| 英文缩写说明 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第20-30页 |
| 1.1 球孢白僵菌是家蚕的重要病原真菌 | 第20-21页 |
| 1.2 昆虫免疫应答研究进展 | 第21-26页 |
| 1.2.1 昆虫的先天免疫 | 第21-25页 |
| 1.2.2 昆虫免疫的基因调控 | 第25-26页 |
| 1.3 研究目的和研究意义 | 第26-27页 |
| 1.4 研究内容 | 第27-28页 |
| 1.5 技术路线 | 第28页 |
| 1.6 创新点 | 第28-30页 |
| 第二章 家蚕CecropinA基因的克隆、表达及抗菌功能研究 | 第30-64页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第30-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第30页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第32页 |
| 2.1.5 常用的溶液和缓冲液 | 第32-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-47页 |
| 2.2.1 球孢白僵菌孢悬液的制备 | 第35页 |
| 2.2.2 接种球孢白僵菌 | 第35页 |
| 2.2.3 家蚕组织材料收集 | 第35页 |
| 2.2.4 总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.5 cDNA的合成 | 第36-37页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR ( qRT-PCR) | 第37-38页 |
| 2.2.7 BmCecA的克隆 | 第38-39页 |
| 2.2.8 基因序列分析 | 第39页 |
| 2.2.9 重组质粒的构建 | 第39-43页 |
| 2.2.10 重组蛋白的表达 | 第43页 |
| 2.2.11 重组蛋白的检测 | 第43-45页 |
| 2.2.12 重组蛋白的纯化 | 第45页 |
| 2.2.13 重组蛋白浓度的测定 | 第45-46页 |
| 2.2.14 化学合成多肽 | 第46页 |
| 2.2.15 抗菌活性检测 | 第46页 |
| 2.2.16 家蚕幼虫的生物测定 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-60页 |
| 2.3.1 家蚕接种球孢白僵菌的发病症状 | 第47-48页 |
| 2.3.2 BmCecA的克隆与分析 | 第48-49页 |
| 2.3.3 BmCecA的表达特征分析 | 第49-52页 |
| 2.3.4 BmCecA的体外重组表达 | 第52-53页 |
| 2.3.5 BmCecA多肽的化学合成 | 第53-54页 |
| 2.3.6 BmCecA的体外抗菌活性 | 第54-56页 |
| 2.3.7 BmCecA的体内抑菌活性 | 第56-60页 |
| 2.4 讨论 | 第60-64页 |
| 第三章 家蚕Gloverin2基因的克隆、表达及与BmCecA的协同抑菌功能研究 | 第64-82页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第64-65页 |
| 3.1.1 材料 | 第64页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第64页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第64-65页 |
| 3.2 实验方法 | 第65-69页 |
| 3.2.1 球孢白僵菌孢悬液的制备 | 第65页 |
| 3.2.2 接种球孢白僵菌 | 第65页 |
| 3.2.3 家蚕组织材料收集 | 第65页 |
| 3.2.4 总RNA的提取 | 第65页 |
| 3.2.5 cDNA的合成 | 第65页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR | 第65页 |
| 3.2.7 重组质粒的构建 | 第65-66页 |
| 3.2.8 重组蛋白的表达和检测 | 第66页 |
| 3.2.9 重组蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| 3.2.10 重组蛋白浓度的测定 | 第67页 |
| 3.2.11 多克隆抗体制备 | 第67-68页 |
| 3.2.12 家蚕各组织总蛋白的提取 | 第68页 |
| 3.2.13 体外抗菌活性检测 | 第68-69页 |
| 3.2.14 生物测定 | 第69页 |
| 3.3 结果与分析 | 第69-80页 |
| 3.3.0 Bmgloverin2的表达特征分析 | 第69-72页 |
| 3.3.1 Bmgloverin2的克隆与分析 | 第72-73页 |
| 3.3.2 重组表达载体的构建与鉴定 | 第73-74页 |
| 3.3.3 Bmgloverin2的体外重组表达 | 第74-76页 |
| 3.3.4 抗体制备与鉴定 | 第76-77页 |
| 3.3.5 Bmgloverin2的组织表达特异性 | 第77-78页 |
| 3.3.6 Bmgloverin2和BmCecA的体外协同抑菌作用 | 第78-79页 |
| 3.3.7 Bmgloverin2和BmCecA的体外协同抑菌作用 | 第79-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-82页 |
| 第四章 家蚕Lebocin 5 基因的克隆与表达分析 | 第82-100页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第82页 |
| 4.1.1 材料 | 第82页 |
| 4.1.2 试验仪器 | 第82页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第82页 |
| 4.2 试验方法 | 第82-88页 |
| 4.2.1 球孢白僵菌孢悬液的制备 | 第82页 |
| 4.2.2 接种球孢白僵菌 | 第82页 |
| 4.2.3 家蚕组织材料收集 | 第82页 |
| 4.2.4 总RNA的提取 | 第82-83页 |
| 4.2.5 cDNA的合成 | 第83页 |
| 4.2.6 实时荧光定量PCR | 第83页 |
| 4.2.7 BmLeb5的克隆 | 第83-87页 |
| 4.2.8 基因序列分析 | 第87-88页 |
| 4.2.9 重组表达载体的构建 | 第88页 |
| 4.2.10 重组载体的表达 | 第88页 |
| 4.2.11 重组BmLeb5的纯化 | 第88页 |
| 4.2.12 质谱鉴定重组蛋白 | 第88页 |
| 4.3 结果与分析 | 第88-97页 |
| 4.3.1 家蚕接种球孢白僵菌的发病症状 | 第88页 |
| 4.3.2 BmLeb5的克隆与生物信息学分析 | 第88-92页 |
| 4.3.3 BmLeb5的表达谱分析 | 第92-95页 |
| 4.3.4 BmLeb5的体外重组表达和纯化 | 第95-97页 |
| 4.3.5 重组蛋白BmLeb5的鉴定 | 第97页 |
| 4.4 讨论 | 第97-100页 |
| 第五章 家蚕感染球孢白僵菌后差异蛋白质组研究 | 第100-116页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第100页 |
| 5.1.1 材料 | 第100页 |
| 5.1.2 试验仪器 | 第100页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第100页 |
| 5.2 试验方法 | 第100-103页 |
| 5.2.1 球孢白僵菌孢悬液的制备 | 第100-101页 |
| 5.2.2 接种球孢白僵菌 | 第101页 |
| 5.2.3 家蚕血淋巴的收集 | 第101页 |
| 5.2.4 血淋巴总蛋白的提取和检测 | 第101页 |
| 5.2.5 Label free非标记定量分析 | 第101-103页 |
| 5.3 结果与分析 | 第103-114页 |
| 5.3.1 家蚕接种球孢白僵菌的发病症状 | 第103-104页 |
| 5.3.2 蛋白样品浓度和质量检测 | 第104-105页 |
| 5.3.3 差异蛋白质的鉴定 | 第105-111页 |
| 5.3.4 差异蛋白的GO注释与富集分析 | 第111-113页 |
| 5.3.5 差异蛋白的KEGG通路分析 | 第113-114页 |
| 5.4 讨论 | 第114-116页 |
| 结论 | 第116-120页 |
| 参考文献 | 第120-136页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
