摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1. 文献综述 | 第9-23页 |
·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第9页 |
·稻瘟病菌的侵染循环 | 第9-11页 |
·稻瘟菌孢子产生和萌发 | 第10页 |
·附着胞的形成和侵染钉分化 | 第10页 |
·侵染性菌丝的扩展 | 第10-11页 |
·稻瘟病菌的重要功能基因 | 第11-19页 |
·产孢相关基因 | 第11-14页 |
·参与附着胞形成和侵染的基因和信号识别途径 | 第14-19页 |
·甘油激酶概况 | 第19-20页 |
·甘油激酶的生物学特性 | 第19页 |
·甘油激酶研究现状及应用 | 第19-20页 |
·MFS transporter 的概况 | 第20-21页 |
·MFS transporter 生物学特性 | 第20页 |
·MFS transporter 的研究现状及应用 | 第20-21页 |
·本研究的目的、内容与意义 | 第21-23页 |
2. 材料与方法 | 第23-36页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·供试菌株 | 第23页 |
·供试质粒 | 第23页 |
·供试植物 | 第23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·生化试剂 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-33页 |
·目的蛋白的序列获得与分析 | 第24-25页 |
·PCR 扩增 | 第25页 |
·PCR 产物胶回收 | 第25页 |
·PCR 产物的TA 克隆 | 第25-26页 |
·大肠杆菌E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
·质粒DNA 的提取 | 第27页 |
·质粒的酶切与连接 | 第27页 |
·MgGLK1、MgMFS1 和MgHAP 敲除载体的构建 | 第27-29页 |
·MgHAP 过量表达载体的构建 | 第29-30页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备及转化 | 第30-31页 |
·稻瘟病菌基因组DNA 的快速提取方法 | 第31页 |
·稻瘟病菌菌丝Total RNA 的提取 | 第31-32页 |
·RT-PCR | 第32-33页 |
·基因敲除突变体表型鉴定 | 第33-36页 |
·菌落生长速度测定 | 第33页 |
·孢子量统计及形态观察 | 第33-34页 |
·孢子萌发及附着胞形成观察 | 第34页 |
·大麦离体接种试验 | 第34页 |
·水稻致病性鉴定 | 第34页 |
·洋葱表皮侵染实验的观察 | 第34-35页 |
·检测菌株细胞完整性实验 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-57页 |
·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因的生物信息学分析 | 第36-38页 |
·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因敲除突变体的获得 | 第38-41页 |
·MgGLK1、MgMFS1 和MgHAP 基因敲除载体的构建 | 第38-39页 |
·MgGLK1,MgMFS1 和MgHAP 基因敲除突变体的筛选与验证 | 第39-41页 |
·MgHAP 过量表达突变体的获得 | 第41-42页 |
·MgHAP 过量表达突变体载体的构建 | 第41-42页 |
·MgHAP 过量表达突变体的筛选与验证 | 第42页 |
·突变体的表型分析 | 第42-57页 |
·MgGLK1 基因敲除突变体的表型分析 | 第42-48页 |
·MgMF51 基因敲除突变体表型分析 | 第48-52页 |
·MgHAP 基因敲除突变体和过量表达突变体的表型 | 第52-57页 |
4. 小结与讨论 | 第57-60页 |
·MgGLK1 与分生孢子和附着胞发育有关 | 第57-58页 |
·MgMFS1 基因敲除突变体的致病性无明显变化 | 第58页 |
·MgHAP 基因作为分泌蛋白可能对稻瘟病菌的致病性有关 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录1 | 第67-69页 |
致谢 | 第69页 |