 | 第76-78页 |
| 6.3.2 糖酵解抑制剂调控结果分析 | 第78-81页 |
| 6.3.3 zwf1基因克隆 | 第81-82页 |
| 6.3.4 重组质粒构建及酶切验证 | 第82页 |
| 6.3.5 重组质粒转化酿酒酵母及阳性转化子的筛选 | 第82-83页 |
| 6.3.6 比较转化前后酿酒酵母 | 第83-84页 |
| 6.4 小结 | 第84-86页 |
| 第7章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 7.1 结论 | 第86-87页 |
| 7.2 展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-93页 |
| 附录 | 第93-95页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
