| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.1 脂肪细胞分化概述 | 第13-22页 |
| 1.1.1 脂肪细胞分化过程 | 第13页 |
| 1.1.2 脂肪组织分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 调控脂肪分化的主要信号通路 | 第14-17页 |
| 1.1.3.1 Wnt/β-catenin信号通路 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 TGF-β信号通路 | 第15-16页 |
| 1.1.3.3 MAPK信号通路 | 第16页 |
| 1.1.3.4 FGF信号通路 | 第16-17页 |
| 1.1.3.5 Hedgehog信号通路 | 第17页 |
| 1.1.3.6 胰岛素/IGF1信号通路 | 第17页 |
| 1.1.4 调控脂肪分化的关键转录因子 | 第17-20页 |
| 1.1.4.1 PPARs | 第17-19页 |
| 1.1.4.2 C/EBPs家族 | 第19页 |
| 1.1.4.3 SREBP家族 | 第19-20页 |
| 1.1.5 调控脂肪组织和肌内脂肪代谢关键基因研究进展 | 第20-22页 |
| 1.1.5.1 LPL | 第21页 |
| 1.1.5.2 LRP6 | 第21页 |
| 1.1.5.3 AP2 | 第21-22页 |
| 1.1.5.4 FAS | 第22页 |
| 1.1.5.5 SOCS3 | 第22页 |
| 1.2 miRNA的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.2.1 miRNA的发现及形成机制 | 第22-23页 |
| 1.2.2 动物miRNA的作用机制 | 第23-24页 |
| 1.2.3 miRNA的鉴定方法 | 第24-25页 |
| 1.2.3.1 直接克隆法 | 第24页 |
| 1.2.3.2 生物信息学法 | 第24-25页 |
| 1.2.3.3 其他方法 | 第25页 |
| 1.2.4 调控脂肪分化miRNA的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 第2章 牦牛脂肪分化相关miRNA的预测与表达分析 | 第27-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验动物样品采集 | 第27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 数据采集 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 miRNA生物信息学预测 | 第28页 |
| 2.2.2 组织总RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第29页 |
| 2.2.4 RNA反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR分析 | 第30页 |
| 2.2.6 RT-PCR分析 | 第30-31页 |
| 2.3 结果和分析 | 第31-35页 |
| 2.3.1 候选牦牛与脂肪分化相关miRNA | 第31-34页 |
| 2.3.2 牦牛各组织总RNA提取结果 | 第34页 |
| 2.3.3 候选miRNA的RT-PCR分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 第3章 牦牛miRNA靶基因的预测、功能及表达分析 | 第39-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 主要软件 | 第39页 |
| 3.1.2 主要仪器设备及试剂 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 miRNA靶基因预测及功能分析 | 第39页 |
| 3.2.2 miRNA靶基因表达引物设计 | 第39页 |
| 3.2.3 cDNA合成及实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 3.3 结果和分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 miRNA靶基因预测和功能分析 | 第40-42页 |
| 3.3.2 miRNA候选靶基因RT-PCR分析 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第4章 bta-miR-2340靶基因的验证 | 第45-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 主要试剂与仪器 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.2.1 靶基因克隆和载体构建引物设计 | 第45-46页 |
| 4.2.2 靶位点PCR扩增和回收 | 第46页 |
| 4.2.3 T克隆测序 | 第46-48页 |
| 4.2.4 双酶切和重组载体构建 | 第48页 |
| 4.2.5 Hela细胞的培养 | 第48-49页 |
| 4.2.6 细胞转染 | 第49页 |
| 4.2.7 双荧光素酶报告系统检测 | 第49页 |
| 4.3 结果和分析 | 第49-51页 |
| 4.3.1 野生型和突变型质粒构建 | 第50页 |
| 4.3.2 双荧光素酶报告系统检测 | 第50-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4.5 结论 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53页 |
| 创新点 | 第53页 |
| 进一步研究内容 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
