| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 苏云金芽胞杆菌简介及其在生物防治上的应用 | 第12-13页 |
| 2 杀虫晶体蛋白（ICPs）的分类和命名 | 第13-14页 |
| 3 杀虫晶体蛋白（ICPs）的形成机制 | 第14-17页 |
| 3.1 转录水平调控机制 | 第15页 |
| 3.2 转录后水平调控机制 | 第15-16页 |
| 3.3 翻译后水平调控机制 | 第16-17页 |
| 4 杀虫晶体蛋白（ICPs）的结构及作用机制 | 第17-19页 |
| 4.1 杀虫晶体蛋白的结构特征 | 第17-18页 |
| 4.2 杀虫晶体蛋白的作用机制 | 第18-19页 |
| 5 杀虫晶体蛋白（ICPs）N-端和C-端结构和功能研究 | 第19-20页 |
| 5.1 杀虫晶体蛋白（ICPs）N端结构和功能研究 | 第19-20页 |
| 5.2 杀虫晶体蛋白（ICPs）C端结构和功能研究 | 第20页 |
| 6 利用定点突变技术构建突变蛋白的研究 | 第20-21页 |
| 7 立题依据和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-34页 |
| 1 材料 | 第22-27页 |
| 1.1 菌株及质粒 | 第22页 |
| 1.2 培养基 | 第22页 |
| 1.3 抗生素及其使用终浓度 | 第22-23页 |
| 1.4 DNA引物合成及测序 | 第23-24页 |
| 1.5 分子生物学试剂及生化试剂 | 第24-26页 |
| 1.6 仪器设备 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-34页 |
| 2.1 菌株培养条件及保藏方法 | 第27页 |
| 2.2 PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.3 酶切反应 | 第28页 |
| 2.4 连接反应 | 第28页 |
| 2.5 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28页 |
| 2.6 大肠杆菌的DNA转化 | 第28-29页 |
| 2.7 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第29页 |
| 2.8 Bt基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.9 pGEM11Ba克隆载体的构建 | 第30页 |
| 2.10 pSTAB11Ba表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.11 PCR介导靶位点的突变 | 第31页 |
| 2.12突变型pSTAB11Ba表达载体的构建 | 第31页 |
| 2.13 pSTAB11Ba和突变型pSTAB11Ba电转入Bt4Q7中 | 第31-32页 |
| 2.14 Bt/pSTAB11Ba菌落PCR鉴定 | 第32页 |
| 2.15 Bt工程菌株镜检、发酵培养及伴胞晶体的提纯 | 第32页 |
| 2.16 Bt工程菌株发酵产物的SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
| 2.17 Bt工程菌株杀虫晶体蛋白的溶解性分析 | 第33页 |
| 2.18 Bt工程菌株杀虫晶体蛋白的胰酶稳定性分析 | 第33页 |
| 2.19重组蛋白的生物活性测定 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-52页 |
| 1 Cry11Aa与Cry11Ba氨基酸序列比较和突变位点的确定 | 第34-36页 |
| 1.1 Cry11Aa与Cry11Ba氨基酸序列比较 | 第34-35页 |
| 1.2 Cry11Ba二硫键的预测以及C-端突变位点的确定 | 第35页 |
| 1.3 Cry11Ba三维模型的建立和N-端突变位点的确定 | 第35-36页 |
| 2 野生型 4Q7/pSTAB11Ba菌株的构建 | 第36-38页 |
| 2.1 pGEM11Ba克隆载体的构建 | 第36页 |
| 2.2 pSTAB11Ba表达载体的构建 | 第36页 |
| 2.3 pSTAB11Ba表达载体电转化Bt4Q7 | 第36-38页 |
| 3 碱基的突变和突变工程菌的构建 | 第38-44页 |
| 3.1 碱基的成功突变及突变型pGEM11Ba克隆载体的构建 | 第38-42页 |
| 3.2 突变型pSTAB11Ba表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.3 突变型pSTAB11Ba表达载体电转化Bt4Q7 | 第43-44页 |
| 4 突变工程菌的形态学观察分析 | 第44-45页 |
| 4.1 Cry11Ba C-端叠加突变工程菌株的相差显微镜观察 | 第44页 |
| 4.2 Cry11Ba N-端单点突变工程菌株的相差显微镜观察 | 第44-45页 |
| 5 Cry11Ba突变工程菌表达的Cry11Ba的SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
| 5.1 C-端叠加突变工程菌表达的Cry11Ba的SDS-PAGE分析 | 第45页 |
| 5.2 N-端单点突变工程菌表达的Cry11Ba的SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
| 6 突变工程菌表达的Cry11Ba的溶解性分析 | 第46-48页 |
| 6.1 C-端突变工程菌表达的Cry11Ba的溶解性分析 | 第46-47页 |
| 6.2 N-端突变工程菌表达的Cry11Ba的溶解性分析 | 第47-48页 |
| 7 突变工程菌表达的Cry11Ba的胰酶稳定性分析 | 第48-50页 |
| 7.1 C-端突变工程菌表达的Cry11Ba的胰酶稳定性分析 | 第48-49页 |
| 7.2 N-端突变工程菌表达的Cry11Ba的胰酶稳定性分析 | 第49-50页 |
| 8 突变工程菌株表达的Cry11Ba的生物活性测定 | 第50-52页 |
| 8.1 C-端突变工程菌表达的Cry11Ba的生物活性测定 | 第50页 |
| 8.2 N-端突变工程菌表达的Cry11Ba的生物活性测定 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 1 Cry11Ba C-端结构和功能的研究 | 第52-53页 |
| 2 Cry11Ba N-端结构和功能的研究 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 缩略表（中英文对照） | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间撰写和发表的论文 | 第65-66页 |
| 课题受资助的基金项目 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
