| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1.1 病毒诱导的基因沉默（VIGS）及其在植物基因功能研究中的应用 | 第14-26页 |
| 1.1.1 病毒诱导的基因沉默的机制 | 第14-16页 |
| 1.1.2 病毒诱导的基因沉默的建立与发展 | 第16-21页 |
| 1.1.3 VIGS技术在植物基因功能研究中的应用现状及前景 | 第21-24页 |
| 1.1.4 大麦条斑花叶病毒诱导基因沉默体系（BSMV-VIGS）的建立及研究进展 | 第24-26页 |
| 1.2 植物种子大小相关基因的研究进展 | 第26-31页 |
| 1.2.1 植物种子大小的意义及影响因素 | 第26-27页 |
| 1.2.2 植物种子大小相关基因的克隆和功能研究进展 | 第27-29页 |
| 1.2.3 CYP78A家族基因对植物种子发育的调控作用研究进展 | 第29-30页 |
| 1.2.4 小麦籽粒大小和粒重相关性状基因研究进展 | 第30-31页 |
| 1.3 本研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 小麦穗部病毒诱导的基因沉默体系的建立 | 第32-53页 |
| 2.1 前言 | 第32页 |
| 2.2 材料方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第33页 |
| 2.2.3 载体构建 | 第33-36页 |
| 2.2.4 病毒的体外转录与接种 | 第36-37页 |
| 2.2.5 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第37页 |
| 2.2.6 实时定量PCR检测转录本 | 第37-38页 |
| 2.2.7 小麦种子高分子量麦谷蛋白（HMW）的提取 | 第38页 |
| 2.2.8 小麦种子高分子量麦谷蛋白（HMW）的SDS-PAGE电泳检测 | 第38页 |
| 2.2.9 小麦种子蛋白的凯氏定氮检测 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-49页 |
| 2.3.1 重组病毒BSMV：PDS能够诱导小麦穗部内源PDS基因沉默 | 第39-42页 |
| 2.3.2 BSMV诱导小麦穗部内源基因沉默方法体系的优化 | 第42-44页 |
| 2.3.3 利用BSMV-VIGS方法沉默小麦高分子量麦谷蛋白 1Bx14 基因的表达 | 第44-48页 |
| 2.3.4 利用BSMV-VIGS方法可以抑制小麦种子所有高分子量麦谷蛋白基因的表达 | 第48-49页 |
| 2.4 结论及讨论 | 第49-53页 |
| 2.4.1 结论 | 第49-50页 |
| 2.4.2 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 小麦TaCYP78A3 基因的克隆和功能研究 | 第53-92页 |
| 3.1 前言 | 第53页 |
| 3.2 材料方法 | 第53-61页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 3.2.2 TaCYP78A3 基因的克隆和序列分析 | 第54页 |
| 3.2.3 TaCYP78A3 基因的染色体定位 | 第54-55页 |
| 3.2.4 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第55页 |
| 3.2.5 TaCYP78A3 基因的表达模式分析 | 第55-56页 |
| 3.2.6 病毒载体及转基因载体的构建 | 第56-58页 |
| 3.2.7 病毒的体外转录与接种 | 第58页 |
| 3.2.8 拟南芥的转基因及阳性植株筛选和鉴定 | 第58页 |
| 3.2.9 半定量和实时定量PCR检测转录本 | 第58-59页 |
| 3.2.10 形态学观察、种子或器官大小测量、细胞学镜检和GUS染色 | 第59页 |
| 3.2.11 拟南芥纯合缺失突变体的鉴定 | 第59-61页 |
| 3.3 结果与分析 | 第61-89页 |
| 3.3.1 TaCYP78A3 基因的克隆和染色体定位 | 第61-62页 |
| 3.3.2 TaCYP78A3 基因的鉴定、分子特征分析及时空表达模式分析 | 第62-65页 |
| 3.3.3 小麦穗部TaCYP78A3 基因表达的抑制表达导致小麦籽粒变小 | 第65-68页 |
| 3.3.4 小麦穗部TaCYP78A3 基因表达的抑制导致小麦种皮细胞数目减少 | 第68-69页 |
| 3.3.5 转基因过表达TaCYP78A3 基因导致拟南芥种子和生殖器官过度生长 | 第69-77页 |
| 3.3.6 TaCYP78A3 通过控制拟南芥胚珠和种子表皮细胞增殖影响种子大小 | 第77-80页 |
| 3.3.7 TaCYP78A3 通过控制拟南芥胚表皮细胞增殖影响胚发育 | 第80-82页 |
| 3.3.8 TaCYP78A3 可能独立于其他已知母性因素之外影响表皮细胞增殖 | 第82-86页 |
| 3.3.9 转基因过表达TaCYP78A3 能够延长拟南芥生育期 | 第86-88页 |
| 3.3.10 TaCYP78A3 表达量与产量的关系 | 第88-89页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第89-92页 |
| 3.4.1 CYP78A家族成员作用于植物生殖器官发育 | 第89-90页 |
| 3.4.2 小麦中基因与种子大小和产量的关系 | 第90页 |
| 3.4.3 结论 | 第90-92页 |
| 第四章 小麦TaCYP78A5 基因的克隆和功能研究 | 第92-124页 |
| 4.1 前言 | 第92页 |
| 4.2 材料方法 | 第92-97页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第92页 |
| 4.2.2 TaCYP78A5 基因的克隆和序列分析 | 第92-93页 |
| 4.2.3 TaCYP78A5 基因的定位 | 第93页 |
| 4.2.4 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第93页 |
| 4.2.5 TaCYP78A5 基因的表达模式分析 | 第93页 |
| 4.2.6 病毒载体及转基因载体的构建 | 第93-95页 |
| 4.2.7 病毒的体外转录与接种 | 第95页 |
| 4.2.8 拟南芥的转基因及阳性植株筛选和鉴定 | 第95页 |
| 4.2.9 拟南芥缺失突变体的鉴定 | 第95页 |
| 4.2.10 半定量和实时定量PCR检测转录本 | 第95页 |
| 4.2.11 形态学观察、细胞学镜检和GUS染色 | 第95-97页 |
| 4.3 结果与分析 | 第97-121页 |
| 4.3.1 TaCYP78A5 基因的克隆和染色体定位 | 第97-98页 |
| 4.3.2 TaCYP78A5 基因的鉴定和分子特征分析及时空表达模式分析 | 第98-100页 |
| 4.3.3 小麦TaCYP78A5 能够恢复拟南芥CYP78A5 功能缺失表型 | 第100-103页 |
| 4.3.4 小麦穗部抑制TaCYP78A5 基因表达导致小麦籽粒和器官变小 | 第103-106页 |
| 4.3.5 小麦穗部TaCYP78A5 基因的抑制表达导致小麦种皮细胞数目减少 | 第106-108页 |
| 4.3.6 转基因过表达TaCYP78A5 导致拟南芥种子和器官过度生长 | 第108-113页 |
| 4.3.7 TaCYP78A5 通过影响拟南芥胚珠和种子表皮细胞增殖影响种子大小 | 第113-116页 |
| 4.3.8 转基因过表达TaCYP78A5 基因导致拟南芥胚增大 | 第116-118页 |
| 4.3.9 转基因过表达TaCYP78A5 能够延长拟南芥生育期 | 第118-120页 |
| 4.3.10 TaCYP78A5 表达量与产量的关系 | 第120-121页 |
| 4.4 结论及讨论 | 第121-124页 |
| 4.4.1 CYP78A家族成员可能通过非细胞自制的模式控制器官和种子生长 | 第121-122页 |
| 4.4.2 CYP78A家族成员控制植株发育存在功能相似性 | 第122页 |
| 4.4.3 CYP78A家族成员涉及植物育性 | 第122-123页 |
| 4.4.4 结论 | 第123-124页 |
| 第五章 全文总结 | 第124-127页 |
| 5.1 全文总结 | 第124-126页 |
| 5.2 本研究的创新点 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 作者简介 | 第146页 |
