| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 多蛋白桥梁因子MBF1的研究现状 | 第9-11页 |
| 1.2 进化保守的 1433 蛋白 | 第11-14页 |
| 1.3 GST-pull down技术简介 | 第14-15页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第16页 |
| 2.1.2 数据库和生物软件 | 第16页 |
| 2.1.3 实验中所用培养基 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 GST-yMBF1、GST-BMH1重组表达载体的重新构建与表达 | 第17-18页 |
| 2.2.2 GST-BMH2在酿酒酵母S288c中的表达 | 第18-19页 |
| 2.2.3 GST-BMH2、GST-MBF1的GST-pull down | 第19-20页 |
| 2.2.4 液质联用质谱LC-MS | 第20-21页 |
| 2.2.5 bmh2(-)、mbf1(-)酵母菌株的鉴定 | 第21-23页 |
| 2.2.6 滴板胁迫实验 | 第23页 |
| 2.2.7 yMBF1单克隆抗体的制备和BMH2抗体的纯化 | 第23-26页 |
| 第三章 结果 | 第26-59页 |
| 3.1 GST-BMH2、GST-yMBF1重组载体的构建 | 第26-27页 |
| 3.2 yMBF1、BMH2的GST-pull down | 第27-28页 |
| 3.3 Pull down 分离鉴定与 BMH2、y MBF1 相互作用的蛋白 | 第28-31页 |
| 3.4 酵母S288c中与yMBF1、BMH2共同作用的蛋白 | 第31-32页 |
| 3.5 胁迫实验 | 第32-35页 |
| 3.6 yMBF1抗体的制备及BMH2抗体的纯化 | 第35-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-70页 |
| 4.1 利用GST-pull down技术对BMH2、y MBF1进行相互作用研究 | 第59页 |
| 4.2 多蛋白桥梁因子yMBF1参与了细胞的多个过程 | 第59-62页 |
| 4.2.1 yMBF1参与了酵母多个过程的转录起始调控 | 第59-60页 |
| 4.2.2 yMBF1可能参与乙酰化修饰影响转录调控 | 第60-61页 |
| 4.2.3 yMBF1参与了细胞的氧化应激或者胁迫应答 | 第61-62页 |
| 4.2.4 yMBF1参与了酵母的细胞周期调控 | 第62页 |
| 4.3 酵母 1433 蛋白BMH2参与了细胞的各个过程 | 第62-65页 |
| 4.3.1 BMH2参与转录水平的调控 | 第63页 |
| 4.3.2 BMH2与细胞抗逆和氧化应激有关 | 第63页 |
| 4.3.3 BMH2参与了酵母的生长、糖代谢调控 | 第63-65页 |
| 4.3.4 BMH2与孢子的形成有关 | 第65页 |
| 4.4 BMH2与yMBF1存在相关性 | 第65-68页 |
| 4.4.1 BMH2与yMBF1在体外存在相互作用 | 第65-66页 |
| 4.4.2 yMBF1和BMH2共同作用的蛋白 | 第66页 |
| 4.4.3 yMBF1和BMH2在热胁迫调控中表现出相互制约的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.4 yMBF1和BMH2均参与Cu~(2+)胁迫应答 | 第67页 |
| 4.4.5 BMH1和BMH2在胁迫调控中有差异 | 第67-68页 |
| 4.5 yMBF1抗体的制备和BMH2抗体的纯化 | 第68-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-84页 |
| 附录 | 第84-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
