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针刺俞募穴改善FC小鼠胃肠传输功能的GDNF-PI3K-AKT信号转导机制研究

中文摘要第3-7页
ABSTRACT第7-10页
中英文缩略词表第12-19页
引言第19-22页
    1 研究背景第19-20页
    2 研究目的和意义第20-21页
    3 研究内容第21-22页
实验研究第22-98页
    实验一 针刺俞募穴对不同状态下小鼠胃肠传输功能影响的研究第22-38页
        1 实验材料第22-23页
            1.1 实验动物第22页
            1.2 主要试剂第22-23页
            1.3 主要仪器第23页
        2 实验方法第23-26页
            2.1 动物分组第23页
            2.2 模型建立第23-24页
            2.3 模型评估第24页
            2.4 电针治疗第24页
            2.5 药物治疗第24-25页
            2.6 Krebs液的配制第25页
            2.7 取材第25页
            2.8 观察指标第25-26页
                2.8.1 小鼠一般状态观察第25页
                2.8.2 胃排空和小肠推进率的检测第25-26页
                2.8.3 结肠平滑肌平均张力变化幅度百分数的检测第26页
            2.9 统计方法第26页
        3 实验结果第26-36页
            3.1 小鼠一般状态观察第26页
            3.2 胃排空和小肠推进率第26-31页
                3.2.1 1个疗程后各组小鼠胃排空和小肠推进率情况第27-28页
                3.2.2 2个疗程后各组小鼠胃排空和小肠推进率情况第28-30页
                3.2.3 胃排空和小肠推进率随疗程变化情况第30-31页
            3.3 结肠平滑肌平均张力检测第31-36页
                3.3.1 1个疗程后各组小鼠结肠平滑肌平均张力变化情况第32-33页
                3.3.2 2个疗程后各组小鼠结肠平滑肌平均张力变化情况第33-35页
                3.3.3 结肠平滑肌平均张力变化随疗程变化情况第35-36页
        4 小结第36-38页
            4.1 针刺俞募穴对不同状态小鼠胃排空和小肠推进率的影响第36页
            4.2 针刺俞募穴对不同状态小鼠结肠平滑肌张力的影响第36-38页
    实验二 针刺俞募穴对FC小鼠结肠组织形态影响的研究第38-63页
        1 实验材料第38-39页
            1.1 实验动物第38页
            1.2 主要试剂第38页
            1.3 主要仪器第38-39页
        2 实验方法第39-44页
            2.1 动物分组第39页
            2.2 模型建立第39-40页
            2.3 模型评估第40页
            2.4 电针治疗第40页
            2.5 EGC抑制剂配制及注射方法第40页
            2.6 取材第40页
            2.7 观察指标第40-41页
                2.7.1 小鼠排便情况观察第40页
                2.7.2 结肠组织形态学观察第40-41页
                2.7.3 平滑肌细胞形态学观察第41页
                2.7.4 平滑肌细胞凋亡观察第41页
            2.8 检测方法第41-43页
                2.8.1 病理形态学第41-42页
                2.8.2 电镜第42页
                2.8.3 细胞凋亡法第42-43页
            2.9 统计方法第43-44页
        3 实验结果第44-61页
            3.1 小鼠排便情况观察第44-48页
                3.1.1 1个疗程后各组小鼠排便情况第44-45页
                3.1.2 2个疗程后各组小鼠排便情况第45-47页
                3.1.3 小鼠排便随疗程变化情况第47-48页
            3.2 结肠组织形态学观察第48-53页
                3.2.1 1个疗程后各组结肠组织形态学观察第48-51页
                3.2.2 2个疗程后各组结肠组织形态学观察第51-53页
                3.2.3 结肠组织形态随疗程变化情况第53页
            3.3 平滑肌细胞形态观察第53-58页
                3.3.1 1个疗程后各组平滑肌细胞形态学观察第53-55页
                3.3.2 2个疗程后各组平滑肌细胞形态学观察第55-58页
                3.3.3 平滑肌细胞形态随疗程变化情况第58页
            3.4 平滑肌细胞凋亡观察第58-61页
                3.4.1 1个疗程后各组小鼠平滑肌凋亡细胞阳性表达率第58-59页
                3.4.2 2个疗程后各组小鼠平滑肌凋亡细胞阳性表达率第59-60页
                3.4.3 平滑肌凋亡细胞阳性表达率随疗程变化情况第60-61页
        4 小结第61-63页
            4.1 针刺俞募穴对FC小鼠排便情况的影响第61页
            4.2 针刺俞募穴对FC小鼠结肠组织形态的影响第61-62页
            4.3 针刺俞募穴对FC小鼠平滑肌细胞超微结构的影响第62页
            4.4 针刺俞募穴对FC小鼠平滑肌细胞凋亡阳性表达率的影响第62-63页
    实验三 针刺俞募穴对功能性便秘小鼠GDNF-PI3K-AKT信号转导通路影响的研究第63-98页
        1 实验材料第63-65页
            1.1 实验动物第63页
            1.2 主要试剂第63-64页
            1.3 主要仪器第64-65页
        2 实验方法第65-73页
            2.1 动物分组第65页
            2.2 模型建立第65页
            2.3 模型评估第65页
            2.4 电针治疗第65-66页
            2.5 EGC抑制剂配制及注射方法第66页
            2.6 取材第66页
            2.7 观察指标第66-67页
                2.7.1 GDNF蛋白、Rai蛋白及其mRNA表达水平的检测第66页
                2.7.2 RET的mRNA及蛋白表达水平的检测第66页
                2.7.3 PI3K、Akt磷酸化水平的检测第66页
                2.7.4 mTOR蛋白表达水平的检测第66-67页
            2.8 检测方法第67-73页
                2.8.1 免疫组化法第67页
                2.8.2 原位杂交法第67-68页
                2.8.3 PCR法第68-70页
                2.8.4 Western Blot法第70-73页
            2.9 统计方法第73页
        3 实验结果第73-96页
            3.1 GDNF蛋白表达水平的检测第73-76页
                3.1.1 1个疗程后各组小鼠GDNF蛋白第74页
                3.1.2 2个疗程后各组小鼠GDNF蛋白第74-75页
                3.1.3 GDNF蛋白表达水平随疗程变化情况第75-76页
            3.2 Rai蛋白及其mRNA表达水平的检测第76-81页
                3.2.1 1个疗程后各组小鼠Rai蛋白及其mRNA第76-78页
                3.2.2 2个疗程后各组小鼠Rai蛋白及其mRNA第78-80页
                3.2.3 Rai蛋白及其mRNA表达水平随疗程变化情况第80-81页
            3.3 RET蛋白及其mRNA表达水平的检测第81-86页
                3.3.1 1个疗程后各组小鼠RET蛋白及mRNA表达情况第82-84页
                3.3.2 2个疗程后各组小鼠RET蛋白及mRNA表达情况第84-85页
                3.3.3 RET蛋白及mRNA表达随疗程变化情况第85-86页
            3.4 PI3K、Akt蛋白磷酸化水平的检测第86-93页
                3.4.1 1个疗程后各组小鼠PI3K、Akt表达情况第87-89页
                3.4.2 2个疗程后各组小鼠PI3K、Akt表达情况第89-92页
                3.4.3 PI3K、Akt表达情况随疗程变化情况第92-93页
            3.5 mTOR蛋白表达水平的检测第93-96页
                3.5.1 1个疗程后各组小鼠mTOR表达情况第93-94页
                3.5.2 2个疗程后各组mTOR表达情况第94-95页
                3.5.3 mTOR蛋白表达情况随疗程变化情况第95-96页
        4 小结第96-98页
            4.1 针剌俞募穴对FC小鼠结肠内GDNF蛋白表达的调控第96页
            4.2 针刺俞募穴对FC小鼠结肠内Rai蛋白及其mRNA表达的调控第96页
            4.3 针刺俞募穴对FC小鼠结肠内RET蛋白及其mRNA表达的调控第96-97页
            4.4 针刺俞募穴对FC小鼠结肠内PI3K、Akt表达的调控第97页
            4.5 针刺俞募穴对FC小鼠结肠内mTOR表达的调控第97-98页
讨论第98-134页
    1 祖国医学对本病的认识第98-99页
        1.1 对病名的认识第98页
        1.2 对病因病机的认识第98页
        1.3 对本病治疗的认识第98-99页
    2 现代医学对本病的认识第99-102页
        2.1 本病的定义及临床表现第99页
        2.2 对病理机制的认识第99-102页
        2.3 对本病治疗的认识第102页
    3 针灸治疗功能性便秘的临床评价第102-105页
        3.1 针灸治疗本病的疗效及优势第102-103页
        3.2 本病的针灸选穴第103-105页
        3.3 本病的刺灸方法第105页
    4 针灸治疗功能性便秘的作用机理探讨第105-109页
        4.1 神经系统调节第105-107页
            4.1.1 中枢神经系统第105-106页
            4.1.2 肠神经系统第106-107页
            4.1.3 自主神经系统第107页
        4.2 内分泌、体液调节第107-108页
        4.3 结肠电活动调节第108页
        4.4 心理调节第108-109页
    5 关于本实验研究方案的确定第109-118页
        5.1 本实验动物模型的建立与评估第109-110页
            5.1.1 模型的建立第109-110页
            5.1.2 模型成功的评估方法第110页
        5.2 本实验干预措施的选择第110-113页
            5.2.1 针灸处方的选择第111-112页
            5.2.2 针刺时间的选择第112页
            5.2.3 针刺疗程的选择第112页
            5.2.4 阳性药物的选择第112-113页
            5.2.5 EGC抑制剂的选择第113页
        5.3 本实验指标检测方法的确定第113-117页
            5.3.1 形态学观察第114页
            5.3.2 胃肠传输功能的检测第114-115页
            5.3.3 GDNF-PI3K-Akt信号转导通路的检测第115-117页
        5.4 本实验各研究部分的设计第117-118页
    6 关于本实验研究结果的讨论第118-134页
        6.1 针刺俞募穴对FC小鼠胃肠传输功能影响的研究第118-120页
            6.1.1 针刺俞募穴与胃排空和小肠推进率第118-119页
            6.1.2 针刺俞募穴与结肠收缩张力变化幅度第119-120页
        6.2 针刺俞募穴对FC小鼠结肠组织形态的影响第120-121页
            6.2.1 结肠组织和肌间神经丛第120-121页
            6.2.2 针刺与结肠组织、肌间神经丛第121页
        6.3 针刺俞募穴对FC小鼠平滑肌细胞形态的影响第121-123页
            6.3.1 平滑肌细胞与胃肠动力第121-122页
            6.3.2 针刺与平滑肌细胞第122-123页
        6.4 针刺俞募穴对FC小鼠EGC细胞及其分泌的GDNF表达影响的研究第123-124页
            6.4.1 针刺与EGC细胞第123-124页
            6.4.2 针刺与EGC分泌的GDNF第124页
        6.5 针刺俞募穴对FC小鼠GDNF-PI3K-Akt信号转导通路表达影响的研究第124-128页
            6.5.1 GDNF-PI3K-Akt信号转导通路第124-126页
            6.5.2 针刺与GDNF-PI3K-Akt信号转导通路第126-128页
        6.6 针刺俞募穴对FC小鼠mTOR表达影响的研究第128-131页
            6.6.1 mTOR蛋白与自噬第128-129页
            6.6.2 自噬与CNS、PNS、ENS第129-130页
            6.6.3 自噬与消化系统疾病第130页
            6.6.4 针刺与mTOR蛋白及自噬第130-131页
        6.7 针刺俞募穴对健康小鼠各指标的影响第131页
        6.8 针刺疗程与效应之间的关系第131-134页
结论第134-135页
创新性和先进性第135-136页
问题与展望第136-138页
致谢第138-139页
参考文献第139-151页
附录第151页
附录一 附图第151-159页
    1 电针治疗过程第151页
    2 GDNF蛋白检测图片第151-152页
    3 Rai蛋白及mRNA检测图片第152-155页
    4 RET蛋白检测图片第155-156页
    5 PCR溶解曲线第156页
    6 mTOR图片第156-158页
    7 EGC抑制组电镜图片第158页
    8 S100B免疫组化图片第158-159页
附录二第159-174页
    综述一 GDNF-PI3K-AKT信号通路在针刺治疗功能性便秘中的应用现状分析第159-167页
        参考文献第163-167页
    综述二 肠道菌群在功能性便秘治疗中的研究进展第167-174页
        参考文献第171-174页
附录三 在读期间公开发表的学术论文、专利及科研成果第174-177页
    (一) 期刊论文第174-175页
    (二) 专利第175页
    (三) 课题第175-176页
    (四) 获奖第176-177页

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