| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第11-33页 |
| 1.1 干细胞的研究和应用 | 第12-15页 |
| 1.1.1 干细胞的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.2 胚胎干细胞 | 第13-14页 |
| 1.1.3 胚胎干细胞研究的重要性 | 第14-15页 |
| 1.2 基底硬度对干细胞的影响 | 第15-21页 |
| 1.2.1 基底硬度影响干细胞的生长和分化 | 第17-20页 |
| 1.2.2 基底硬度影响肝细胞的生长 | 第20-21页 |
| 1.3 基底微拓扑结构对干细胞的影响 | 第21-24页 |
| 1.3.1 基底微拓扑结构对干细胞生长分化影响 | 第21-23页 |
| 1.3.2 基底微拓扑结构对肝细胞生长分化影响 | 第23-24页 |
| 1.4 胚胎干细胞肝向分化意义 | 第24-26页 |
| 1.4.1 肝的重要功能 | 第24-25页 |
| 1.4.2 人胚胎干细胞肝向分化研究 | 第25-26页 |
| 1.5 基底硬度耦合拓扑结构影响胚胎干细胞肝向分化 | 第26-27页 |
| 1.6 基因转染对干细胞的影响 | 第27-29页 |
| 1.7.本文研究的意义和主要内容 | 第29-31页 |
| 1.7.1 研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.7.2 本文研究的主要内容 | 第30-31页 |
| 1.8 课题特色及创新性 | 第31页 |
| 1.9 研究路线 | 第31-33页 |
| 2 硬度和拓扑结构耦合基底对胚胎干细胞生长和肝向分化的影响 | 第33-73页 |
| 2.1 引言 | 第33-35页 |
| 2.2 实验部分 | 第35-46页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器 | 第35-37页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第37-38页 |
| 2.2.4 hESCs培养传代及冻存 | 第38页 |
| 2.2.5 条件培养基提取 | 第38页 |
| 2.2.6 微拓扑基底模板的设计和制作 | 第38-40页 |
| 2.2.7 聚丙烯酰胺水凝胶微模式基底的制作和预处理 | 第40-41页 |
| 2.2.8 聚丙烯酰胺水凝胶微模式基底上hESCs细胞接种 | 第41页 |
| 2.2.9 硬度和拓扑耦合基底上hESCs生长和分化的形态学观察 | 第41-42页 |
| 2.2.10 免疫荧光 | 第42-43页 |
| 2.2.11 Q-PCR | 第43-45页 |
| 2.2.12 白蛋白（Albumin） ELISA | 第45-46页 |
| 2.2.13 糖原合成 | 第46页 |
| 2.2.14 吲哚氰绿（ICG）吞噬 | 第46页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第46页 |
| 2.3 研究结果 | 第46-67页 |
| 2.3.1 硬度和拓扑耦合基底形貌 | 第46-48页 |
| 2.3.2 硬度和拓扑耦合基底上hESCs形态变化 | 第48-50页 |
| 2.3.3 硬度和拓扑耦合基底上hESCs干性维持 | 第50-52页 |
| 2.3.4 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为确定内胚层细胞形态 | 第52-53页 |
| 2.3.5 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为确定内胚层细胞marker表达 | 第53-57页 |
| 2.3.6 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为类肝细胞的形态 | 第57-58页 |
| 2.3.7 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为类肝细胞marker表达 | 第58-63页 |
| 2.3.8 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为类肝细胞白蛋白分泌 | 第63-64页 |
| 2.3.9 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为类肝细胞糖原合成 | 第64-66页 |
| 2.3.10 硬度和拓扑耦合基底上hESCs分化为类肝细胞ICG吞噬 | 第66-67页 |
| 2.4 讨论 | 第67-70页 |
| 2.4.1 本文工作创新点 | 第67页 |
| 2.4.2 硬度耦合拓扑结构对hESCs生长影响 | 第67-68页 |
| 2.4.3 硬度耦合拓扑结构对hESCs确定内胚层分化影响 | 第68-69页 |
| 2.4.4 硬度耦合拓扑结构对hESCs肝向分化影响 | 第69-70页 |
| 2.5 结论 | 第70-73页 |
| 3 Dendrimer纳米粒子对胚胎干细胞转染和生长影响 | 第73-93页 |
| 3.1 引言 | 第73-74页 |
| 3.2 实验部分 | 第74-80页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第74-75页 |
| 3.2.2 主要试剂和仪器 | 第75-76页 |
| 3.2.3 胚胎干细胞培养 | 第76页 |
| 3.2.4 粒径和zeta电荷 | 第76页 |
| 3.2.5 质粒提取 | 第76-78页 |
| 3.2.6 转染 | 第78页 |
| 3.2.7 CCK8实验 | 第78页 |
| 3.2.8 Dendrimer-FITC制备和hESCs动态吞噬 | 第78-79页 |
| 3.2.9 Q-PCR | 第79页 |
| 3.2.10 免疫荧光检测 | 第79-80页 |
| 3.3 研究结果 | 第80-89页 |
| 3.3.1 Dendrimer粒径和zeta电位 | 第80页 |
| 3.3.2 Dendrimer转染hESCs | 第80-81页 |
| 3.3.3 Dendrimers对hESCs的毒性研究 | 第81-84页 |
| 3.3.4 Dendrimer-FITC动态吞噬 | 第84页 |
| 3.3.5 Dendrimer对hESCs干性维持和分化的影响 | 第84-89页 |
| 3.4 讨论 | 第89-91页 |
| 3.4.1 本文工作创新点 | 第89-90页 |
| 3.4.2 讨论 | 第90-91页 |
| 3.5 结论 | 第91-93页 |
| 4 主要结论及后续建议 | 第93-95页 |
| 4.1 本文的主要结论 | 第93页 |
| 4.2 后续工作建议 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-119页 |
| 附录 | 第119页 |
| A. 作者攻读博士学位期间已发表和拟发表的文章 | 第119页 |
| B. 作者攻读博士学位期间申请专利 | 第119页 |
| C. 作者攻读博士学位期间参加的科研项目 | 第119页 |
