| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一部分 引言 | 第11-25页 |
| 一、哺乳动物早期胚胎神经发育简介 | 第11-12页 |
| 二、胚胎干细胞体外分化为神经细胞 | 第12-23页 |
| 1、小鼠ESCs自发分化为神经细胞 | 第13-15页 |
| 2、化合物诱导ESCs分化为神经细胞 | 第15-16页 |
| 3、ESCs分化细胞的筛选 | 第16-19页 |
| 3.1、使用选择性生长培养基富集神经前体细胞 | 第17页 |
| 3.2、运用基因工程技术富集神经前体细胞 | 第17-19页 |
| 4、利用神经调节基因诱导ESCs向神经方向分化 | 第19-20页 |
| 5、使用诱导因子诱导ESCs分化为神经细胞 | 第20-23页 |
| 5.1、源自基质细胞的神经分化诱导因子 | 第20-22页 |
| 5.2、源自星形胶质细胞的神经分化诱导因子 | 第22页 |
| 5.3、源自肝癌细胞系HepG2的神经分化诱导因子 | 第22-23页 |
| 三、总结 | 第23-25页 |
| 第二部分 实验部分 | 第25-53页 |
| 一、实验材料 | 第25-26页 |
| 1、实验动物 | 第25页 |
| 2、细胞系 | 第25页 |
| 3、实验试剂 | 第25-26页 |
| 4、实验耗材 | 第26页 |
| 5、实验仪器 | 第26页 |
| 二、实验方法 | 第26-35页 |
| 1、制备小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs） | 第26-27页 |
| 2、制备饲养层细胞 | 第27页 |
| 3、R1细胞系的培养 | 第27-29页 |
| 4、R1细胞系神经诱导 | 第29-32页 |
| 4.1、悬浮法神经诱导 | 第29-30页 |
| 4.2、悬滴法神经诱导 | 第30-31页 |
| 4.3、单层细胞神经诱导 | 第31-32页 |
| 5、免疫荧光实验 | 第32页 |
| 6、抽提RNA并制备cDNA | 第32-33页 |
| 7、RT-PCR | 第33-34页 |
| 8、QPCR | 第34-35页 |
| 9、统计分析 | 第35页 |
| 三、实验结果 | 第35-51页 |
| 1、R1细胞系的培养与全能性鉴定 | 第35-37页 |
| 1.1、R1细胞的培养 | 第35-36页 |
| 1.2、R1细胞的多能性鉴定 | 第36-37页 |
| 2、R1细胞神经诱导分化 | 第37-51页 |
| 2.1、EBs直径的大小对于神经诱导效率的影响 | 第37-44页 |
| 2.2、EBs的密度对于神经诱导效率的影响 | 第44-51页 |
| 四、实验结论及讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |