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人载脂蛋白AV的克隆、表达、纯化及蛋白分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 绪论第9-20页
   ·APOAV 的介绍及其研究进展第9-19页
     ·ApoAV 的发现及其结构第9-13页
     ·ApoAV 的功能和ApoAV 基因多态性第13-18页
     ·ApoAV 的研究进展第18-19页
   ·本论文研究的目的、主要内容和意义第19-20页
第二章 重组质粒PSJ5-APOAV 和PPSUMO-APOAV 的构建第20-35页
   ·材料第20-22页
     ·培养基与抗生素第20页
     ·菌种及载体第20-21页
     ·试剂及试剂盒第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·主要试剂的配制第22页
   ·实验方法第22-31页
     ·实验基本方法第22-25页
     ·目的基因制备第25-26页
     ·pSJ5-ApoAV 和ppSUMO-ApoAV 表达质粒的构建和鉴定第26-31页
   ·结果第31-33页
     ·带酶切位点的 ApoAV 基因 PCR 扩增反应第31页
     ·载体DNA 的限制性酶切第31-32页
     ·重组质粒pSJ5-ApoAV 和ppSUMO-ApoAV 的鉴定第32-33页
   ·讨论第33-34页
     ·PCR 操作第33-34页
     ·载体的选择第34页
   ·本章小结第34-35页
第三章 TRXA-APOAV 和 SUMO-APOAV 蛋白的表达第35-49页
   ·材料第35-37页
     ·培养基与抗生素第35页
     ·质粒和宿主菌第35页
     ·主要试剂第35-36页
     ·主要仪器第36页
     ·主要试剂配制第36-37页
   ·实验方法第37-41页
     ·基本实验方法第37页
     ·Rosetta (DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达第37-39页
     ·BL21(DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达第39-40页
     ·BL21(DE3)作为宿主的SUMO-ApoAV 的表达第40-41页
   ·结果第41-47页
     ·Rosetta (DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达结果第41-44页
     ·BL21(DE3)作为宿主的TrxA-ApoAV 的表达结果第44-45页
     ·BL21(DE3)作为宿主的SUMO-ApoAV 的表达结果第45-47页
   ·讨论第47-48页
     ·蛋白可溶表达策略第47-48页
     ·破菌液的选择第48页
   ·本章小结第48-49页
第四章 APOAV 蛋白的纯化和表征第49-66页
   ·材料第49-50页
     ·菌体第49页
     ·主要试剂第49-50页
     ·主要仪器设备第50页
     ·主要试剂的配制第50页
   ·实验方法第50-54页
     ·Rosetta(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化第50-52页
     ·BL21(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化第52-53页
     ·BL21(DE3)为宿主的SUMO-ApoAV 的纯化第53-54页
     ·ApoAV 蛋白的圆二色谱分析第54页
   ·结果第54-64页
     ·Rosetta(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化结果第54-59页
     ·BL21(DE3)为宿主的TrxA-ApoAV 的纯化结果第59-60页
     ·BL21(DE3)为宿主的SUMO-ApoAV 的纯化结果第60-62页
     ·ApoAV 蛋白的圆二色谱分析第62-64页
   ·讨论第64-65页
     ·蛋白纯化策略选择第64-65页
     ·纯化过程中溶液的选择第65页
   ·本章小结第65-66页
结论与展望第66-68页
 1. 结论第66-67页
 2. 创新点第67页
 3. 展望第67-68页
参考文献第68-73页
缩略词对照表第73-74页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第74-75页
致谢第75-76页
附件第76页

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