中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-29页 |
1.1 水稻突变体库创建背景 | 第11页 |
1.2 突变体库的主要创建方法 | 第11-14页 |
1.2.1 自发突变 | 第11-12页 |
1.2.2 理化诱变 | 第12页 |
1.2.3 插入突变 | 第12-14页 |
1.2.4 基因沉默 | 第14页 |
1.3 AC/DS转座元件 | 第14-18页 |
1.3.1 Ac/Ds转座元件的结构特点 | 第14-15页 |
1.3.2 Ac/Ds转座机制 | 第15-16页 |
1.3.3 Ac/Ds元件的转座行为 | 第16-17页 |
1.3.4 Ac/Ds转座系统在水稻上的应用与改进 | 第17-18页 |
1.4 克隆插入位点侧翼序列的主要方法 | 第18-20页 |
1.4.1 反向PCR | 第18页 |
1.4.2 连接-接头PCR | 第18页 |
1.4.3 热不对称性交错PCR | 第18-20页 |
1.5 应用于分离克隆水稻基因的主要方法 | 第20-25页 |
1.5.1 图位克隆法 | 第20页 |
1.5.2 显示差异表达的基因克隆方法 | 第20页 |
1.5.3 基于RACE技术的序列克隆法 | 第20-25页 |
1.6 水稻叶绿素缺陷突变体的研究进展 | 第25-28页 |
1.6.1 叶绿素缺陷突变体的突变机制 | 第25-27页 |
1.6.2 水稻稃片颜色突变体的研究进展 | 第27-28页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
第二章DS插入水稻稃片白化突变体侧翼序列的扩增及相关标记基因的生物信息学分析 | 第29-48页 |
2.1 材料 | 第29页 |
2.2 方法 | 第29-36页 |
2.2.1 突变体水稻的筛选 | 第29-30页 |
2.2.2 提取水稻基因组DNA | 第30-31页 |
2.2.3 引物的设计 | 第31-32页 |
2.2.4 PCR检测Ac/Ds在水稻基因组上的插入 | 第32页 |
2.2.5 Ds插入位点侧翼序列的扩增 | 第32-34页 |
2.2.6 Ds插入位点侧翼序列的TA克隆及测序 | 第34-36页 |
2.2.7 Ds相关标记基因的初步生物信息学分析 | 第36页 |
2.2.8 Ds切离后残留足迹序列的获取及测定 | 第36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-44页 |
2.3.1 稃片白化突变体水稻的表型特征 | 第36-37页 |
2.3.2 稃片白化突变体基因组上Ac/Ds的插入 | 第37-38页 |
2.3.3 稃片白化突变体上Ds插入位点旁侧序列的扩增 | 第38-39页 |
2.3.4 Ds在突变体上相关标记基因的初步生物信息学分析 | 第39-43页 |
2.3.5 稃片白化突变体的Ds切离足迹 | 第43-44页 |
2.4 讨论 | 第44-48页 |
第三章 生物信息学初步分析DS插入后引起的水稻稃片白化突变体相关标记基因结构变化 | 第48-62页 |
3.1 材料 | 第48页 |
3.2 方法 | 第48-53页 |
3.2.1 水稻总RNA的提取 | 第48-49页 |
3.2.2 总RNA反转录成cDNA | 第49-50页 |
3.2.3 总RNA反转录成的cDNA的质量检测 | 第50页 |
3.2.4 RACE引物的设计 | 第50-51页 |
3.2.5 RACE技术扩增水稻相关标记基因cDNA3′端 | 第51-53页 |
3.2.6 目标片段的TA克隆及序列测定 | 第53页 |
3.2.7 相关标记基因cDNA序列的初步生物信息学分析 | 第53页 |
3.3 结果与分析 | 第53-59页 |
3.3.1 总RNA反转录成的cDNA的质量检测 | 第53-54页 |
3.3.2 Ds标记基因cDNA末端序列的特异性 | 第54-56页 |
3.3.3 相关Ds标记基因的cDNA序列初步生物信息学分析 | 第56-59页 |
3.4 讨论 | 第59-62页 |
第四章 小结与展望 | 第62-64页 |
4.1 全文小结 | 第62-63页 |
4.2 创新点 | 第63页 |
4.3 后续试验计划 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-75页 |
攻读学位期间本人公开发表或待发表的论著、论文 | 第75-76页 |
附录 | 第76-83页 |
致谢 | 第83-84页 |