中文摘要 | 第6-9页 |
abstract | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第15-27页 |
1.1 基因转染与基因治疗 | 第15-18页 |
1.1.1 基因转染定义 | 第15页 |
1.1.2 基因治疗与现状 | 第15-16页 |
1.1.3 基因转染的方法 | 第16-18页 |
1.2 阳离子高分子基因载体 | 第18-20页 |
1.2.1 阳离子高分子基因载体种类 | 第18-19页 |
1.2.2 基因转染过程与影响因素 | 第19-20页 |
1.3 树形高分子基因载体 | 第20-24页 |
1.3.1 树形高分子概述 | 第20-21页 |
1.3.2 树形高分子在基因转染中的应用 | 第21-24页 |
1.4 论文的研究思路与研究内容 | 第24-27页 |
第二章 系统研究20种天然氨基酸修饰的树形高分子在基因转染中的构效关系 | 第27-53页 |
2.1 引言 | 第27-28页 |
2.2 试验原料与方法 | 第28-34页 |
2.2.1 试验材料 | 第28-29页 |
2.2.2 合成20种天然氨基酸修饰的G5 PAMAM | 第29-31页 |
2.2.3 一维核磁共振技术表征各种氨基酸修饰的G5 PAMAM | 第31页 |
2.2.4 转染复合物的制备 | 第31页 |
2.2.5 粒径和表面电势分析 | 第31-32页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
2.2.7 细胞培养和基因转染 | 第32-33页 |
2.2.8 细胞摄入 | 第33页 |
2.2.9 内涵体逃逸试验 | 第33页 |
2.2.10 细胞毒性试验 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-51页 |
2.3.1 合成与表征20种天然氨基酸修饰的G5 PAMAM | 第34-37页 |
2.3.2 基因转染 | 第37-40页 |
2.3.3 阳离子氨基酸对树形高分子基因转染的影响 | 第40-44页 |
2.3.4 阴离子氨基酸对树形高分子基因转染的影响 | 第44页 |
2.3.5 疏水性氨基酸对树形高分子基因转染的影响 | 第44-48页 |
2.3.6 亲水性氨基酸对树形高分子基因转染的影响 | 第48页 |
2.3.7 细胞毒性 | 第48-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-53页 |
第三章 氨基酸修饰的树形高分子在基因转染中的协同作用 | 第53-83页 |
3.1 引言 | 第53-54页 |
3.2 试验原料和方法 | 第54-59页 |
3.2.1 试验材料 | 第54页 |
3.2.2 合成单功能、双功能和三功能的树形高分子 | 第54-55页 |
3.2.3 一维核磁共振技术表征 | 第55页 |
3.2.4 转染复合物的制备 | 第55-57页 |
3.2.5 粒径和表面电势分析 | 第57页 |
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第57页 |
3.2.7 细胞培养和体外基因转染 | 第57-58页 |
3.2.8 细胞摄入 | 第58页 |
3.2.9 细胞毒性试验 | 第58页 |
3.2.10 质子缓冲效应 | 第58页 |
3.2.11 共聚焦显微镜试验 | 第58-59页 |
3.2.12 体内转染试验 | 第59页 |
3.3 结果与分析 | 第59-81页 |
3.3.1 合成与表征单功能、双功能和三功能的树形高分子 | 第59-62页 |
3.3.2 琼脂糖凝胶电泳试验 | 第62-63页 |
3.3.3 复合物尺寸和表面电势分析 | 第63-66页 |
3.3.4 体外基因转染 | 第66-73页 |
3.3.5 细胞毒性 | 第73-74页 |
3.3.6 协同效应的机制研究 | 第74-80页 |
3.3.7 体内基因转染 | 第80-81页 |
3.4 本章小结 | 第81-83页 |
第四章 简单的方法制备高效、低毒的多功能树形高分子基因载体 | 第83-107页 |
4.1 引言 | 第83页 |
4.2 试验材料和方法 | 第83-86页 |
4.2.1 试验材料 | 第83-84页 |
4.2.2 合成氨基酸修饰的树形高分子 | 第84页 |
4.2.3 合成FITC和RBITC标记的氨基酸修饰的树形高分子 | 第84页 |
4.2.4 紫外分光光度法和荧光分光光度法表征试验 | 第84页 |
4.2.5 转染复合物的制备 | 第84-85页 |
4.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第85页 |
4.2.7 粒径和表面电势分析 | 第85页 |
4.2.8 共定位试验 | 第85-86页 |
4.2.9 细胞培养和基因转染 | 第86页 |
4.2.10 细胞摄入 | 第86页 |
4.2.11 内涵体逃逸试验 | 第86页 |
4.2.12 细胞毒性试验 | 第86页 |
4.3 结果与分析 | 第86-105页 |
4.3.1 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第86-87页 |
4.3.2 多功能纳米复合物尺寸和表面电势分析 | 第87-88页 |
4.3.3 多功能纳米复合物组成单元的共定位研究 | 第88-91页 |
4.3.4 G5-Phe_(71)/G5-His_(40)组合的基因转染 | 第91-94页 |
4.3.5 G5-Phe_(71)/G5-His_(40)组合转染机制 | 第94-96页 |
4.3.6 G5-Phe_(71)/G5-His_(40)组合细胞毒性 | 第96-98页 |
4.3.7 G5-Phe_(71)/G5-Arg_(64)组合的基因转染 | 第98-102页 |
4.3.8 G5-Phg_(64)/G5-His_(40)组合的基因转染 | 第102-103页 |
4.3.9 与商业化试剂比较 | 第103-105页 |
4.4 本章小结 | 第105-107页 |
第五章 结论与展望 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
个人简历及攻读博士学位期间所取得的科研成果 | 第119页 |