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稻瘟病菌定殖与扩展相关基因MgGLK1,MgMFS1和MgHAP的克隆与功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1. 文献综述第9-23页
   ·稻瘟病与稻瘟病菌第9页
   ·稻瘟病菌的侵染循环第9-11页
     ·稻瘟菌孢子产生和萌发第10页
     ·附着胞的形成和侵染钉分化第10页
     ·侵染性菌丝的扩展第10-11页
   ·稻瘟病菌的重要功能基因第11-19页
     ·产孢相关基因第11-14页
     ·参与附着胞形成和侵染的基因和信号识别途径第14-19页
   ·甘油激酶概况第19-20页
     ·甘油激酶的生物学特性第19页
     ·甘油激酶研究现状及应用第19-20页
   ·MFS transporter 的概况第20-21页
     ·MFS transporter 生物学特性第20页
     ·MFS transporter 的研究现状及应用第20-21页
   ·本研究的目的、内容与意义第21-23页
2. 材料与方法第23-36页
   ·试验材料第23-24页
     ·供试菌株第23页
     ·供试质粒第23页
     ·供试植物第23页
     ·培养基第23-24页
     ·生化试剂第24页
   ·试验方法第24-33页
     ·目的蛋白的序列获得与分析第24-25页
     ·PCR 扩增第25页
     ·PCR 产物胶回收第25页
     ·PCR 产物的TA 克隆第25-26页
     ·大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化第26-27页
     ·质粒DNA 的提取第27页
     ·质粒的酶切与连接第27页
     ·MgGLK1、MgMFS1 和MgHAP 敲除载体的构建第27-29页
     ·MgHAP 过量表达载体的构建第29-30页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备及转化第30-31页
     ·稻瘟病菌基因组DNA 的快速提取方法第31页
     ·稻瘟病菌菌丝Total RNA 的提取第31-32页
     ·RT-PCR第32-33页
   ·基因敲除突变体表型鉴定第33-36页
     ·菌落生长速度测定第33页
     ·孢子量统计及形态观察第33-34页
     ·孢子萌发及附着胞形成观察第34页
     ·大麦离体接种试验第34页
     ·水稻致病性鉴定第34页
     ·洋葱表皮侵染实验的观察第34-35页
     ·检测菌株细胞完整性实验第35-36页
3 结果与分析第36-57页
     ·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因的生物信息学分析第36-38页
   ·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因敲除突变体的获得第38-41页
     ·MgGLK1、MgMFS1 和MgHAP 基因敲除载体的构建第38-39页
     ·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因敲除突变体的筛选与验证第39-41页
   ·MgHAP 过量表达突变体的获得第41-42页
     ·MgHAP 过量表达突变体载体的构建第41-42页
     ·MgHAP 过量表达突变体的筛选与验证第42页
   ·突变体的表型分析第42-57页
     ·MgGLK1 基因敲除突变体的表型分析第42-48页
       ·MgMF51 基因敲除突变体表型分析第48-52页
     ·MgHAP 基因敲除突变体和过量表达突变体的表型第52-57页
4. 小结与讨论第57-60页
   ·MgGLK1 与分生孢子和附着胞发育有关第57-58页
   ·MgMFS1 基因敲除突变体的致病性无明显变化第58页
   ·MgHAP 基因作为分泌蛋白可能对稻瘟病菌的致病性有关第58-60页
参考文献第60-67页
附录1第67-69页
致谢第69页

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