| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 中文文摘 | 第4-11页 |
| 绪论 | 第11-19页 |
| 1 先天免疫概述 | 第11-13页 |
| 1.1 先天免疫简介 | 第11页 |
| 1.2、cGAS-STING信号通路 | 第11-13页 |
| 2 干扰素概述 | 第13-15页 |
| 3 转基因小鼠的研究 | 第15-16页 |
| 4 Crispr/Cas9系统概述 | 第16-17页 |
| 4.1 Ⅱ型Crispr/Cas9系统结构与作用原理 | 第16-17页 |
| 4.2 Crispr/Cas9系统的运用 | 第17页 |
| 5 课题研究背景、意义及内容 | 第17-19页 |
| 第一章 cGAS-STING抗病毒信号通路中RNF5、IFNAR基因敲除的L929细胞系构建 | 第19-47页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 第一节 材料与方法 | 第21-39页 |
| 1.1 材料 | 第21-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-38页 |
| 1.3 cGAS-STING通路相关基因的初步筛选 | 第38页 |
| 1.4 图像分析和数据统计 | 第38-39页 |
| 第二节 结果 | 第39-45页 |
| 2.1 RNF5、IFNAR阳性菌株鉴定 | 第39页 |
| 2.2 敲除载体PX459-KO-M-RNF5,PX459-KO-M-IFNAR的鉴定 | 第39-41页 |
| 2.3 建立了cGAMP诱导细胞IRF3二聚化及IFNβ表达的方法 | 第41-42页 |
| 2.4 RNF5,IFNAR基因敲除的L929稳定细胞株的鉴定 | 第42-43页 |
| 2.5 敲除细胞株的功能的鉴定 | 第43-45页 |
| 第三节 讨论 | 第45-47页 |
| 第二章 构建检测IFN β的系列载体 | 第47-69页 |
| 前言 | 第47-49页 |
| 第一节 材料与方法 | 第49-59页 |
| 2.1 材料 | 第49-50页 |
| 2.2 实验方法 | 第50-59页 |
| 第二节 结果 | 第59-67页 |
| 2.1 Pmd19-t-EGFP、PGL3-Enhancer-EGFP载体验证 | 第59-61页 |
| 2.2 人源和鼠源Pmd19-t-IFNβ-promoter载体验证 | 第61-62页 |
| 2.3 h-PGL_3-Enhancer-IFNβ-promoter-EGFP、m-PGL_3-Enhancer-IFNβ-promoter-EGFP载体验证 | 第62-63页 |
| 2.4 V5-IFNβ-promoter-EGFP载体验证 | 第63页 |
| 2.5 敲除载体PX459-Rosa26-sg验证 | 第63-64页 |
| 2.6 人源IFNβ-promoter和EGFP有效性的验证 | 第64-65页 |
| 2.7 鼠源IFNβ-promoter有效性的验证 | 第65-66页 |
| 2.8 V5-IFNβ-promoter-EGFP和PX459-Rosa26-sg有效性验证 | 第66-67页 |
| 第三节 讨论 | 第67-69页 |
| 第三章 利用CRISPR/Cas9技术构建诱导性表达EGFP转基因小鼠 | 第69-81页 |
| 前言 | 第69-71页 |
| 第一节 材料与方法 | 第71-77页 |
| 1 材料 | 第71-72页 |
| 1.1 实验小鼠及试验环境 | 第71页 |
| 1.2 仪器和试剂 | 第71-72页 |
| 1.3 试剂配制 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-77页 |
| 2.1 超数排卵 | 第72页 |
| 2.2 C57BL雄鼠结扎 | 第72-73页 |
| 2.3 制备假孕母鼠 | 第73-74页 |
| 2.4 胚胎收集 | 第74页 |
| 2.5 显微注射 | 第74-75页 |
| 2.6 受精卵移植 | 第75-76页 |
| 2.7 出生小鼠鉴定 | 第76-77页 |
| 第二节 结果 | 第77-79页 |
| 2.1 PCR鉴定小鼠的基因型 | 第77-78页 |
| 2.2 PCR产物测序鉴定 | 第78-79页 |
| 第三节 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 个人简历 | 第89-93页 |
