摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩写标注 | 第10-14页 |
绪论 | 第14-21页 |
1 髓磷脂相关抑制因子Nogo | 第14-18页 |
2 GMCSF在免疫应答及中枢神经系统损伤修复中的作用 | 第18-19页 |
3 核酸疫苗在脊髓损伤免疫治疗中的应用 | 第19-21页 |
第一章真核表达载体pc DNA-GMCSF-Nogo N-Nogo66的构建与鉴定 | 第21-46页 |
1 实验材料 | 第21-26页 |
1.1 载体 | 第21页 |
1.2 菌株 | 第21页 |
1.3 细胞系 | 第21页 |
1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
1.5 引物合成和DNA序列测定 | 第22-23页 |
1.6 主要实验仪器 | 第23-24页 |
1.7 主要试剂配制 | 第24-26页 |
2 实验方法 | 第26-39页 |
2.1 DH5α 感受态细胞制备 | 第26-27页 |
2.2 真核表达载体pc DNA-GMCSF-Nogo N-Nogo66的构建 | 第27-36页 |
2.3 真核表达载体pc DNA-GNCSF-Nogo N-Nogo66鉴定 | 第36-39页 |
3 实验结果 | 第39-45页 |
3.1 目的基因扩增 | 第39-41页 |
3.2 阳性克隆鉴定 | 第41-44页 |
3.3 重组质粒pc DNA-GMCSF-Nogo N-Nogo66的体外表达检测 | 第44-45页 |
4 实验结果分析 | 第45-46页 |
第二章 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗对脊髓损伤免疫治疗效果评价 | 第46-80页 |
1 实验材料 | 第46-50页 |
1.1 质粒 | 第46页 |
1.2 实验动物 | 第46页 |
1.3 主要实验仪器 | 第46-47页 |
1.4 主要实验试剂 | 第47-48页 |
1.5 主要实验试剂配制 | 第48-50页 |
2 实验方法 | 第50-64页 |
2.1 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗的制备 | 第50-51页 |
2.2 疫苗制剂确定 | 第51-52页 |
2.3 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗免疫动物 | 第52页 |
2.4 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗体内抗体效价检测 | 第52-53页 |
2.5 SD大鼠变态反应性脑脊髓炎发生率检测 | 第53页 |
2.6 动物模型的制备 | 第53-54页 |
2.7 行为学方法评价Nogo-GMCSF复合核酸疫苗对脊髓损伤的治疗效果 | 第54-56页 |
2.8 组织学方法评价Nogo-GMCSF复合核酸疫苗对脊髓损伤的治疗效果 | 第56-60页 |
2.9 Nogo在免疫部位肌肉组织的表达 | 第60-61页 |
2.10 免疫组化检测脊髓Nogo与GAP-43的表达 | 第61-62页 |
2.11 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗体内外源基因整合情况检测 | 第62-63页 |
2.12 数据统计分析 | 第63-64页 |
3 实验结果 | 第64-79页 |
3.1 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗免疫条件确定 | 第64页 |
3.2 Nogo在免疫部位肌肉组织的表达情况 | 第64-65页 |
3.3 Nogo-GMCSF复合核酸疫苗产生的抗体效价 | 第65-66页 |
3.4 行为学检测结果 | 第66-71页 |
3.5 组织学检测结果 | 第71-74页 |
3.6 免疫组化检测 | 第74-76页 |
3.7 变态反应性脑脊髓炎的发生率 | 第76-77页 |
3.8 外源基因整合情况检测结果 | 第77-79页 |
4 结论 | 第79-80页 |
讨论 | 第80-83页 |
全文总结 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果 | 第90页 |