| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一部分 引言 | 第9-22页 |
| 1 小 G 蛋白的结构和功能 | 第9-12页 |
| ·小G 蛋白分类 | 第9页 |
| ·小G 蛋白的结构 | 第9页 |
| ·小G 蛋白的作用原理 | 第9-11页 |
| ·小G 蛋白的定位 | 第11-12页 |
| 2 Rho 族蛋白调控细胞骨架的重组和基因表达 | 第12-16页 |
| ·Rho 族蛋白综述 | 第12页 |
| ·Rho 族蛋白调控细胞骨架肌动蛋白的重组 | 第12-13页 |
| ·Rho 族蛋白的活性状态与非活性状态之间的转换调控 | 第13页 |
| ·Rho 蛋白的效应因子 | 第13-14页 |
| ·Rho 蛋白在基因表达中的作用方式 | 第14页 |
| ·Rho1 蛋白在细胞骨架重组中的作用模式 | 第14-15页 |
| ·Rho 蛋白的其他功能 | 第15-16页 |
| 3 GEF 蛋白结构功能分析 | 第16-21页 |
| ·GEF 蛋白中的结构域 | 第16-17页 |
| ·GEF 蛋白功能分析 | 第17-18页 |
| ·GEFs 的作用机制 | 第18-19页 |
| ·Rho1 与其GEF 互作的研究进展 | 第19-21页 |
| ·Rho1 与GEF 的互作模式 | 第19页 |
| ·GEF-H1 通过RhoA 诱导细胞收缩过程中微管蛋白的解离 | 第19-20页 |
| ·RhoA 在NET1 介导下催进细胞迁移 | 第20-21页 |
| 4. 稻瘟病菌产孢及其侵染致病机制 | 第21-22页 |
| ·稻瘟病菌的危害 | 第21页 |
| ·稻瘟病菌简介 | 第21-22页 |
| 5 稻瘟病菌 Rho 族蛋白的研究意义 | 第22页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第22-38页 |
| 1 试验材料 | 第22-24页 |
| ·供试菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·抗生素 | 第23页 |
| ·生化试剂 | 第23-24页 |
| 2 试验方法 | 第24-38页 |
| ·生物信息学分析 | 第24页 |
| ·蛋白序列极其保守结构域的同源性比较及其系统演化关系分析 | 第24页 |
| ·蛋白结构域的分析 | 第24页 |
| ·稻瘟病菌敲除及互补突变体的表型分析 | 第24-26页 |
| ·稻瘟病菌菌落生长速度测定 | 第24页 |
| ·菌丝、分生孢子、附着胞的形态观察以及分生孢子和附着胞的产量统计 | 第24-25页 |
| ·孢子萌发及附着胞形成试验 | 第25页 |
| ·分生孢子及菌丝对洋葱表皮的侵染观察 | 第25页 |
| ·大麦及水稻叶片接种试验 | 第25-26页 |
| ·分子生物学分析及检测方法 | 第26-38页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA 的提取及提取质量的检测 | 第26页 |
| ·快速提取稻瘟病菌基因组DNA | 第26-27页 |
| ·碱裂解法提取质粒DNA | 第27-28页 |
| ·稻瘟病菌菌丝体total RNA 的提取及检测 | 第28页 |
| ·反转录 | 第28-29页 |
| ·基因克隆 | 第29-31页 |
| ·稻瘟病菌原生质体制备和转化 | 第31-32页 |
| ·筛选抗性转化子 | 第32页 |
| ·Southern 杂交 | 第32-35页 |
| ·酵母双杂交 | 第35-38页 |
| ·MgRhoGef1 互补载体的构建 | 第38页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第38-55页 |
| 1 生物信息学分析 | 第38-43页 |
| ·稻瘟病菌 MgRhoGef1 蛋白的结构及功能分析 | 第38-39页 |
| ·MgRhoGef1 蛋白序列同源性搜索比对及其系统演化关系分析 | 第39-42页 |
| ·蛋白序列的等电点及分子量分析 | 第42-43页 |
| 2 表型分析 | 第43-53页 |
| ·敲除突变体的筛选与验证 | 第43页 |
| ·敲除突变体的抗性筛选 | 第43-45页 |
| ·突变体生长速度测定 | 第45-48页 |
| ·突变体在淀粉酵母培养基中的生长状况 | 第45-46页 |
| ·突变体在加有SDS 的淀粉酵母培养基中的生长状况 | 第46-48页 |
| ·菌丝产附着胞 | 第48-50页 |
| ·突变体的产孢能力 | 第50-51页 |
| ·突变体的致病性 | 第51-53页 |
| 3 酵母双杂交 | 第53-54页 |
| 4 Rho 家族蛋白及 RhoGef2 在MgRhoGef1 突变体中的表达量 | 第54-55页 |
| 第四部分 小结与讨论 | 第55-59页 |
| 1 小结 | 第55-58页 |
| ·稻瘟病菌中MgRhoGef1 蛋白的特征分析 | 第55-56页 |
| ·稻瘟病菌中该假定的MgRhoGef1 蛋白与Rho1 蛋白的关系初探 | 第56-58页 |
| ·生物信息学分析中二者的相关性 | 第56页 |
| ·MgRhoGef1 突变体表型分析中Rho1 功能的体现 | 第56-58页 |
| 2 研究意义 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-74页 |
| 附表1 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
