| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 果胶 | 第10-11页 |
| 1.1.1 果胶的结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 果胶的分类 | 第11页 |
| 1.2 果胶酶 | 第11-13页 |
| 1.2.1 果胶酶的分类 | 第11-13页 |
| 1.2.2 果胶酶的应用 | 第13页 |
| 1.3 多聚半乳糖醛酸酶的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.3.1 多聚半乳糖醛酸酶的来源 | 第13-14页 |
| 1.3.2 多聚半乳糖醛酸酶的结构 | 第14-16页 |
| 1.3.3 多聚半乳糖醛酸酶的功能 | 第16页 |
| 1.3.4 多聚半乳糖醛酸酶的性质 | 第16-17页 |
| 1.4 酶的分子改造策略 | 第17页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 Talaromyces leycettanus JCM 12802 来源嗜热多聚半乳糖醛酸酶基因的挖掘 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基和溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.4 生化试剂、试剂盒和工具酶 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 多聚半乳糖醛酸酶的酶活标准曲线的制作 | 第21页 |
| 2.2.2 多聚半乳糖醛酸酶酶活的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.3 T. leycettanus JCM12802菌株产多聚半乳糖醛酸酶的评估 | 第22页 |
| 2.2.4 T. leycettanus JCM12802来源多聚半乳糖醛酸酶基因的获取 | 第22-25页 |
| 2.2.5 T. leycettanus JCM12802多聚半乳糖醛酸酶基因c DNA序列的扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.6 T. leycettanus JCM 12802 中聚半乳糖醛酸酶表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.7 T. leycettanus JCM 12802 多聚半乳糖醛酸酶的酵母表达 | 第28-30页 |
| 2.2.8 多聚半乳糖醛酸酶的纯化、脱糖基及定量 | 第30-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-34页 |
| 2.3.1 多聚半乳糖醛酸酶的酶活标准曲线 | 第31页 |
| 2.3.2 T. leycettanus JCM12802菌株产多聚半乳糖醛酸酶的评估 | 第31页 |
| 2.3.3 T. leycettanus JCM12802聚半乳糖醛酸的基因获取及分析 | 第31-32页 |
| 2.3.4 T. leycettanus JCM12802多聚半乳糖醛酸酶的表达质粒构建 | 第32-33页 |
| 2.3.5 多聚半乳糖醛酸酶的酵母表达及其蛋白纯化 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 Talaromyces leycettanus JCM 12802 来源多聚半乳糖醛酸酶的酶学性质研究及其协同应用的评估 | 第36-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 溶液的配制 | 第36页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 生化试剂 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 聚半乳糖醛酸酶的酶学性质研究 | 第36-37页 |
| 3.2.2 动力学常数 | 第37页 |
| 3.2.3 底物特异性 | 第37-38页 |
| 3.2.4 产物分析 | 第38页 |
| 3.2.5 内切型和外切型多聚半乳糖醛酸酶的协同作用 | 第38页 |
| 3.2.6 葡萄汁的澄清实验 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-43页 |
| 3.3.1 酶学性质分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 动力学常数 | 第39-40页 |
| 3.3.3 底物特异性 | 第40-41页 |
| 3.3.4 产物分析 | 第41页 |
| 3.3.5 协同作用 | 第41-42页 |
| 3.3.6 葡萄汁澄清实验 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 多聚半乳糖醛酸酶催化效率的分子改造 | 第45-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第45页 |
| 4.1.2 培养基和溶液的配制 | 第45页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.4 生化试剂、试剂盒和工具酶 | 第45页 |
| 4.1.5 野生型多聚半乳糖醛酸酶 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 4.2.1 多聚半乳糖醛酸酶的同源建模和比对 | 第45-46页 |
| 4.2.2 分子改造的策略 | 第46页 |
| 4.2.3 点突变实验 | 第46-47页 |
| 4.2.4 突变表达载体的酵母表达及纯化 | 第47-48页 |
| 4.2.5 突变重组酶的酶学性质研究 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-52页 |
| 4.3.1 Te PG28b和Bs PG28a的同源建模 | 第48-49页 |
| 4.3.2 点突变载体的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.3 突变蛋白的表达和纯化 | 第50-51页 |
| 4.3.4 突变体的酶学性质研究 | 第51-52页 |
| 4.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
