| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-26页 |
| 一、染色体-质粒平衡致死系统研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1 营养缺陷标志基因的选择 | 第11-14页 |
| 1.2 染色体-质粒平衡致死系统的构建 | 第14-16页 |
| 1.3 染色体-质粒平衡致死系统在疫苗中的应用 | 第16-17页 |
| 二、鸡大肠杆菌外膜蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| 2.1 外膜蛋白的组成、结构及其功能 | 第18页 |
| 2.2 外膜蛋白的致病作用 | 第18-19页 |
| 2.3 外膜蛋白的免疫原性 | 第19页 |
| 三、研究的目的与意义 | 第19-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 研究一 大肠杆菌外膜蛋白基因S632的克隆与原核表达 | 第26-39页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 病料来源 | 第27页 |
| 1.2 菌株、载体 | 第27页 |
| 1.3 培养基和主要试剂 | 第27-28页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-32页 |
| 2.1 临床分离鉴定大肠杆菌及S632基因目的片段的扩增 | 第28-29页 |
| 2.2 pMD19-T-S632重组质粒的构建 | 第29-30页 |
| 2.3 S632基因的表达及SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| 2.4 重组蛋白的大量诱导表达及表达后的处理 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-35页 |
| 3.1 病原菌的分离培养 | 第32页 |
| 3.2 PCR扩增分离株大肠杆菌的S632基因 | 第32-33页 |
| 3.3 重组质粒pMD18-T-S632的测序鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4 重组质粒pET-42a-S632转化BL21的PCR鉴定 | 第34页 |
| 3.5 融合蛋白诱导表达及纯化 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 研究二 表达大肠杆菌共同外膜蛋白抗原的重组减毒鸡伤寒沙门氏菌构建及免疫效果研究 | 第39-56页 |
| 1 材料 | 第41页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 试验动物 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-46页 |
| 2.1 重组菌SG9R(pYA3342-S632)的构建 | 第41-43页 |
| 2.2 口服疫苗的生长曲线测定 | 第43页 |
| 2.3 接种菌液的制备及活菌数的测定 | 第43页 |
| 2.4 重组菌对仔鸡的安全性试验 | 第43页 |
| 2.5 重组口服疫苗对鸡的免疫保护试验 | 第43-44页 |
| 2.6 重组口服疫苗对鸡的细胞免疫的影响 | 第44-45页 |
| 2.7 血清中特异性抗体IgG检测 | 第45页 |
| 2.8 粘膜特异性抗体sIgA检测 | 第45页 |
| 2.9 攻毒试验 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-51页 |
| 3.1 PCR扩增目的基因 | 第46页 |
| 3.2 重组表达质粒pYA3342-S632的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3 生长试验 | 第47页 |
| 3.4 口服重组疫苗的安全性 | 第47-48页 |
| 3.5 外周血CD3+、CD8+T淋巴细胞动态变化检测 | 第48-49页 |
| 3.6 免疫鸡血清中IgG抗体检测结果 | 第49页 |
| 3.7 特异性sIgA抗体检测结果 | 第49-50页 |
| 3.8 免疫鸡体增重结果 | 第50页 |
| 3.9 仔鸡免疫重组口服活疫苗攻毒保护结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 全文小结 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58-59页 |
