摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
·APOAV 的介绍及其研究进展 | 第9-19页 |
·ApoAV 的发现及其结构 | 第9-13页 |
·ApoAV 的功能和ApoAV 基因多态性 | 第13-18页 |
·ApoAV 的研究进展 | 第18-19页 |
·本论文研究的目的、主要内容和意义 | 第19-20页 |
第二章 重组质粒PSJ5-APOAV 和PPSUMO-APOAV 的构建 | 第20-35页 |
·材料 | 第20-22页 |
·培养基与抗生素 | 第20页 |
·菌种及载体 | 第20-21页 |
·试剂及试剂盒 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·主要试剂的配制 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-31页 |
·实验基本方法 | 第22-25页 |
·目的基因制备 | 第25-26页 |
·pSJ5-ApoAV 和ppSUMO-ApoAV 表达质粒的构建和鉴定 | 第26-31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·带酶切位点的 ApoAV 基因 PCR 扩增反应 | 第31页 |
·载体DNA 的限制性酶切 | 第31-32页 |
·重组质粒pSJ5-ApoAV 和ppSUMO-ApoAV 的鉴定 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·PCR 操作 | 第33-34页 |
·载体的选择 | 第34页 |
·本章小结 | 第34-35页 |
第三章 TRXA-APOAV 和 SUMO-APOAV 蛋白的表达 | 第35-49页 |
·材料 | 第35-37页 |
·培养基与抗生素 | 第35页 |
·质粒和宿主菌 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
·主要试剂配制 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-41页 |
·基本实验方法 | 第37页 |
·Rosetta (DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达 | 第37-39页 |
·BL21(DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达 | 第39-40页 |
·BL21(DE3)作为宿主的SUMO-ApoAV 的表达 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-47页 |
·Rosetta (DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达结果 | 第41-44页 |
·BL21(DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达结果 | 第44-45页 |
·BL21(DE3)作为宿主的SUMO-ApoAV 的表达结果 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·蛋白可溶表达策略 | 第47-48页 |
·破菌液的选择 | 第48页 |
·本章小结 | 第48-49页 |
第四章 APOAV 蛋白的纯化和表征 | 第49-66页 |
·材料 | 第49-50页 |
·菌体 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49-50页 |
·主要仪器设备 | 第50页 |
·主要试剂的配制 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-54页 |
·Rosetta(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化 | 第50-52页 |
·BL21(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化 | 第52-53页 |
·BL21(DE3)为宿主的SUMO-ApoAV 的纯化 | 第53-54页 |
·ApoAV 蛋白的圆二色谱分析 | 第54页 |
·结果 | 第54-64页 |
·Rosetta(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化结果 | 第54-59页 |
·BL21(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化结果 | 第59-60页 |
·BL21(DE3)为宿主的SUMO-ApoAV 的纯化结果 | 第60-62页 |
·ApoAV 蛋白的圆二色谱分析 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
·蛋白纯化策略选择 | 第64-65页 |
·纯化过程中溶液的选择 | 第65页 |
·本章小结 | 第65-66页 |
结论与展望 | 第66-68页 |
1. 结论 | 第66-67页 |
2. 创新点 | 第67页 |
3. 展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
缩略词对照表 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
附件 | 第76页 |