| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 疟疾 | 第13-14页 |
| 1.2 青蒿 | 第14-15页 |
| 1.3 青蒿素 | 第15-19页 |
| 1.3.1 青蒿素简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 青蒿素衍生物 | 第16页 |
| 1.3.3 腺毛体-青蒿素的合成、储存部位 | 第16-19页 |
| 1.4 青蒿素生物合成的关键酶基因 | 第19-22页 |
| 1.5 转基因技术提高青蒿素含量 | 第22-24页 |
| 1.5.1 超量表达青蒿素合成途径的基因 | 第22页 |
| 1.5.2 抑制青蒿素合成竞争支路的关键基因 | 第22-23页 |
| 1.5.3 超量表达参与青蒿素合成的转录因子 | 第23-24页 |
| 1.5.4 间接调控青蒿素的合成 | 第24页 |
| 1.6 青蒿TFAR1基因研究进展 | 第24-27页 |
| 第二章 绪论 | 第27-31页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 2.2 研究范围和内容 | 第28-30页 |
| 2.2.1 超量表达TFAR1对青蒿素及其代谢产物的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.2 青蒿TFAR1启动子的克隆与组织定位 | 第29-30页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第30-31页 |
| 第三章 材料与试剂 | 第31-35页 |
| 3.1 材料 | 第31-35页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第31页 |
| 3.1.3 仪器和设备 | 第31-32页 |
| 3.1.4 试剂盒和酶 | 第32页 |
| 3.1.5 自配试剂 | 第32-35页 |
| 第四章 方法与步骤 | 第35-53页 |
| 4.1 常规方法与步骤 | 第35-40页 |
| 4.1.1 DNA、RNA提取 | 第35-36页 |
| 4.1.2 青蒿cDNA合成 | 第36-37页 |
| 4.1.3 目的条带胶回收 | 第37页 |
| 4.1.4 连接反应 | 第37-38页 |
| 4.1.5 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第38-39页 |
| 4.1.6 质粒提取 | 第39页 |
| 4.1.7 重组子的鉴定、测序 | 第39页 |
| 4.1.8 农杆菌感受态制备及转化 | 第39-40页 |
| 4.2 超量表达TFAR1对青蒿素及其代谢产物的影响 | 第40-48页 |
| 4.2.1 青蒿AaTFAR1编码区全长克隆 | 第40-41页 |
| 4.2.2 生物信息学分析 | 第41页 |
| 4.2.3 青蒿AaTFAR1组织表达分析 | 第41-43页 |
| 4.2.4 青蒿AaTFAR1诱导谱分析 | 第43页 |
| 4.2.5 载体构建 | 第43-44页 |
| 4.2.6 遗传转化 | 第44-45页 |
| 4.2.7 转基因阳性苗的鉴定 | 第45-47页 |
| 4.2.8 转基因青蒿炼苗与田间试验 | 第47页 |
| 4.2.9 基因表达量分析 | 第47页 |
| 4.2.10 转基因青蒿青蒿素及其相关代谢产物的提取 | 第47页 |
| 4.2.11 HPLC检测青蒿素及其相关代谢产物 | 第47-48页 |
| 4.3 AaTFAR1启动子克隆与拟南芥的组织定位 | 第48-53页 |
| 4.3.1 青蒿AaTFAR1启动子克隆 | 第48页 |
| 4.3.2 生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 4.3.3 载体构建 | 第49-50页 |
| 4.3.4 拟南芥的转化 | 第50-51页 |
| 4.3.5 拟南芥阳性植株的筛选 | 第51页 |
| 4.3.6 拟南芥转基因阳性苗的鉴定 | 第51页 |
| 4.3.7 GUS染色组织定位 | 第51-53页 |
| 第五章 结果与讨论 | 第53-69页 |
| 5.1 超量表达TFAR1对青蒿素及其代谢产物的影响 | 第53-65页 |
| 5.1.1 青蒿AaTFAR1编码区全长的获得 | 第53-54页 |
| 5.1.2 生物信息学分析 | 第54-56页 |
| 5.1.3 青蒿AaTFAR1基因表达模式 | 第56-59页 |
| 5.1.4 建立转基因抗性苗 | 第59页 |
| 5.1.5 PCR检测转基因阳性苗 | 第59-60页 |
| 5.1.6 荧光定量PCR分析基因表达量 | 第60-61页 |
| 5.1.7 HPLC检测转基因青蒿中青蒿素及其相关代谢产物 | 第61-65页 |
| 5.2 AaTFAR1启动子克隆与在拟南芥的组织定位 | 第65-69页 |
| 5.2.1 AaTFAR1启动子获得 | 第65-66页 |
| 5.2.2 AaTFAR1启动子顺式作用元件分析 | 第66-67页 |
| 5.2.3 AaTFAR1启动子在拟南芥的表达模式 | 第67-69页 |
| 第六章 结论与展望 | 第69-73页 |
| 6.1 结果与讨论 | 第69-70页 |
| 6.2 展望 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 附录 | 第81-85页 |
| 附录1：常用抗生素及培养基的配置 | 第81-83页 |
| 附录2：缩略词表 | 第83-85页 |
| 硕士期间发表论文 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
