| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 第一部分 新型椎间盘髓核标志物在退变髓核中的表达和评估 | 第18-41页 |
| 1. 前言 | 第18-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 标本收集 | 第20-23页 |
| 2.3 RNA提取和逆转录 | 第23-24页 |
| 2.4 实时定量荧光PCR | 第24-26页 |
| 2.5 组织学和免疫组织化学 | 第26-28页 |
| 2.6 Western Blot | 第28-31页 |
| 2.7 数据分析 | 第31页 |
| 3. 结果 | 第31-37页 |
| 3.1 退变髓核的影像学、形态学改变 | 第31-32页 |
| 3.2 退变组和对照组中NP标记物的mRNA表达水平评估 | 第32-35页 |
| 3.3 新髓核标记物的表达与椎间盘退变程度的关系 | 第35-36页 |
| 3.4 退变髓核组织中CA12蛋白水平的表达评估 | 第36-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-41页 |
| 第二部分 CA12在椎间盘退变中的作用及其调控机制 | 第41-59页 |
| 1. 前言 | 第41页 |
| 2. 材料与方法 | 第41-47页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第41-43页 |
| 2.2 标本收集 | 第43页 |
| 2.3 大鼠髓核细胞培养和处理 | 第43-44页 |
| 2.4 siRNA干扰 | 第44页 |
| 2.5 基因表达检测 | 第44-47页 |
| 2.6 数据分析 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-55页 |
| 3.1 缺氧可促进CA12表达 | 第48页 |
| 3.2 HIF-1α在退变人髓核组织中表达下降 | 第48-49页 |
| 3.3 PHD/HIF-1α轴调控CA12表达 | 第49-51页 |
| 3.4 CA12在椎间盘髓核代谢中的作用 | 第51-54页 |
| 3.5 CA12可能通过调节pH来影响髓核合成代谢 | 第54-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-59页 |
| 第三部分 器官培养模型中验证PHD/HIF-1/CA12对椎间盘退变的作用 | 第59-71页 |
| 1. 前言 | 第59页 |
| 2. 材料与方法 | 第59-65页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第59-61页 |
| 2.2 全椎间盘培养模型的建立和处理 | 第61-62页 |
| 2.3 基因表达检测 | 第62-64页 |
| 2.4 组织学研究 | 第64-65页 |
| 2.5 数据分析 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-68页 |
| 3.1 全椎间盘模型的组织学评估 | 第65-66页 |
| 3.2 全椎间盘模型中PHD调控HIF-1和CA12的表达 | 第66-67页 |
| 3.3 全椎间盘模型PHD/HIF-1/CA12调节髓核合成代谢 | 第67-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 综述 | 第80-101页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 自传 | 第101-102页 |
